赤靈酸s用于制造癌癥治療藥物的用途
【專利摘要】本文揭示一種小分子——赤靈酸S(ganodermic?acid?S,GMAS)的新用途。此GMAS是潛在可用來制造一種能治療患者身上的癌癥(包括具抗藥性或轉(zhuǎn)移性癌癥)的醫(yī)藥品或藥學組合物的先導化合物。
【專利說明】赤靈酸S用于制造癌癥治療藥物的用途

【技術(shù)領域】
[0001]本揭示內(nèi)容是有關(guān)于一分離自靈芝(Ganoderma Iucidum)的小分子化合物-赤靈酸S(ganodermiC acid S, GMAS)的新穎用途，特別是以其作為潛在可用來制造癌癥治療藥物的醫(yī)藥品或藥學組合物的先導化合物。

【背景技術(shù)】
[0002]長久以來，在東南亞地區(qū)，食用性真菌都被當作營養(yǎng)補充品或健康食品來使用，其中又以靈芝(Ganoderma Iucidum)為大宗，且因其具有醫(yī)療效果也被當作藥材使用超過千年之久。自靈芝中分離出來的活性成分大致包括靈芝三職類(triterpenoids)、多糖體(polysaccharides)、核苷酸(nucleic acids)、多肽類(polypeptides)、和植物固醇類(phytosterols)等等。在這些活性成分中，又以靈芝三萜類最重要，因其具有藥學活性，包括抑制膽固醇合成、抗癌、抗高血壓等等。靈芝三萜類包含各式靈芝酸(ganoderic acids, GAs)、赤靈酸(ganodermic acids, GMAs)、靈芝酉享(ganodericalcohol)、靈芝酮(ganoderic ketone)、靈芝醒(ganoderic aldehyde)等化合物。在靈芝酸的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，靈芝酸具有可殺死癌細胞的細胞毒性和抑制其擴增的效果。舉例來說，已知靈芝酸D(ganodermic acid D, GAD)可防止人類子宮頸癌細胞(即，Hela 細胞)增生(Yue et al.,Mol Cell Proteomics (2008) 7:949-961);靈芝酸 A 和H (ganodermic acids A and H;簡稱GAA及GAH)可抑制乳癌細胞生長或防止其侵犯其它組織(Jiang et al., Int J Mol Med (2008) 21:577-584);靈芝酸 X (ganodermic acidX，GAX)可抑制拓樸酶活性并能誘使肝癌細胞進入細胞凋亡程序(Li et al.,Life Sc1.(2005)77, 252-265);靈芝酸M除了可有效地抑制癌細胞生長外，還可抑制肺癌細胞的遷移(Wang et al., Int Immunopharmacol (2007) 7:864-870)。但是，目前除了已知 GMAS可誘發(fā)血小板聚集(Wang et al., B1chim.B1phys.Acta.(1989) 986，151-160)、抑制血小板功能(Wang et al., B1chem.J.(1991) 277 (Ptl)，189-197)和抑制由血栓素 A2 (Suet al., B1chem.Pharmacol.(1999) 58, 587-595 ; Su et al., B1chim.B1phys.Acta.(1999b) 1437，223-234)或前列腺素 El (Su et al., Thromb.Res.(1999c) 99，135-145)在血小板中所誘發(fā)的細胞反應外，僅有少數(shù)研究曾探討過赤靈酸S (ganodermic acid S，GMAS)本身的生理活性或用途。
[0003]本案發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，GMAS除了文獻中已報導過的抑制血小板聚集或抑制由血栓素A2或前列腺素El在血小板內(nèi)引發(fā)的訊遞反應外，還可抑制特定種類的癌細胞，包括具抗藥性和/或轉(zhuǎn)移性的癌細胞，使其不致增生，因此，可做為能治療或預防癌癥的藥物的先導化合物。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本揭示內(nèi)容至少部分是基于發(fā)現(xiàn)自靈芝分離出來的赤靈酸S(ganodermic acidS，GMAS)具有可延緩癌細胞生長或遷移的特性而來。上述發(fā)現(xiàn)暗示本揭示內(nèi)容中的GMAS可作為能治療或預防癌癥(包括對藥物具有抗性的癌癥或是具轉(zhuǎn)移性的癌癥)的藥物的先導化合物。
[0005]因此，本揭示內(nèi)容的第一目的是關(guān)于一種以GMAS來制造一種可抑制癌細胞的醫(yī)藥品或藥學組合物的新穎用途。
[0006]因此，本發(fā)明目的的一種實施方式是提供一種可治療或預防癌癥的醫(yī)藥品或藥學組合物。此醫(yī)藥品或藥學組合物包含治療有效量的GMAS或其藥學上可接受的鹽類，以及藥學上可接受的佐劑。適合以本發(fā)明的醫(yī)藥品或藥學組合物進行治療的癌癥可以是直腸癌、肝癌、乳癌、或肺癌。在一種較佳實施例中，上述的肺癌對吉非替尼(geftinib，以此為活性成分的抗癌藥物的商品名為艾瑞莎膜衣錠)。在另一實例中，該直腸癌是指具有轉(zhuǎn)移性的直腸癌。在又一實例中，該肺癌是指具有轉(zhuǎn)移性的肺癌。
[0007]若以所述醫(yī)藥品或藥學組合物總重量為基準，本發(fā)明化合物一GMAS，約占該藥學組合物總重量的0.1%至99%(重量％)。在某些實施方式中，本發(fā)明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的1%。在特定實施方式中，本發(fā)明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的5%。在其它實施方式中，本發(fā)明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的10%。在另外實施方式中，本發(fā)明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的25%。
[0008]在某些實施方式中，該醫(yī)藥品或藥學組合物更包括另一種已知可改善該癌癥治療效果的藥物。這類藥物的實例包括，但不限于，抗癌藥物、抗血管增生藥物、抗病毒藥物、抗生素、減輕疼痛藥物、抗貧血藥物、細胞激素、粒細胞集落刺激因子(granulocytecolony-stimulating factor, G-CSF)、抗嘔吐藥物以及其它類似物。
[0009]本揭示內(nèi)容的第二目的是關(guān)于在活體外，以GMAS來抑制癌細胞生長的方法。所述方法包含在活體外使該癌細胞接觸足夠量的GMAS或其藥學上可接受的鹽類。該足夠量的GMAS介于約I μ M至約50 μ M間；較佳是介于約5 μ M至約45 μ M間；更佳是介于約10 μ M至約40μΜ間。在一實例中，對直腸癌和肺癌細胞來說，該GMAS的量最佳是約8 μ Μ。在另一實例中，對肝癌和乳癌細胞來說，該GMAS的量最佳是約20 μ Μ。
[0010]本揭示內(nèi)容的第三目的是提供一種治療癌癥的方法。所揭示方法包括對需要治療的個體施用治療有效量的GMAS或其藥學上可接受的鹽類。適合以上述本發(fā)明的醫(yī)藥品或藥學組合物進行治療的癌癥可以是直腸癌、肝癌、乳癌、或肺癌。在一較佳實施例中，上述的肺癌對吉非替尼具有抗藥性。在另一實例中，該直腸癌是指具有轉(zhuǎn)移性的直腸癌。在又一實例中，該肺癌是指具有轉(zhuǎn)移性的肺癌。該個體可以是哺乳動物，較佳是人類。
[0011]透過以下的詳細說明與附隨的權(quán)利要求將可更了解本揭示內(nèi)容的這些及其它特征。需知以上的概述及以下的詳細說明僅為例示，用來闡述本揭示內(nèi)容，而非用以限制本揭示內(nèi)容的范疇。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]為讓本發(fā)明的上述與其它目的、特征、優(yōu)點與實施例能更明顯易懂，提供【專利附圖】

【附圖說明】如下:
[0013]圖1繪示出依據(jù)本發(fā)明一個實施方式，不同劑量的GMAS對(A)人類肺癌細胞株Α549，(B)人類直腸癌細胞株HCT-116，(C)人類肝癌細胞株Huh7，及(D)人類乳癌細胞株MDA-MB-231的細胞活性的影響；
[0014]圖2A繪示出依據(jù)本發(fā)明一個實施方式，不同劑量的吉非替尼對人類非小細胞肺癌細胞株P(guān)C-9或?qū)翘婺峋哂锌剐缘娜祟惙切〖毎伟┘毎關(guān)C9-1R的細胞活性的影響；
[0015]圖2B繪示出依據(jù)本發(fā)明一個實施方式，不同劑量的GMAS對PC-9或PC9-1R細胞株的細胞活性的影響；
[0016]圖3繪示出依據(jù)本發(fā)明一個實施方式，以傷口愈合試驗測量25或50 μ M GMAS對HCT-116細胞的傷口愈合效果，其中(A)為傷口愈合試驗期間于不同時間下所拍攝的照片，(B)為傷口愈合試驗的定量結(jié)果，以不同時間下細胞的相對爬行面積來表示各細胞的遷移力；和
[0017]圖4繪示出依據(jù)本發(fā)明一個實施方式，以傷口愈合試驗測量5或0μ M GMAS對PC-9細胞的傷口愈合效果，其中㈧為傷口愈合試驗期間于不同時間下所拍攝的照片，(B)為傷口愈合試驗的定量結(jié)果，以不同時間下細胞的相對爬行面積來表示各細胞的遷移力。

【具體實施方式】
[0018]為了使本揭示內(nèi)容的敘述更加詳盡與完備，下文針對本發(fā)明的實施方式與具體實施例提出了說明性的描述；但這并非實施或運用本發(fā)明具體實施例的唯一形式。實施方式中涵蓋了多個具體實施例的特征以及用以建構(gòu)與操作這些具體實施例的方法步驟與其順序。然而，亦可利用其它具體實施例來達成相同或均等的功能與步驟順序。
[0019]以下為本說明書中所用特定名詞的說明:
[0020]在本文中，“治療(treatment or treating) ” 一詞包括可導致所需的藥學和/或生理效果的防止性(即，預防性)、治愈性或緩和性處置。該效果較佳是指醫(yī)療上可部分或完全治愈或防止癌細胞的生長。此外，“治療”一詞在此是指基于可部分或完全減輕、延遲發(fā)生、抑制進程、減輕嚴重性、和/或減少一種特定疾病、異常和/或醫(yī)療狀況的一或多個病征出現(xiàn)機率的目的，而對受測個體(或患者)，尤指具有一種醫(yī)療狀況、一種該醫(yī)療狀況的癥狀、一種因該醫(yī)療狀況而引起的疾病或病癥、或是一種會使朝向該醫(yī)療狀況發(fā)展的先期狀況的個體，施用或施加本揭示內(nèi)容的化合物。可對尚未出現(xiàn)特定疾病、異常和/或醫(yī)療狀況的明顯病征的個體，和/或僅對該特定疾病、異常和/或醫(yī)療狀況產(chǎn)生早期病征的個體進行治療，以期降低產(chǎn)生該特定疾病、異常和/或醫(yī)療狀況相關(guān)的病理的風險。在本文中，所述病征、疾病、異常和/或醫(yī)療狀況可以是原位癌或轉(zhuǎn)移性癌。若能減少一或多個病征或臨床指標即代表該治療是“有效”的。
[0021]“預防(prophylaxis) ”在此是指對一種未來事件的防制手段?；诒疚闹蓄A防癌細胞或因手術(shù)或診斷程序進而潛藏地提高了癌細胞轉(zhuǎn)移的文意，因此可在實施該手術(shù)或診斷程序之前、同時或之后，實施本文所述的預防性處置手段。
[0022]“有效量(an eff ective amount) ” 一詞意將對于治療癌癥的目的,此用量在經(jīng)過適當?shù)慕o藥期間后，能夠達到減少癌細胞數(shù)目的欲求效果。
[0023]“化合物(compound) ”、“組合物(composit1n) ”、“藥劑(agent) ” 或“醫(yī)藥品(medicine or medicament) ”等詞在此可交替使用，且都是指當施用于個體(人類或動物)時，能夠透過局部和/或全身性作用而誘發(fā)所亟求的藥學和/或生理反應的一種化合物或組合物。
[0024]“施用(administerecUadministering或、administrat1n) ”一詞在此是指直接施用所述的化合物或組合物，或施用活性化合物的前驅(qū)藥(prodrug)、衍生物(derivative)、或類似物(analog)等，而可于施用個體體內(nèi)形成該活性化合物的相當用量者。
[0025]本文中交替使用“個體(subject) ”或“患者(patient) ”等詞,其是指可接受所述化合物和/或方法治療的動物(包括人類)。“個體”或“患者”在此涵蓋了雄性與雌性兩種性別，除非另有具體說明。因此“個體”或”患者」包含任何哺乳類動物，包括，但不限于，人類、非人類的靈長類，如哺乳動物、狗、貓、馬、羊、豬、牛等，其可因利用所述化合物進行治療而獲益。適合接受本發(fā)明化合物和/或方法治療的動物較佳為人類。一般來說，“患者”一詞及“個體” 一詞在本文中可彼此交替使用。
[0026]雖然用以界定本發(fā)明較廣范圍的數(shù)值范圍與參數(shù)界是約略的數(shù)值，此處已盡可能精確地呈現(xiàn)具體實施例中的相關(guān)數(shù)值。然而，任何數(shù)值本質(zhì)上不可避免地含有因個別測試方法所致的標準偏差。在此處，“約”通常是指實際數(shù)值在一特定數(shù)值或范圍的正負10%、5%、1%或0.5%之內(nèi)?；蛘呤?，“約”一詞代表實際數(shù)值落在平均值的可接受標準誤差之內(nèi)，視本發(fā)明所屬【技術(shù)領域】中具有通常知識者的考慮而定。除了實驗例之外，或除非另有明確的說明，當可理解此處所用的所有范圍、數(shù)量、數(shù)值與百分比(例如用以描述材料用量、時間長短、溫度、操作條件、數(shù)量比例及其它相似者)均經(jīng)過“約”的修飾。因此，除非另有相反的說明，本說明書與附隨申請專利范圍所揭示的數(shù)值參數(shù)皆為約略的數(shù)值，且可視需求而更動。至少應將這些數(shù)值參數(shù)理解為所指出的有效位數(shù)與套用一般進位法所得到的數(shù)值。
[0027]除非本說明書另有定義，此處所用的科學與技術(shù)詞匯的含義與本發(fā)明所屬【技術(shù)領域】中具有通常知識者所理解與慣用的意義相同。此外，在不和上下文沖突的情形下，本說明書所用的單數(shù)名詞涵蓋該名詞的復數(shù)型；而所用的復數(shù)名詞時亦涵蓋該名詞的單數(shù)型。
[0028]本揭示內(nèi)容至少有一部分是基于分離自靈芝的赤靈酸S(GMAS)具有可對抗癌細胞(包括具抗藥性的癌細胞)增生和/或轉(zhuǎn)移的特性而發(fā)展出來的。因此，GMAS是潛在可用來制造出可治療或預防癌癥藥劑的先導化合物。
[0029]本揭示內(nèi)容中該分離自靈芝的赤靈酸S(GMAS)具有以下的化學結(jié)構(gòu):.0H

【權(quán)利要求】
1.一種赤靈酸S的用途，其可用來制造一種癌癥治療藥物，其中該癌可以是肝癌、直腸癌、肺癌或乳癌。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其中該直腸癌具有轉(zhuǎn)移性。
3.如權(quán)利要求1所述的用途，其中該肺癌具有轉(zhuǎn)移性。
4.如權(quán)利要求1所述的用途，其中該肺癌對吉非替尼具有抗藥性。
5.一種于活體外用來抑制癌細胞生長或遷移的方法，包含使該癌細胞接觸足夠量的GMAS或其藥學上可接受的鹽類，其中該癌細胞可以是肝癌細胞、直腸癌細胞、肺癌細胞、乳癌細胞或血癌細胞。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中該癌細胞是直腸癌細胞且該足夠量的GMAS是約8 μ M
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中該直腸癌具有轉(zhuǎn)移性。
8.如權(quán)利要求5所述的方法，其中該肺癌具有轉(zhuǎn)移性。
9.如權(quán)利要求5所述的方法，其中該癌細胞是肝癌細胞且該足夠量的GMAS是約20 μ Μ。
10.如權(quán)利要求5所述的方法，其中該癌細胞是乳癌細胞且該足夠量的GMAS是約20 μ Μ。
11.如權(quán)利要求5所述的方法,其中該癌細胞是肺癌細胞且該足夠量的GMAS是約8 μ M
【文檔編號】A61P35/04GK104069116SQ201310110003
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2013年3月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年3月29日
【發(fā)明者】林淑萍, 黃政博, 陳登海 申請人:雙鶴生物科技股份有限公司