一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物及其制備方法，它包含如下重量份數(shù)的原料藥：柴胡10~20份、香附10~20份、大黃5~15份、青皮5~15份、川芎5~15份、莪術(shù)5~15份、浙貝母5~15份、當(dāng)歸10~20份、白芍10~20份、土鱉蟲5~15份、王不留行5-15份。本發(fā)明根據(jù)中醫(yī)藥理論，辨證論治，經(jīng)科學(xué)組方制定本發(fā)明，并且采用現(xiàn)代化學(xué)成分提取分離和藥理實(shí)驗(yàn)跟蹤方法，篩選出活性成分及其最佳的制備工藝，并且藥理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明提供的中藥復(fù)方提取物具有很好的治療乳腺增生的效果，無毒副作用。本發(fā)明提供的制備方法，工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，制備得到的提取物，質(zhì)量穩(wěn)定，可制備多種口服藥物制劑，臨床服用方便，生物利用度高，安全性高。
【專利說明】一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物及其制備方法
[0001]優(yōu)先權(quán)
[0002]對于本申請， 申請人:要求在中國申請的專利，申請日為2013年7月30日，申請?zhí)枮?01310326156.4的優(yōu)先權(quán)。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003]本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方，具體是涉及一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0004]乳腺增生病是常見的婦女外科疾病，其發(fā)病率占全部乳房疾病的75%，占育齡婦女的40%，嚴(yán)重影響廣大婦女的身心健康，更在于該病具有發(fā)展成乳腺癌的危險(xiǎn)性，引起癌變的可能性約占2~4%。因而積極治療乳腺增生病，提高婦女健康水平，降低癌變率有非常重大的意義。
[0005]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，乳腺增生病的發(fā)生是因內(nèi)分泌功能紊亂、卵巢功能失調(diào)，致使體內(nèi)雌激素水平增高或活性增強(qiáng)，孕激素水平下降所致。對于乳腺增生疼痛較重或局部結(jié)節(jié)明顯，壓痛明顯的患者，臨床多用性激素療法和內(nèi)分泌療法。如黃體酮，丹那唑、他莫昔芬、溴隱亭等。用上述方法治療，療效雖好，但副作用較大，藥物價(jià)格較昂貴，不能長期堅(jiān)持治療，而停藥后疼痛復(fù)發(fā)，腫塊增大，最終仍需繼續(xù)治療一手術(shù)切除。尤其是性激素應(yīng)用后可能會(huì)進(jìn)一步干擾人體激素間的平衡，增加癌變的可能性。綜上所述，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療此病目前以手術(shù)為主，藥物為輔。無論是手術(shù)切除、藥物治療，都存在費(fèi)用高、副作用明顯、創(chuàng)傷面大、手術(shù)或停藥后易復(fù)發(fā)等缺點(diǎn)。因此西醫(yī)對該病尚無理想的解決途徑和治療方法。
[0006]祖國醫(yī)藥對乳腺增生病自古以來就有深刻的認(rèn)識，乳腺增生屬于“乳癖”、“乳痞”、“乳中結(jié)核”的范疇，有關(guān)“乳癖”的證候論述從漢代的《中藏經(jīng)》到清代《瘍醫(yī)大全》均有詳細(xì)記載。認(rèn)為此病與精神因素有關(guān)，主要與肝、腎、脾等腑臟關(guān)系密切。病因、病機(jī)為情志內(nèi)傷、氣滯血瘀、沖任失調(diào)、痰瘀凝結(jié)、乳絡(luò)受阻所致。肝主疏泄，宜調(diào)達(dá)，肝經(jīng)氣郁，氣血周流失度，氣血凝滯；思慮傷脾，脾運(yùn)失司，痰濁內(nèi)生；痰濁和血瘀互結(jié)阻于乳絡(luò)而結(jié)成乳癖。采用中醫(yī)藥對乳腺增生病進(jìn)行治療，具有療效可靠、副作用小等優(yōu)勢。
[0007]雷允上藥業(yè)有限公司產(chǎn)品消癥丸(國藥準(zhǔn)字Z20100057)，其發(fā)明專利一種治療乳腺增生病和子宮肌瘤的藥物組合物及其制備方法(專利號:ZL201110057527.4)公開了一種治療乳腺增生病和子宮肌瘤的藥物組合物及其制備方法，該方法使用簡單的水或醇提取各藥材，噴霧干燥的浸膏粉，而且大黃部分原粉入藥，其不足之處在于:
[0008]1、簡單的水或醇提取各藥材，部分大黃原粉入藥，患者日服藥量太大，不方便，依從性低。
[0009]2、簡單提取、原粉入藥，生物利用率低，未經(jīng)純化，藥物含雜質(zhì)較多，安全性低。
[0010] 綜上所述，現(xiàn)有技術(shù)具有對提取物純化不夠，患者日服用量過多，依從性差，生物利用度低，安全性低等缺陷。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0011]發(fā)明目的:本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種療效可靠，依從性高，生物利用度高，安全性能高，不良反應(yīng)低，價(jià)格易于廣大病患接受的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物及其制備方法。
[0012]技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:
[0013]一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，它由下列重量份數(shù)的原料制得:
[0014]柴胡10~20份、香附10~20份、大黃5~15份、青皮5~15份、川彎5~15份、莪術(shù)5~15份、浙貝母5~15份、當(dāng)歸10~20份、白芍10~20份、土鱉蟲5~15份、王不留行5-15份。
[0015]作為優(yōu)選方案，它由下列重量份數(shù)的原料制得:
[0016]柴胡12~18份、香附12~18份、大黃8~12份、青皮8~12份、川彎8~12份、莪術(shù)8~12份、浙貝母8~12份、當(dāng)歸12~18份、白芍12~18份、土鱉蟲8~12份、王不留行8~12份。
[0017]作為優(yōu)選方案，它由下列重量份數(shù)的原料制得:
[0018]柴胡15份、香附15份、大黃10份、青皮10份、川芎10份、莪術(shù)10份、浙貝母10份、當(dāng)歸15份、白芍15份、土鱉蟲10份、王不留行10份。
[0019]各原料藥的重量配比還優(yōu)選:
[0020]柴胡20份、香附20份、大黃5份、青皮5份、川芎5份、莪術(shù)15份、浙貝母15份、當(dāng)歸10份、白芍20份、土鱉蟲5份、王不留行15份。
[0021]各原料藥的重量配比還優(yōu)選:
[0022]柴胡10份、香附10份、大黃15份、青皮15份、川芎15份、莪術(shù)5份、浙貝母5份、當(dāng)歸20份、白芍10份、土鱉蟲15份、王不留行5份。
[0023]各原料藥的重量配比還優(yōu)選:
[0024]柴胡10份、香附10份、酒炙大黃5份、炒青皮5份、川芎5份、莪術(shù)5份、浙貝母5份、當(dāng)歸10份、白芍10份、土鱉蟲5份、炒王不留行5份。
[0025]各原料藥的重量配比還優(yōu)選:
[0026]柴胡12份、香附12份、大黃8份、青皮8份、川芎8份、莪術(shù)8份、浙貝母8份、當(dāng)歸12份、白芍12份、土鱉蟲82份、王不留行8份。
[0027]各原料藥的重量配比還優(yōu)選:
[0028]柴胡18份、香附18份、大黃12份、青皮12份、川芎12份、莪術(shù)12份、浙貝母12份、當(dāng)歸18份、白芍18份、土鱉蟲12份、王不留行12份。
[0029]本發(fā)明配方中，大黃優(yōu)選酒炙大黃，青皮優(yōu)選炒青皮，王不留行優(yōu)選炒王不留行。
[0030]本發(fā)明提供的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，可以和可接受的載體制備成口服液體制劑、丸劑、顆粒劑、滴丸劑、片劑、膠囊劑、散劑。
[0031]所述中藥提取物，其制備方法包括下述工藝步驟:
[0032]a、取柴胡、大黃、浙貝母、白芍、王不留行加水或(:卜3醇提取，提取液過濾，濾液濃縮至0.25~4g生藥/mL藥液；
[0033]b、取香附、川芎、莪術(shù)、當(dāng)歸、青皮采用水蒸氣蒸餾法提取，獲得的揮發(fā)油采用環(huán)糊精包合；提取液過濾，濾液濃縮，加入乙醇使乙醇的濃度為60%~80%，放置沉淀，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至0.25~4g生藥/mL藥液；
[0034]C、取步驟a制備得到的藥液和步驟b制備得到的藥液，混合后上大孔吸附樹脂柱，靜置吸附后，用去離子水洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用濃度為5%~20%的C卜3醇作洗脫劑洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用濃度為40%~90%的(:卜3醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去C1~3醇，濃縮至0.5~2g生藥/ml藥液；
[0035]d、取土鱉蟲5~15份，加水或(:卜3醇提取，提取液過濾，濾液濃縮至0.5~2g生藥/ml藥液；
[0036]e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，濃縮干燥，粉碎，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物混合均勻，即得。
[0037]作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，步驟a、C、d所述的C1~3醇為甲醇、乙醇或丙醇。
[0038]作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，步驟a為取柴胡、大黃、浙貝母、白芍、王不留行加8~12倍量水或(:卜3醇提取I~3次，每次I~3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至0.25~4g生藥/mL藥液；
[0039]作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，步驟b取川芎、莪術(shù)、當(dāng)歸、青皮采用8~15倍量水水蒸氣蒸餾法提取3~12h，獲得的揮發(fā)油每毫升揮發(fā)油采用5~10gi3 -環(huán) 糊精包合；提取液過濾，加入乙醇使乙醇的濃度為60%~80%，放置6~24小時(shí)，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至0.25~4g生藥/mL藥液；
[0040]作為更優(yōu)選方案，以上所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，步驟b所述的環(huán)糊精包合方法為:每毫升揮發(fā)油用8~10gi3-環(huán)糊精，溶于80~100mL水中，在60V~70°C的條件下，攪拌I~3小時(shí)包合，包合物70°C以下干燥，得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物；
[0041]作為更優(yōu)選的方法，步驟b所述的環(huán)糊精包合方法為:每毫升揮發(fā)油用Sg β_環(huán)糊精，溶于80ml水中，在60°C的條件下，攪拌I小時(shí)包合，包合物在70°C以下干燥。本發(fā)明通過大量實(shí)驗(yàn)篩選，優(yōu)選得到最佳的包合工藝，制備得到的揮發(fā)油包合物穩(wěn)定性高，從而可以保證藥效。
[0042]作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，步驟c所述的大孔吸附樹脂為D101、HPD100、X-5或AB-8大孔吸附樹脂。
[0043]作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，步驟c中大孔樹脂柱其徑高比為:1:3~1:10，采用5~10倍柱體積，濃度為40%~90%的(:卜3醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去C1~3醇，濃縮至0.5~2g生藥/ml藥液；
[0044]作為優(yōu)選方案，以上所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，步驟d取土鱉蟲5~15份，10~12倍量的水或(:卜3醇提取I~3次，每次I~3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至0.5~2g生藥/ml藥液。
[0045]本發(fā)明提供的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物在制備抗乳腺增生藥物中的應(yīng)用。
[0046]本發(fā)明提供的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方口服液、丸劑、顆粒劑、滴丸劑、片劑、膠囊劑、散劑，由以上所述的中藥復(fù)方提取物中加入相應(yīng)的常規(guī)制劑輔料制得。[0047]本發(fā)明提供的抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制成片劑時(shí)，把上述中藥復(fù)方提取物和乳糖或玉米淀粉，需要時(shí)加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，整粒，然后壓片制成片劑。
[0048]本發(fā)明提供的抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制成膠囊劑時(shí)把上述中藥復(fù)方提取物和載體乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。
[0049]本發(fā)明提供的抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制成顆粒劑時(shí)，把上述中藥復(fù)方提取物和稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。
[0050]本發(fā)明提供的抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制成口服液時(shí)，把上述中藥復(fù)方提取物加純化水溶解，加入糖漿，調(diào)節(jié)PH，制成口服液。
[0051]有益效果:本發(fā)明提供的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0052]本發(fā)明采用現(xiàn)代化學(xué)成分提取分離和藥理實(shí)驗(yàn)跟蹤方法，篩選出活性成分及其最佳的制備工藝，分離純化得到有效成分，工藝穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，制備得到的提取物，質(zhì)量穩(wěn)定，使用方便，可制備多種口服藥物制劑，臨床應(yīng)用服用量少，方便臨床服用，生物利用度高，安全性高。并且藥理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明提供的中藥復(fù)方提取物具有很好的治療乳腺增生的效果，無毒副作用。
【具體實(shí)施方式】
[0053]下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對本發(fā)明的各種等價(jià)形式的修改均落于本申請所附權(quán)利要求所限定的范圍。
[0054]實(shí)施例1
[0055]一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物的制備方法，
[0056]處方:柴胡15份、香附15份、大黃10份、青皮10份、川芎10份、莪術(shù)10份、浙貝母10份、當(dāng)歸15份、白芍15份、土鱉蟲10份、王不留行10份。
[0057]制備步驟:
[0058]a、取:柴胡15份、大黃10份、浙貝母10份、白芍15份、王不留行10份過60目篩的粉混合，加12倍量70%乙醇回流提取3次，每次3h，過濾，濾液濃縮至0.3g生藥/mL藥液；
[0059]b、取香附15份、川芎10份、莪術(shù)10份、當(dāng)歸15份、青皮10份按比例混合，加藥材總重量15倍的水，采用水蒸氣蒸餾法提取3h，得揮發(fā)油成分；提取液過濾，濾液濃縮至生藥量為0.75g/ml，然后加乙醇至醇濃度為70%，靜置沉淀24h，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至0.3g生藥/ml藥液；
[0060] 揮發(fā)油部分每毫升使用10gi3-環(huán)糊精，溶于80ml水中，在60°C的條件下包結(jié)、攪拌I小時(shí)，包合物70°C下干燥，得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物；
[0061 ] C、將步驟a提取液和步驟b提取液混合，上AB-8大孔吸附樹脂，徑高比1:10，靜置吸附12h后，用去離子水洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用20%的乙醇作洗脫劑洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用5倍柱體積的80%的乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去乙醇，濃縮至1.5g生藥/ml藥液；
[0062]d、取土鱉蟲10份，加入藥材重量10倍的水提取I次，每次lh，過濾，合并濾液，濃縮至1.5g生藥/ml藥液；
[0063]e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，噴霧干燥，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物粉碎，混合均勻，即得。
[0064]f、取步驟e提取物加入乳糖，加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，整粒，然后壓片制成片劑。
[0065]實(shí)施例2
[0066]本發(fā)明所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制備方法，
[0067]處方:柴胡20份、香附20份、酒炙大黃15份、炒青皮15份、川芎15份、莪術(shù)15份、浙貝母15份、當(dāng)歸20份、白芍20份、土鱉蟲15份、炒王不留行15份。
[0068]制備步驟:
[0069]a、取柴胡20份、酒炙大黃15份、浙貝母15份、白芍20份、炒王不留行15份，分別加12、10和8倍量的水提取3次，每次2小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至0.4g生藥/mL藥液；[0070]b、取香附20份、川彎15份、莪術(shù)15份、當(dāng)歸20份、炒青皮15份，加藥材總重量12倍的水，采用水蒸氣蒸餾法提取6h，獲得的揮發(fā)油，每毫升揮發(fā)油用Sg β -環(huán)糊精，溶于90ml水中，在70°C的條件下，攪拌2小時(shí)包合，包合物于60°C干燥，得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物；提取液過濾，濾液濃縮至生藥量為0.85g/ml，加入乙醇使乙醇的濃度為80%，放置12小時(shí)，過濾，濾液減壓回收去除乙醇，濃縮至0.4g生藥/mL藥液；
[0071]C、取步驟a制備得到的藥液和步驟b制備得到的藥液，混合后上Dltll大孔吸附樹月旨，徑高比1: 5，靜置吸附后，用去離子水洗脫至流洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用濃度為15%的乙醇醇作洗脫劑洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用10倍柱體積濃度為70%的乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去乙醇，濃縮至2g生藥/ml藥液；
[0072]d、取土鱉蟲15份，加10倍量的水提取I次，每次I小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至2g 生藥 /Iml ；
[0073]e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，60°C真空壓干燥，粉碎，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物混合均勻，即得。
[0074]f、取步驟e提取物加入適量淀粉或環(huán)糊精，制粒，裝膠囊制成膠囊劑。
[0075]實(shí)施例3
[0076]本發(fā)明所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制備方法，
[0077]處方:柴胡10份、香附10份、酒炙大黃15份、炒青皮15份、川芎15份、莪術(shù)5份、浙貝母5份、當(dāng)歸20份、白芍10份、土鱉蟲15份、炒王不留行5份。
[0078]制備步驟:
[0079]a、取柴胡10份、酒炙大黃15份、浙貝母5份、白芍10份、炒王不留行5份，加入10倍量，濃度為85%乙醇提取3次，每次2小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至Ig生藥/mL藥液；
[0080]b、取香附10份、川彎15份、莪術(shù)5份、當(dāng)歸20份、炒青皮15份，加入8倍量水，米用水蒸氣蒸餾法提取12h，獲得的揮發(fā)油，每毫升揮發(fā)油用5gi3-環(huán)糊精，溶于80ml水中，在60°C的條件下，攪拌3小時(shí)包合，包合物于65°C干燥，得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物；提取液過濾，濾液濃縮至生藥量0.65g/ml，加入乙醇使乙醇的濃度為60%，放置24小時(shí)，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至Ig生藥/mL藥液；[0081]C、取步驟a制備得到的藥液和步驟b制備得到的藥液，混合后上HPD100大孔吸附樹脂，徑高比1:8，靜置吸附后，用去離子水洗脫至流洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用濃度為20%的乙醇作洗脫劑洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用10倍柱體積濃度為90%的乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去乙醇，濃縮至Ig生藥/ml藥液；
[0082]d、取土鱉蟲15份，加10倍量的濃度為75%的乙醇提取2次，每次3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至Ig生藥/ml藥液；
[0083]e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，微波干燥，粉碎，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物混合均勻，即得。
[0084]f、取步驟e提取物加入純化水溶解，加入糖漿，調(diào)節(jié)pH，制成口服液。
[0085]實(shí)施例4
[0086]本發(fā)明所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制備方法，
[0087]處方:柴胡10份、香附10份、酒炙大黃5份、炒青皮5份、川芎5份、莪術(shù)5份、浙貝母5份、當(dāng)歸10份、白芍10份、土鱉蟲5份、炒王不留行5份。
[0088]制備步驟:
[0089]a、取柴胡10份、酒炙大黃5份、浙貝母5份、白芍10份、炒王不留行5份，加入10倍量水，提取3次，每次2小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至0.8g生藥/mL藥液；
[0090]b、取香附10份、川彎5份、莪術(shù)5份、當(dāng)歸10份、炒青皮5份,加10倍量水，米用水蒸氣蒸餾法提取8h，獲得的揮發(fā)油，每毫升揮發(fā)油用9gi3-環(huán)糊精，溶于100mL水中，在70°C的條件下，攪拌2小時(shí)包合，包合物于60°C干燥，得揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物；提取液過濾，濾液濃縮至生藥量0.7g/ml，加入乙醇使乙醇的濃度為70%，放置12h，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至0.8g生藥/mL藥液；
[0091]C、取步驟a制備得到的藥液和步驟b制備得到的藥液，混合后上X-5大孔吸附樹脂柱，柱徑高比為1:6，靜置吸附后，用去離子水洗脫至流洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用濃度為20%的乙醇作洗脫劑洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用10倍柱體積濃度60%的乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去乙醇醇，濃縮至2g生藥/ml藥液；
[0092]d、取土鱉蟲5份，加12倍量的水提取2次，每次3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至2g生藥/ml藥液；
[0093]e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，真空干燥，粉碎，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物混合均勻，即得。
[0094]f、取步驟e提取物加入純化水溶解，加入糖漿，調(diào)節(jié)pH，制成口服液。
[0095]實(shí)施例5
[0096]本發(fā)明所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制備方法，
[0097]柴胡12份、香附12份、大黃8份、青皮8份、川芎8份、莪術(shù)8份、浙貝母8份、當(dāng)歸12份、白芍12份、土鱉蟲8份、王不留行8份。
[0098]制備步驟:
[0099]a、取柴胡12份、酒炙大黃8份、浙貝母8份、白芍12份、炒王不留行8份，加入12倍量水，提取2次，每次2小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至1.0g生藥/mL藥液；
[0100] b、取香附12份、川彎8份、莪術(shù)8份、當(dāng)歸12份、炒青皮8份,加15倍量水，米用水蒸氣蒸餾法提取10h，獲得的揮發(fā)油，每毫升揮發(fā)油用10gi3-環(huán)糊精，溶于100mL水中，在60°C的條件下，攪拌3小時(shí)包合，包合物于60°C干燥，得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物；提取液過濾，濾液濃縮至生藥量0.8g/ml，加入乙醇使乙醇的濃度為60%，放置12h，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至1.0g生藥/mL藥液；
[0101]C、取步驟a制備得到的藥液和步驟b制備得到的藥液，混合后上AB-8大孔吸附樹脂柱，柱徑高比為1:3，靜置吸附后，用去離子水洗脫至流洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用濃度為20%的乙醇作洗脫劑洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用10倍柱體積濃度60%的乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去乙醇醇，濃縮至1.0g生藥/ml藥液；
[0102]d、取土鱉蟲8份，加12倍量的水提取2次，每次2小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至
1.0g生藥/ml藥液；
[0103]e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，真空干燥，粉碎，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物混合均勻，即得。
[0104]f、取步驟e提取物加入純化水溶解，加入糖漿，調(diào)節(jié)pH，制成口服液。[0105]實(shí)施例6
[0106]本發(fā)明所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物制備方法，
[0107]柴胡18份、香附18份、大黃12份、青皮12份、川芎12份、莪術(shù)12份、浙貝母12份、當(dāng)歸18份、白芍18份、土鱉蟲12份、王不留行12份。
[0108]制備步驟:
[0109]a、取柴胡18份、酒炙大黃12份、浙貝母12份、白芍18份、炒王不留行12份，加入8倍量水，提取3次，每次3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至1.5g生藥/mL藥液；
[0110]b、取香附18份、川彎12份、莪術(shù)12份、當(dāng)歸18份、炒青皮12份，加8倍量水，米用水蒸氣蒸餾法提取12h，獲得的揮發(fā)油，每毫升揮發(fā)油用5gi3-環(huán)糊精，溶于100mL水中，在70°C的條件下，攪拌3小時(shí)包合，包合物于60°C干燥，得揮發(fā)油β -環(huán)糊精包合物；提取液過濾，濾液濃縮至生藥量0.85g/ml，加入乙醇使乙醇的濃度為60%，放置18h，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至1.5g生藥/mL藥液；
[0111]C、取步驟a制備得到的藥液和步驟b制備得到的藥液，混合后上DlOl大孔吸附樹脂柱，柱徑高比為1:10，靜置吸附后，用去離子水洗脫至流洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用濃度為20%的乙醇作洗脫劑洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用10倍柱體積濃度60%的乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去乙醇醇，濃縮至2g生藥/ml藥液；
[0112]d、取土鱉蟲12份，加5倍量的水提取3次，每次3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至2g生藥/ml藥液；
[0113]e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，真空干燥，粉碎，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物混合均勻，即得。
[0114]f、取步驟e提取物加入純化水溶解，加入糖漿，調(diào)節(jié)pH，制成口服液。
[0115]實(shí)施例7
[0116]中藥復(fù)方提取物對大鼠乳腺增生作用的影響研究
[0117]1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模:取體重為170~200g清潔級SD雌性未孕大鼠120只，用雌二醇及黃體酮聯(lián)合誘導(dǎo)形成乳腺增生模型，方法為:除空白對照組肌注生理鹽水0.25ml/kg、I次/天，連續(xù)注射25天外,其余各組均肌注雌二醇0.5mg/kg、l次/天、連續(xù)20天，繼而改用肌注黃體酮5mg/kg、l次/天、連續(xù)5天。[0118]2、實(shí)驗(yàn)分組:將造模大鼠按乳腺增生情況隨機(jī)分組并給藥。給藥組分為消乳散結(jié)組(0.9g/kg)，國藥準(zhǔn)字Z20100057的消癥丸低劑量組(2.7g生藥量/kg)，國藥準(zhǔn)字Z20100057的消癥丸高劑量組(8.1g生藥量/kg)，本發(fā)明實(shí)施例1制備得到的中藥復(fù)方提取物低劑量組(2.7g生藥量/kg)和中藥復(fù)方提取物高劑量組(8.1g/生藥量kg)，本發(fā)明實(shí)施例2制備得到的中藥復(fù)方提取物低劑量組(2.7g生藥量/kg)和中藥復(fù)方提取物高劑量組(8.1g生藥量/kg)。另設(shè)模型組，每組15只，并以15只正常SD雌性未孕大鼠作為空白對照組。模型組及空白對照組給予相應(yīng)的生理鹽水，其余各組按上述劑量灌胃給藥，每天I次，連續(xù)20天，并進(jìn)行下列指標(biāo)測定。:
[0119]乳房高度:實(shí)驗(yàn)開始后，每周用數(shù)顯卡尺測I次大鼠第三對乳房高度。
[0120]乳腺組織病理學(xué)檢查:大鼠處死后，取其乳腺組織，固定于10%福爾馬林內(nèi)，常規(guī)石蠟包埋，切片厚5 μ m，HE染色，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。
[0121]3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
[0122]3.1對大鼠乳房高度的影響
[0123]從開始給藥后，每周測I次乳房高度。結(jié)果表明:模型組大鼠乳房高度與空白對照組比較有明顯差異(P < 0.05，0.01)。消乳散結(jié)組、消癥丸原方組、本發(fā)明實(shí)施例1和2高低劑量組與模型組比較均有降低乳房高度的作用，與模型組比較差異明顯(P < 0.05,0.01),且隨給藥時(shí)間延長，效果更佳。并且通過對比實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的中藥復(fù)方提取物與原消癥丸原方組在同等生藥量的劑量下具有更好的抗乳腺增生功效，表明經(jīng)本發(fā)明優(yōu)選制備方法制備得到的中 藥復(fù)方提取物，同等劑量下，抗乳腺增生功效更優(yōu)。見表1 ;表2。
[0124]表1消癥丸及其活性部位對大鼠左側(cè)乳房高度的影響(X 士S)
【權(quán)利要求】
1.一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡10~20份、香附10~20份、大黃5~15份、青皮5~15份、川芎5~15份、莪術(shù)5~15份、浙貝母5~15份、當(dāng)歸10-20份、白芍10-20份、土鱉蟲5~15份、王不留行5~15份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡12~18份、香附12~18份、大黃8~12份、青皮8~12份、川彎8^12份、莪術(shù)8~12份、浙貝母8~12份、當(dāng)歸12~18份、白芍12~18份、土鱉蟲8~12份、王不留行8~12份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡15份、香附15份、大黃10份、青皮10份、川彎10份、莪術(shù)10份、浙貝母10份、當(dāng)歸15份、白芍15份、土鱉蟲10份、王不留行10份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡20份、香附20份、大黃5份、青皮5份、川芎5份、莪術(shù)15份、浙貝母15份、當(dāng)歸10份、白芍20份、土鱉蟲5份、王不留行15份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡10份、香附10份、大黃15份、青皮15份、川彎15份、莪術(shù)5份、浙貝母5份、當(dāng)歸20份、白芍10份、土鱉蟲15份、王不留行5份。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡10份、香附10份、酒炙大黃5份、炒青皮5份、川芎5份、莪術(shù)5份、浙貝母5份、當(dāng)歸10份、白芍10份、土鱉蟲5份、炒王不留行5份。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡12份、香附12份、大黃8份、青皮8份、川芎8份、莪術(shù)8份、浙貝母8份、當(dāng)歸12份、白芍12份、土鱉蟲8份、王不留行8份。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，它由下列重量份數(shù)的原料制得: 柴胡18份、香附18份、大黃12份、青皮12份、川芎12份、莪術(shù)12份、浙貝母12份、當(dāng)歸18份、白芍18份、土鱉蟲12份、王不留行12份。
9.根據(jù)權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物，其特征在于，所述的大黃為酒炙大黃，王不留行為炒王不留行，青皮為炒青皮。
10.權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: a、取柴胡、大黃、浙貝母、白芍、王不留行加水或CV3醇提取，提取液過濾，濾液濃縮至.0.25~4g生藥/mL藥液； b、取香附、川芎、莪術(shù)、當(dāng)歸、青皮采用水蒸氣蒸餾法提取，獲得的揮發(fā)油采用環(huán)糊精包合；提取液過濾，濃縮，加入乙醇使乙醇的濃度為60%~80%，放置沉淀，過濾，濾液減壓回收除去乙醇，濃縮至0.25~4g生藥/mL藥液； C、取步驟a制備得到的藥液和步驟b制備得到的藥液，混合后上大孔吸附樹脂柱，靜置吸附后，用去離子水洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，然后用濃度為5%~20%的CV3醇洗脫至洗脫液為淡色，棄去洗脫液，再用濃度為40%~90%的CV3醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去Cr3醇，濃縮至0.5^2.0g生藥/ml藥液； d、取土鱉蟲，加水或Cr3醇提取，提取液過濾，濾液濃縮至0.5~2.0g生藥/ml藥液； e、取步驟c制備得到的藥液和步驟d制備得到的土鱉蟲提取藥液混合均勻，濃縮干燥，粉碎，所得浸膏粉與步驟b制備得到的揮發(fā)油環(huán)糊精包合物混合均勻，即得。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物的制備方法，其特征在于，步驟a、C、d所述的Cr3醇為甲醇、乙醇或丙醇。
12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物的制備方法，其特征在于: (1)、步驟a取柴胡、大黃、浙貝母、白芍、王不留行加8~12倍量水或CV3醇提取I~3次，每次I~3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至0.25~4g生藥/mL藥液； (2)、步驟b取川芎、莪術(shù)、當(dāng)歸、青皮采用8~15倍量水水蒸氣蒸餾法提取3~12h，獲得的揮發(fā)油每毫升采用5~IOg β -環(huán)糊精包合；提取液過濾，濃縮至生藥量為0.65~ 0.85g/ml，加入乙醇使乙醇的濃度為60%~80%，靜置6~24小時(shí)，過濾，濾液濃縮減壓回收除去乙醇，濃縮至0.25~4g生藥/mL藥液； (3)、步驟c中大孔樹脂柱其徑高比為1:3~1:10，采用5~10倍柱體積，濃度為40%~90%的Cr3醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液減壓回收除去CV3醇，濃縮至0.5^2g生藥/Iml藥液； (4)、步驟d取土鱉蟲，加5~15倍量水或CV3醇提取I~3次，每次I~3小時(shí)，提取液過濾，濾液濃縮至0.5~2g生藥/ml ； (5)、步驟e所述濃縮干燥方法其特征為:真空干燥、噴霧干燥、微波干燥。
13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物的制備方法，其特征在于，步驟b所述的環(huán)糊精包合方法為:每毫升揮發(fā)油用5~IOg β-環(huán)糊精，溶于80~100mL水中，在60°C~70°C的條件下，攪拌I~3小時(shí)包合，包合物于70°C以下干燥。
14.根據(jù)權(quán)利要求10所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物的制備方法，其特征在于，所述的大孔吸附樹脂為D101、HPD100、X-5或AB-8大孔吸附樹脂。
15.一種具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方制劑，其特征在于:用權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的中藥復(fù)方提取物，加入藥學(xué)上可接受的載體制得。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方制劑，其特征在于，所述的具體劑型包括口服液、丸劑、顆粒劑、滴丸劑、片劑、膠囊劑或散劑。
17.權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)所述的具有抗乳腺增生作用的中藥復(fù)方提取物在制備抗乳腺增生藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P15/14GK103908631SQ201410122333
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年3月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年7月30日
【發(fā)明者】狄留慶, 許惠琴, 趙曉莉, 嚴(yán)燕青, 貢磊, 李全, 葉華 申請人:雷允上藥業(yè)有限公司