抗流行性感冒藥物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及感冒用藥物及其制備方法【技術(shù)領(lǐng)域】，是一種抗流行性感冒藥物及其制備方法；該抗流行性感冒藥物原料按重量份數(shù)組成為一枝蒿1份至3份、板藍(lán)根1份至3份、金蓮花1份至3份。本發(fā)明抗流行性感冒藥物對(duì)甲、乙型流感病毒的平均IC50分別為115.86μg/ml、132.28μg/ml，平均TI為8.8、7.7；本發(fā)明抗流行性感冒藥物0.2g/kg劑量組可明顯延長(zhǎng)甲型流感病毒感染小鼠存活天數(shù)，降低死亡率；0.1g/kg、0.2g/kg劑量組可明顯抑制肺指數(shù)值，平均抑制率分別為19.4%、28.0%；本發(fā)明抗流行性感冒藥物具有一定的體內(nèi)、體外抗流感病毒的作用，為其用于治療流行性感冒提供了藥理學(xué)依據(jù)。
【專利說(shuō)明】抗流行性感冒藥物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及感冒用藥物及其制備方法【技術(shù)領(lǐng)域】，是一種抗流行性感冒藥物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]流行性感冒(簡(jiǎn)稱流感)是由流感病毒(influenza virus, IFV)引起的急性呼吸道傳染病，能引起心肌炎、肺炎、支氣管炎等多種并發(fā)癥。通常表現(xiàn)為全身不適、發(fā)冷、發(fā)燒，并伴有頭痛、咽痛、咳嗽等上呼吸道感染癥狀。具有發(fā)病率高、起病迅速、傳播快、流行性廣、變異性大、傳染力強(qiáng)并伴有一定死亡率等特點(diǎn)。
[0003]流感是由流感病毒引起的一種危害人類健康的急性呼吸道傳染病，往往造成季節(jié)性全球或局部地區(qū)大流行。1918年的“西班牙流感”大流行導(dǎo)致全球超過(guò)兩千萬(wàn)人死亡。隨后大約每10年間都會(huì)出現(xiàn)一次流感的大流行，其主要原因在于流感病毒通過(guò)快速的遺傳變異，從而逃逸了人體免疫系統(tǒng)的識(shí)別、殺滅和清除。我國(guó)是流感頻發(fā)的國(guó)家之一，流感對(duì)人們的健康造成了巨大威脅。我國(guó)政府歷來(lái)重視流感的預(yù)防及控制，于1957年成立了國(guó)家流感中心，1981年恢復(fù)加入了 WHO的國(guó)際性流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)，目前全國(guó)31個(gè)省(直轄市、自治區(qū))均開展了流感的監(jiān)測(cè)工作。自2003年底亞洲發(fā)生禽流感爆發(fā)和禽流感感染人事件以來(lái)，我國(guó)政府先后出臺(tái)了一系列的政策、法規(guī)，采取強(qiáng)有力的措施，運(yùn)用科學(xué)的方法手段，有效控制了禽流感的擴(kuò)散和蔓延。
[0004]目前，西藥抗流感病毒具有療效確切、作用準(zhǔn)確等特點(diǎn)，但每類藥物只針對(duì)流感病毒的某個(gè)作用靶點(diǎn)起作用，使得西藥難以發(fā)揮理想的作用；而我國(guó)中藥資源豐富，研究和使用的歷史悠久，同時(shí)，中藥具有預(yù)防流感發(fā)生、作用靶點(diǎn)多、副作用少等特點(diǎn)。中醫(yī)藥防治病毒性疾病具有以下特色及優(yōu)勢(shì):①在治療病毒性感染性疾病時(shí)，將中醫(yī)整體觀和辨證論治思想貫徹其中。一方面可按溫病學(xué)的衛(wèi)氣營(yíng)血辨證理論可以分析其病理發(fā)展；另一方面可按中醫(yī)的辨證論治理論，認(rèn)識(shí)到許多既定的證候類型，其治療方法就可以參照傳統(tǒng)的方藥。在整體上能有效的減輕感染者病理?yè)p害，既強(qiáng)調(diào)祛邪又重視機(jī)體自身調(diào)節(jié)。因此，充分利用中醫(yī)藥資源，有助于我們解決流感病毒感染的難題。但中藥傳統(tǒng)湯劑大多采用傳統(tǒng)煎劑，其加水量、煎煮次數(shù)、煎煮時(shí)間等因素對(duì)臨床療效影響大，同時(shí)中藥湯劑還具有服用劑量大、攜帶不方便等缺點(diǎn)。因此，為了滿足中藥產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化要求，我們需要開發(fā)出適合產(chǎn)業(yè)化的中藥新劑型。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種抗流行性感冒藥物及其制備方法，克服了上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，其能有效解決西藥難以發(fā)揮理想的作用和中藥傳統(tǒng)湯劑對(duì)臨床療效影響大、服用劑量大和攜帶不方便的問(wèn)題。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案之一是通過(guò)以下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)的:一種抗流行性感冒藥物，原料按重量份數(shù)組成為一枝蒿1份至3份、板藍(lán)根1份至3份、金蓮花1份至3份。[0007]下面是對(duì)上述發(fā)明技術(shù)方案之一的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn):
上述抗流行性感冒藥物按下述方法得到，第一步，將所需量的板藍(lán)根粉碎成板藍(lán)根粗粉，在板藍(lán)根粗粉中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水浸泡24h至48h，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至110°C，每次回流提取時(shí)間為0.5h至1.5h，每次回流提取后過(guò)濾得到水提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水進(jìn)行下一次提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的水提取液合并在一起得到水提混合液，將水提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到板藍(lán)根提取物，板藍(lán)根提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；第二步，將所需量的一枝蒿和金蓮花混合在一起得到混合藥材，在混合藥材中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至100°C，每次回流提取時(shí)間為Ih至3h，每次回流提取后過(guò)濾得到醇提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液進(jìn)行下一次回流提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的醇提取液合并在一起得到醇提混合液，將醇提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到一枝蒿和金蓮花的混合提取物，一枝蒿和金蓮花的混合提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；
第三步，將板藍(lán)根提取物與一枝蒿和金蓮花的混合提取物混合均勻后，通過(guò)常規(guī)方法制成片劑或膠囊劑或顆粒劑或微丸得到抗流行性感冒藥物。
[0008]上述板藍(lán)根中(R，S)-告依春的質(zhì)量百分含量為0.055%至0.075%。
[0009]上述一枝蒿中一枝蒿酮酸的質(zhì)量百分含量為0.30%至0.45%ο
[0010]上述第一步和第二步中，減壓濃縮的壓力為0.08Mpa，減壓濃縮的的溫度為55°C至65°C ;或/和，第一步和第二步中，真空干燥的壓力為0.08Mpa，真空干燥的溫度為55°C至65°C ;或/和，板藍(lán)根粗粉為全部通過(guò)I號(hào)篩，但混有能通過(guò)三號(hào)篩不超過(guò)20%的粉末或/和，第二步中，乙醇水溶液為體積百分比濃度為60%至80%的乙醇水溶液。
[0011]本發(fā)明的技術(shù)方案之二是通過(guò)以下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)的:一種抗流行性感冒藥物的制備方法，按下 述步驟進(jìn)行，第一步，將所需量的板藍(lán)根粉碎成板藍(lán)根粗粉，在板藍(lán)根粗粉中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水浸泡24h至48h，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至110°C，每次回流提取時(shí)間為0.5h至1.5h，每次回流提取后過(guò)濾得到水提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水進(jìn)行下一次提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的水提取液合并在一起得到水提混合液，將水提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到板藍(lán)根提取物，板藍(lán)根提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；
第二步，將所需量的一枝蒿和金蓮花混合在一起得到混合藥材，在混合藥材中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至100°C，每次回流提取時(shí)間為Ih至3h，每次回流提取后過(guò)濾得到醇提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液進(jìn)行下一次回流提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的醇提取液合并在一起得到醇提混合液，將醇提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到一枝蒿和金蓮花的混合提取物，一枝蒿和金蓮花的混合提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；
第三步，將板藍(lán)根提取物與一枝蒿和金蓮花的混合提取物混合均勻后，通過(guò)常規(guī)方法制成片劑或膠囊劑或顆粒劑或微丸得到抗流行性感冒藥物。
[0012]下面是對(duì)上述發(fā)明技術(shù)方案之二的進(jìn)一步優(yōu)化或/和改進(jìn):
上述板藍(lán)根中(R，S)-告依春的質(zhì)量百分含量為0.055%至0.075%。
[0013]上述一枝蒿中一枝蒿酮酸的質(zhì)量百分含量為0.30%至0.45%o
[0014]上述第一步和第二步中，減壓濃縮的壓力為0.08Mpa，減壓濃縮的溫度為55°C至65 0C ;或/和，第一步和第二步中，真空干燥的壓力為0.08Mpa，真空干燥的溫度為55°C至65°C ;或/和，板藍(lán)根粗粉為全部通過(guò)I號(hào)篩，但混有能通過(guò)三號(hào)篩不超過(guò)20%的粉末或/和，第二步中，乙醇水溶液為體積百分比濃度為60%至80%的乙醇水溶液。
[0015]本發(fā)明抗流行性感冒藥物對(duì)甲、乙型流感病毒的平均IC50分別為115.86ii g/ml、132.28ii g/ml，平均TI為8.8、7.7 ;本發(fā)明抗流行性感冒藥物0.2g/kg劑量組可明顯延長(zhǎng)甲型流感病毒感染小鼠存活天數(shù)，降低死亡率；0.lg/kg、0.2g/kg劑量組可明顯抑制肺指數(shù)值，平均抑制率分別為19.4%,28.0% ;本發(fā)明抗流行性感冒藥物具有一定的體內(nèi)、體外抗流感病毒的作用，為其用于治療流行性感冒提供了藥理學(xué)依據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0016]本發(fā)明不受下述實(shí)施例的限制，可根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案與實(shí)際情況來(lái)確定具體的實(shí)施方式。
[0017]實(shí)施例1，該抗流行性感冒藥物，原料按重量份數(shù)組成為一枝蒿1份至3份、板藍(lán)根1份至3份、金蓮花1份 至3份。
[0018]實(shí)施例2，該抗流行性感冒藥物，原料按重量份數(shù)組成為一枝蒿1份或3份、板藍(lán)根1份或3份、金蓮花1份或3份。
[0019]實(shí)施例3，該抗流行性感冒藥物按下述制備方法得到，第一步，將所需量的板藍(lán)根粉碎成板藍(lán)根粗粉，在板藍(lán)根粗粉中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水浸泡24h至48h，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至110°C，每次回流提取時(shí)間為0.5h至
1.5h，每次回流提取后過(guò)濾得到水提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水進(jìn)行下一次提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的水提取液合并在一起得到水提混合液，將水提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到板藍(lán)根提取物，板藍(lán)根提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；
第二步，將所需量的一枝蒿和金蓮花混合在一起得到混合藥材，在混合藥材中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至100°C，每次回流提取時(shí)間為Ih至3h，每次回流提取后過(guò)濾得到醇提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液進(jìn)行下一次回流提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的醇提取液合并在一起得到醇提混合液，將醇提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到一枝蒿和金蓮花的混合提取物，一枝蒿和金蓮花的混合提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；第三步，將板藍(lán)根提取物與一枝蒿和金蓮花的混合提取物混合均勻后，通過(guò)常規(guī)方法制成片劑或膠囊劑或顆粒劑或微丸得到抗流行性感冒藥物。
[0020]實(shí)施例4，該抗流行性感冒藥物按下述制備方法得到，第一步，將所需量的板藍(lán)根粉碎成板藍(lán)根粗粉，在板藍(lán)根粗粉中加入6倍或10倍板藍(lán)根粗粉重量的水浸泡24h或48h，回流提取2次或4次，每次回流提取的溫度為80°C或110°C，每次回流提取時(shí)間為0.5h或1.5h，每次回流提取后過(guò)濾得到水提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入6倍或10倍板藍(lán)根粗粉重量的水進(jìn)行下一次提取，如此回流提取2次或4次后，將每次得到的水提取液合并在一起得到水提混合液，將水提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22或1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到板藍(lán)根提取物，板藍(lán)根提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；
第二步，將所需量的一枝蒿和金蓮花混合在一起得到混合藥材，在混合藥材中加入混合藥材8倍或12倍重量的乙醇水溶液，回流提取2次或4次，每次回流提取的溫度為80°C或100°C，每次回流提取時(shí)間為Ih或3h，每次回流提取后過(guò)濾得到醇提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入混合藥材8倍或12倍重量的乙醇水溶液進(jìn)行下一次回流提取，如此回流提取2次或4次后，將每次得到的醇提取液合并在一起得到醇提混合液，將醇提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22或1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到一枝蒿和金蓮花的混合提取物，一枝蒿和金蓮花的混合提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ；
第三步，將板藍(lán)根提取物與一枝蒿和金蓮花的混合提取物混合均勻后，通過(guò)常規(guī)方法制成片劑或膠囊劑或顆粒劑或微丸得到抗流行性感冒藥物。
[0021 ] 實(shí)施例5，作為上述實(shí)施例的優(yōu)化，實(shí)施例5的板藍(lán)根中(R，S)-告依春的質(zhì)量百分含量為 0.055% 至 0.075%。
[0022]實(shí)施例6，作為上述 實(shí)施例的優(yōu)化，實(shí)施例6的一枝蒿中一枝蒿酮酸的質(zhì)量百分含量為 0.30% 至 0.45%ο
[0023]實(shí)施例7，作為上述實(shí)施例的優(yōu)化，實(shí)施例7的第一步和第二步中，減壓濃縮的壓力為0.08Mpa，減壓濃縮的溫度為55°C至65°C;或/和，第一步和第二步中，真空干燥的壓力為0.08Mpa，真空干燥的溫度為55°C至65°C ;或/和，板藍(lán)根粗粉為全部通過(guò)I號(hào)篩，但混有能通過(guò)三號(hào)篩不超過(guò)20%的粉末或/和，第二步中，乙醇水溶液為體積百分比濃度為60%至80%的乙醇水溶液。
[0024]根據(jù)本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)如下:
1、本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物對(duì)MDCK細(xì)胞的毒性
將本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物和現(xiàn)有公知公用的抗流行性感冒藥物利巴韋林分別用維持液進(jìn)行稀釋，按每Ug中分別加入2 ml、4 ml、8ml、16ml、32 ml、64 ml和128 ml的維持液計(jì)，分別 配置成1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64和1:128共七個(gè)濃度，加到接種MDCK細(xì)胞并已長(zhǎng)成單層的96孔培養(yǎng)板中，100 μ I/孔，每稀釋度4個(gè)復(fù)孔，同時(shí)設(shè)細(xì)胞對(duì)照。將培養(yǎng)板置37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，確定細(xì)胞不出現(xiàn)明顯退變的最低稀釋倍數(shù)為最大無(wú)毒濃度(TC。),并按Reed-Muench法計(jì)算50%毒性濃度(TC50)o
[0025]結(jié)果，本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物對(duì)MDCK細(xì)胞的毒性作用表現(xiàn)為細(xì)胞增殖緩慢，顆粒較多，形態(tài)改變、部分細(xì)胞破碎脫落，對(duì)MDCK細(xì)胞的毒性作用隨著藥物濃度的降低而減輕，說(shuō)明本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物和利巴韋林對(duì)MDCK細(xì)胞同樣有效；對(duì)MDCK培養(yǎng)細(xì)胞的平均TC。和平均TC5tl見(jiàn)表1。
[0026]試驗(yàn)例2、本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物對(duì)病毒致細(xì)胞病變(CPE)的影響
取已接種MDCK細(xì)胞并長(zhǎng)成單層的培養(yǎng)板，吸棄培養(yǎng)液，分別接種100倍的半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量(IOOTCID5q)的不同病毒液50 yl，置37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中吸附I小時(shí)后，吸棄病毒液，用Eagle’s維持液洗細(xì)胞表面2次，設(shè)細(xì)胞對(duì)照組、病毒對(duì)照組、利巴韋林不同濃度(取1^及其以下的三個(gè)4倍稀釋度共四個(gè)濃度)、本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物不同濃度(取TCtl及其以下的三個(gè)2倍稀釋度共四個(gè)濃度)的給藥組，4孔/組；給藥組加入不同稀釋度的藥液，對(duì)照組加維持液，100 u I/孔。培養(yǎng)板置37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每日倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞病變情況，當(dāng)病毒對(duì)照組細(xì)胞病變達(dá)4級(jí)時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。細(xì)胞病變按六級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判斷，并按Reed-Muench法計(jì)算IC5(I，TI = TC5(I/IC5(I。
[0027]-:細(xì)胞生長(zhǎng)正常，無(wú)病變出現(xiàn)；
土:細(xì)胞病變少于整個(gè)單層細(xì)胞的10% ；
1:細(xì)胞病變約占整個(gè)單層細(xì)胞的25%以下；
2:細(xì)胞病變約占整個(gè)單層細(xì)胞的50%以下；
3:細(xì)胞病變約占整個(gè)單層細(xì)胞的75%以下；
4:細(xì)胞病變約占整個(gè)單層細(xì)胞的75%以上。
[0028]本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物對(duì)甲、乙型流感病毒有明顯的抑制作用，其平均IC5tl分別為115.86ug/mlU32.28 y g/ml，平均TI分別為8.8、7.7 ;本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物和利巴韋林對(duì)病毒致MDCK細(xì)胞病變的影響見(jiàn)表2所示；本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物和利巴韋林對(duì)體外抗病毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3所示。
[0029]試驗(yàn)例3、本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物對(duì)感染小鼠死亡率和生存時(shí)間的影響
將健康昆明小鼠按性別體重隨機(jī)分為6組，即模型對(duì)照組、利巴韋林組、抗病毒顆粒組、本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物三個(gè)劑量給藥組，每組12只，各給藥組連續(xù)灌胃給藥10天，一日一次，對(duì)照組給蒸餾水，于第三日給藥后2h，除正常對(duì)照組外其余各組小鼠分別以IOLD5tl的病毒液滴鼻感染，逐日觀察動(dòng)物發(fā)病情況并記錄死亡數(shù)，于感染后第14天計(jì)算死亡保護(hù)率和生命延長(zhǎng)率。
[0030]死亡保護(hù)率(％)=(模型組死亡率-實(shí)驗(yàn)組死亡率)/模型組死亡率X 100%
生命延長(zhǎng)率(％)=(實(shí)驗(yàn)組平均生存日-模型組平均生存日)/模型組平均生存日X 100% 結(jié)果，模型對(duì)照組的死亡率為83.3%，說(shuō)明流感小鼠模型建立成功；本發(fā)明上述實(shí)施例
得到的抗流行性感冒藥物0.lg/kg、0.2g/kg劑量組的平均死亡率分別是41.7和33.3，與模型對(duì)照組相比具有顯著差異(P〈0.01)，本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物對(duì)流感病毒感染小鼠的保護(hù)作用與陽(yáng)性對(duì)照藥抗病毒顆粒作用相當(dāng)，對(duì)感染小鼠死亡率的影響見(jiàn)表4。
[0031]模型對(duì)照組的平均存活時(shí)間與對(duì)照組相比明顯縮短，具有顯著性差異(P〈0.01),本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物0.2g/kg劑量組平均生存時(shí)間為12.00±2.66，與模型對(duì)照組相比明顯延長(zhǎng)具有明顯差異(P〈0.01)，其作用優(yōu)于抗病毒顆粒；本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物0.05g/kg、0.lg/kg劑量組平均存活時(shí)間與模型對(duì)照組相比也明顯延長(zhǎng)，分別為9.25±3.11和10.33±3.55，但與模型對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異；對(duì)感染小鼠生存時(shí)間的影響見(jiàn)表5。
[0032]試驗(yàn)例4、本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物對(duì)感染小鼠肺指數(shù)的影響 將健康昆明小鼠按性別體重隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、抗病毒顆粒
組、本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物三個(gè)劑量給藥組，每組12只，各給藥組連續(xù)灌胃給藥9天，一日一次，對(duì)照組給蒸餾水，于第三日給藥后2h，除正常對(duì)照組外，各組小鼠均在乙醚輕度麻 醉下分別以15LD5(i的病毒液50ul滴鼻感染，正常對(duì)照組同法滴鼻生理鹽水50ul。最后一次給藥后24h，各組小鼠稱重后摘眼球放血致死，將小鼠浸泡于75%酒精后在無(wú)菌操作臺(tái)上取出全肺，以生理鹽水洗滌兩次，用濾紙吸干表面水份，稱肺重，觀察動(dòng)物的肺臟變化，計(jì)算肺指數(shù)和肺抑制率。
[0033]肺指數(shù)=肺重/體重X 100
肺指數(shù)抑制率=(模型對(duì)照組平均肺指數(shù)-實(shí)驗(yàn)組平均肺指數(shù))/模型對(duì)照組平均肺指數(shù) XlOO
結(jié)果，模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比具有顯著差異(p〈0.01)，本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物0.2g/kg劑量組的肺指數(shù)和肺抑制率分別為1.34±0.44和28.0%，與模型對(duì)照組相比具有顯著差異(P〈0.01)，其作用與抗病毒顆粒相當(dāng)；本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物0.lg/kg劑量組的肺指數(shù)和肺抑制率分別為1.50±0.41和19.4%，與模型對(duì)照組相比具有明顯差異(P〈0.05)，而本發(fā)明上述實(shí)施例得到的抗流行性感冒藥物
0.05g/kg劑量組肺指數(shù)與模型對(duì)照組相比也明顯降低，但無(wú)顯著差異；對(duì)感染小鼠肺指數(shù)的影響見(jiàn)表6。
[0034]本發(fā)明抗流行性感冒藥物對(duì)甲、乙型流感病毒的平均IC50分別為115.86μ g/ml、132.28μ g/ml，平均TI分別為8.8、7.7 ;本發(fā)明抗流行性感冒藥物0.2g/kg劑量組可明顯延長(zhǎng)甲型流感病毒感染小鼠存活天數(shù)，降低死亡率；本發(fā)明抗流行性感冒藥物0.lg/kg、
0.2g/kg劑量組可明顯抑制肺指數(shù)值，抑制率分別為19.4%,28.0%。通過(guò)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果可知，本發(fā)明抗流行性感冒藥物具有一定的體內(nèi)、體外抗流感病毒的作用，其體內(nèi)抗流感病毒作用優(yōu)于抗病毒顆粒，為其用于治療流行性感冒提供了藥理學(xué)依據(jù)。
[0035]以上技術(shù)特征構(gòu)成了本發(fā)明的實(shí)施例，其具有較強(qiáng)的適應(yīng)性和實(shí)施效果，可根據(jù)實(shí)際需要增減非必要的技術(shù)特征，來(lái)滿足不同情況的需求。
【權(quán)利要求】
1.一種抗流行性感冒藥物，其特征在于原料按重量份數(shù)組成為一枝蒿1份至3份、板藍(lán)根1份至3份、金蓮花1份至3份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗流行性感冒藥物，其特征在于按下述方法得到，第一步，將所需量的板藍(lán)根粉碎成板藍(lán)根粗粉，在板藍(lán)根粗粉中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水浸泡24h至48h，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至110°C，每次回流提取時(shí)間為0.5h至1.5h，每次回流提取后過(guò)濾得到水提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加A 6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水進(jìn)行下一次提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的水提取液合并在一起得到水提混合液，將水提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1. 22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到板藍(lán)根提取物，板藍(lán)根提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ； 第二步，將所需量的一枝蒿和金蓮花混合在一起得到混合藥材，在混合藥材中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至100°C，每次回流提取時(shí)間為Ih至3h，每次回流提取后過(guò)濾得到醇提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液進(jìn)行下一次回流提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的醇提取液合并在一起得到醇提混合液，將醇提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到一枝蒿和金蓮花的混合提取物，一枝蒿和金蓮花的混合提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ； 第三步，將板藍(lán)根提取物與一枝蒿和金蓮花的混合提取物混合均勻后，通過(guò)常規(guī)方法制成片劑或膠囊劑或顆粒劑或微丸得到抗流行性感冒藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抗流行性感冒藥物，其特征在于板藍(lán)根中(R，S)-告依春的質(zhì)量百分含量為0.055%至0.075%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的抗流行性感冒藥物，其特征在于一枝蒿中一枝蒿酮酸的質(zhì)量百分含量為0.30%至0.45%。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3或4所述的抗流行性感冒藥物的制備方法，其特征在于第一步和第二步中，減壓濃縮的壓力為0.08Mpa，減壓濃縮的溫度為55°C至65°C ;或/和，第一步和第二步中，真空干燥的壓力為0.08Mpa，真空干燥的溫度為55°C至65°C ;或/和，板藍(lán)根粗粉為全部通過(guò)I號(hào)篩，但混有能通過(guò)三號(hào)篩不超過(guò)20%的粉末；或/和，第二步中，乙醇水溶液為體積百分比濃度為60%至80%的乙醇水溶液。
6.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗流行性感冒藥物的制備方法，其特征在于按下述步驟進(jìn)行，第一步，將所需量的板藍(lán)根粉碎成板藍(lán)根粗粉，在板藍(lán)根粗粉中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水浸泡24h至48h，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至110°C，每次回流提取時(shí)間為0.5h至1.5h，每次回流提取后過(guò)濾得到水提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入6倍至10倍板藍(lán)根粗粉重量的水進(jìn)行下一次提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的水提取液合并在一起得到水提混合液，將水提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到板藍(lán)根提取物，板藍(lán)根提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6%; 第二步，將所需量的一枝蒿和金蓮花混合在一起得到混合藥材，在混合藥材中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液，回流提取2次至4次，每次回流提取的溫度為80°C至100°c，每次回流提取時(shí)間為Ih至3h，每次回流提取后過(guò)濾得到醇提取液和藥渣，然后在過(guò)濾后的藥渣中加入混合藥材8倍至12倍重量的乙醇水溶液進(jìn)行下一次回流提取，如此回流提取2次至4次后，將每次得到的醇提取液合并在一起得到醇提混合液，將醇提混合液減壓濃縮得到在溫度為60°C下的密度為1.22至1.25的清膏，然后將清膏真空干燥后得到一枝蒿和金蓮花的混合提取物，一枝蒿和金蓮花的混合提取物的質(zhì)量百分含水量小于等于6% ； 第三步，將板藍(lán)根提取物與一枝蒿和金蓮花的混合提取物混合均勻后，通過(guò)常規(guī)方法制成片劑或膠囊劑或顆粒劑或微丸得到抗流行性感冒藥物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗流行性感冒藥物的制備方法，其特征在于板藍(lán)根中(R, S)-告依春的質(zhì)量百分含量為0.055%至0.075%。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的抗流行性感冒藥物的制備方法，其特征在于一枝蒿中一枝蒿酮酸的質(zhì)量百分含量為0.30%至0.45%。
9.根據(jù)權(quán)利要求6或7或8所述的抗流行性感冒藥物的制備方法，其特征在于第一步和第二步中，減壓濃縮的壓力為0.08Mpa，減壓濃縮的溫度為55°C至65°C ;或/和，第一步和第二步中，真空干燥的壓力為0.08Mpa，真空干燥的溫度為55°C至65°C ;或/和，板藍(lán)根粗粉為全部通過(guò)I號(hào)篩，但混有能通過(guò)三號(hào)篩不超過(guò)20%的粉末或/和，第二步中，乙醇水溶液為體積百分比濃度為60%至80%的`乙醇水溶液。
【文檔編號(hào)】A61K36/71GK103655755SQ201310580254
【公開日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年11月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月19日
【發(fā)明者】邢建國(guó), 何承輝, 古麗斯坦·阿吾提, 姜雯 申請(qǐng)人:新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所