專利名稱：木豆素在制備治療或預防股骨頭壞死藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及木豆素的醫(yī)藥用途，具體地說，涉及木豆素作為唯一活性成分在制備治療或預防股骨頭壞死藥物制劑中的應用。屬于醫(yī)藥領域。
背景技術：
股骨頭壞死(osteonecrosis of femoral head,0NFH)又稱為股骨頭缺血性壞死，是由多種病因共同作用導致股骨頭血液供應破壞，引起軟骨下骨變性、壞死，繼而造成股骨頭塌陷和囊性病變，最終導致髖關節(jié)退行性病變的復雜的病理過程，為骨科常見疑難疾病。股骨頭壞死的發(fā)病機制目前尚不明確，主要有脂肪代謝紊亂及脂肪栓塞、骨內高壓及靜脈瘀阻、血管內凝血、微血管損傷等因素和觀點，其中血管內凝血是眾多因素中的ー個共同環(huán)節(jié)，其最終導致股骨頭微循環(huán)障礙，供血不足，骨活性成分死亡。
與股骨頭壞死不同的是，骨性關節(jié)炎是以軟骨退行性病變和繼發(fā)骨質增生為主的慢性退行性骨關節(jié)病，臨床主要表現(xiàn)為慢性關節(jié)疼痛、僵硬、腫大并伴有關節(jié)功能障礙。其發(fā)病機制主要與基質金屬蛋白酶降解、自由基損傷、細胞因子分泌紊亂、免疫等因素有夫。而骨質疏松癥是另ー種疾病，是ー種以骨量減少，骨骼微結構退化，骨強度降低，脆性増加，骨折發(fā)生率增高為特征的骨骼系統(tǒng)疾病，主要有原發(fā)性和繼發(fā)性兩類，其發(fā)病機制主要與內分泌失調如雌激素、維生素D合成減少和甲狀旁腺激素(PTH)分泌増加，營養(yǎng)缺乏或遺傳等因素有關。木豆葉為豆科植物木豆Cajianus cajian (L. )Millsp的莖葉,具有解毒消腫、利水消食、祛腐生肌等功效，常用于治療外傷、燒傷感染和褥瘡等，民間也用于治療骨折和骨質疏松等癥。木豆葉中含有ニ苯こ烯類化合物，木豆素(Cajaninstilbene acid,CSA)是其中化學成分之一。研究表明，木豆素具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化、降血糖、保肝及改善認知障礙等作用。木豆素的化學結構式
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HCT^O木豆素CN1356905A公開了木豆葉藥材及其提取物以及制劑和醫(yī)藥用途，提到了木豆葉及其提取物用于制備治療股骨頭缺血性壞死藥物、治療骨質疏松癥藥物、改善血液流變學指標藥物、抗炎鎮(zhèn)痛藥物、增強免疫功能藥物、治療冠心病心絞痛藥物、制備治療骨折藥物、制備治療腦梗塞藥物、治療褥瘡藥物、治療感染創(chuàng)面藥物和治療開放性骨折感染創(chuàng)面藥物的用途。CN1174052A公開了木豆葉在制備治療股骨頭缺血性壞死的藥物中的用途。CN1772033A公開了木豆葉及其提取物用于制備治療骨性關節(jié)炎藥物的用途。CN1666745A公開了從木豆葉中提取單體化合物的組合物，具有促進骨細胞形成及抑制骨細胞吸收作用，可有效治療更年期(或因病切除卵巣后)婦女、老年人和使用激素藥物引起的骨質疏松癥，此外還有消炎、抗?jié)B出作用，可用于外傷、燒傷等治療。藥學學報，2007，42 (4) =386-391公開了木豆葉提取物對人的類成骨細胞TE85成骨功能和體外破骨細胞分化的影響，報道木豆葉中芪類提取物能有效促進骨細胞形成及其抑制骨細胞吸收的作用，用于治療骨質疏松癥，并報道了木豆素類似物32-1 (I X 10_7g/mL)對破骨細胞形成的抑制率達到37. 9%，顯著強于木豆素(lX10_7g/mL)對破骨細胞形成的抑制作用(抑制率為22.8% )。

發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于提供木豆素的新的醫(yī)藥用途。本發(fā)明技術方案如下本發(fā)明提供一種木豆素的醫(yī)藥用途，其特征在于木豆素作為唯一活性成分在制備治療或預防股骨頭壞死的藥物中的應用。 根據(jù)上述所述的醫(yī)藥用途，其中所述的藥物是由木豆素和藥學上可接受的載體組成。上述所述的藥學上可接受的載體，可以說制藥エ業(yè)中常用的藥學輔料，本發(fā)明沒有特別限制，例如可以是各種藥用溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐剤、著色劑、粘合劑等等，本領域技術人員根據(jù)藥物組合物的劑型可以選擇合適的藥學賦性劑和合適的用量，配伍制成藥物制劑。優(yōu)選地，上述所述的醫(yī)藥用途，其中使用的木豆素通過下列方法制備取木豆葉，粉碎后，加水浸泡滲濾，滲濾液過濾，濾液上處理好的大孔吸附樹脂，先以去離子水洗脫，換以10%こ醇洗脫，再以80%こ醇洗脫，收集80%こ醇洗脫部位，回收至干，加入95%こ醇充分溶解，再加入I %藥用活性碳回流除雜，過濾，濾液減壓濃縮至干，殘渣加入適量こ酸こ酯溶解，制成飽和溶液，放置析晶，濾取晶體即得。上述所述的醫(yī)藥用途，其中所述的藥物中，按重量百分比計算，木豆素的量為I 99%。本發(fā)明上述所述的木豆素的醫(yī)藥用途，其中木豆素可以單獨使用或者與其它治療或預防股骨頭壞死的藥物配伍使用。其它的治療或預防股骨頭壞死的藥物包括但不限于洛伐他汀、氟伐他汀等降脂藥，血小板活化因子，阿司匹林，ニ膦酸鹽，凱時，阿魏酸，仙鹿活骨丸等。上述所述的醫(yī)藥用途，其中木豆素制成藥物組合物使用；優(yōu)選所述的藥物組合物為膠囊劑、顆粒劑、片劑、ロ服液或注射液等。本領域技術人員根據(jù)常規(guī)藥物制劑的制備方法，將木豆素和合適的藥物輔料配伍制成上述常規(guī)的藥物制劑。本發(fā)明令人驚喜地發(fā)現(xiàn)，木豆素可以有效地舒張股動脈，顯著改善股骨頭壞死大鼠的血液流變學，増加骨密度，其效果顯著優(yōu)于通絡生骨膠囊(木豆葉提取物)，并且效果也顯著優(yōu)于木豆葉中其它的ニ苯こ烯類化合物。


圖I木豆素(CSA)對大鼠股動脈平滑肌Ca2+內流的影響
不同濃度的木ii素(IU mol/L, 3 u mol/L 和 10 u mol/L)，以 DMSO和 Nifidipine 作為對照。
具體實施例方式下面通過實施例對本發(fā)明進行詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不僅限于此。制備例I木豆葉粗提物、木豆素及其它單體化合物的制備取豆科木豆屬植物木豆Cajanus cajan (L. )MiI Isp的干燥葉Ikg,經粉碎后,加水煎煮，得到水提總浸膏220g。另取干燥木豆葉1kg，經粉碎后，加95%こ醇滲漉提取，減壓濃縮，即得醇提總浸膏部位280g。取浸膏，加水混懸，然后依次用石油醚、こ酸こ酷、正丁醇萃取，得到醇提石油醚部位、醇提こ酸こ酯部位、醇提正丁醇部位和醇提水部位。取醇提石油醚部位和こ酸こ酯部位，經石油醚こ酸こ酯和環(huán)己烷丙酮梯度洗脫，得到化合物1-9，經鑒別分別為如下結構的化合物，其中化合物I為木豆素，2為4-0-Methylpinosylvic acid,3 為木S 素 A, 4 為 3-methoxy-5-hydroxystiIbene, 5 為 Flavestin B, 6 為木S 素 C, 7 為 3,5-dihydroxy-2- (3-methyl-2-butenyl)-bibenzyl,8 為 3-methoxy-5-hydroxy-2-(3-methyl-2-butenyl)-bibenzyl,9 為樹豆內酯 A。
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789從木豆葉中分離得到的單體化合物的結構式制備例2木豆素的制備取豆科木豆屬植物木豆Cajanus cajan(L. )Millsp的干燥葉2kg,經粉碎后，加18L水浸泡滲濾，滲濾液過濾，濾液上處理好的大孔吸附樹脂，先以去離子水洗脫，換以10%こ醇-水洗脫，再以80%こ醇-水洗脫。收集80%こ醇-水洗脫部位，回收至干，加入95%こ醇-水充分溶解，再加入I %藥用活性碳回流除雜，過濾，濾液減壓濃縮至干，殘渣加入適量こ酸こ酯溶解，制成飽和溶液，放置析晶。晶體過濾，以少量的こ酸こ酯洗漆，即得3g固體，經鑒別為木豆素，含量大于98%。實施例I木豆素對大鼠股動脈的舒張作用動物SD大鼠體重200_250g，購自廣東省實驗動物中心。藥品苯腎上腺素(Phenylephrine)、ニ甲基亞 砜(DMSO)和前列地爾(prostaglandin El)購于Sigma公司；木豆葉粗提物和單體化合物由實施例I所述方法制備；木豆素由制備例2所述的方法制備；通絡生骨膠囊購于浙江海正藥業(yè)有限公司。儀器多通道血管張カ測試系統(tǒng)，丹麥DMT公司；P0Werlab生物信號采集處理系統(tǒng)，澳大利亞ADInstruments公司；Bs210s型電子天平,德國Sartorius公司；數(shù)控恒溫水浴槽(420)，金壇市宏華儀器廠。方法大鼠脫臼處死，分離股動脈，置于0-4°C氧飽和的Krebs液中。去除外周結締組織，制成I. 8-2. Omm長的血管環(huán)。將血管環(huán)用兩根平行的直徑為40 u m鎢絲固定在多通道血管張カ測定系統(tǒng)中，設定初始張カ為5mN，溫度37°C，不間斷地往槽內通入95% O2和5%CO2的混合氣體，pH值調至7. 4，平衡90分鐘。平衡期間，用60mmol/L氯化鉀收縮血管，待穩(wěn)定后用Krebs液洗至基線，靜置30min，重復以上步驟直至連續(xù)兩次的收縮幅度相仿(相差小于連續(xù)兩次收縮引起平均張カ變化值的10%)，保持初始張カ(F1)不變。90分鐘后，加5 u mol/L苯腎上腺素收縮血管，待收縮平衡后(F2)，濃度累計地加入待測藥物，待收縮曲線平衡后(F3)，加入下一次藥物濃度，并記錄加藥后張カ變化。
_1]血管舒張軸如下公式計算
權利要求
1.木豆素的醫(yī)藥用途，其特征在于木豆素作為唯一活性成分在制備治療或預防股骨頭壞死的藥物中的應用。
2.根據(jù)權利要求I所述的醫(yī)藥用途，其中所述的藥物是由木豆素和藥學上可接受的載體組成。
3.根據(jù)權利要求1-2所述的醫(yī)藥用途，其中使用的木豆素通過下列方法制備取木豆葉，粉碎后，加水浸泡滲濾，滲濾液過濾，濾液上處理好的大孔吸附樹脂，先以去離子水洗脫，換以10 %乙醇洗脫，再以80 %乙醇洗脫，收集80 %乙醇洗脫部位，回收至干，加入95 %乙醇充分溶解，再加入I %藥用活性碳回流除雜，過濾，濾液減壓濃縮至干，殘渣加入適量乙酸乙酯溶解，制成飽和溶液，放置析晶，濾取晶體即得。
4.根據(jù)權利要求1-3所述的醫(yī)藥用途，其中木豆素可以單獨使用或者與其它治療或預防股骨頭壞死的藥物配伍使用。
5.根據(jù)權利要求1-4所述的醫(yī)藥用途，其中木豆素制成藥物組合物使用；優(yōu)選所述的藥物組合物為膠囊劑、顆粒劑、片劑、口服液或注射液等。
6.根據(jù)權利要求1-5所述的醫(yī)藥用途，其中所述的藥物中，按重量百分比計算，木豆素的量為I 99 %。
全文摘要
本發(fā)明公開了木豆素作為唯一活性成分在制備治療和預防股骨頭壞死藥物制劑中的應用。所述的藥物制劑中含有質量百分比為1～99％的木豆素，余量為藥用輔料，所述藥用輔料可以是各種藥用溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑；所述的藥物制劑包括多種臨床藥物劑型。本發(fā)明的木豆素可以有效舒張股動脈，顯著改善股骨頭壞死大鼠的血液流變學，增加骨密度，預示木豆素具有較好的藥用前景。
文檔編號A61K45/00GK102755309SQ201210202249
公開日2012年10月31日 申請日期2012年6月19日 優(yōu)先權日2012年6月19日
發(fā)明者葉文才, 巫鑫, 張冬梅, 李勇, 王英, 范春林 申請人:暨南大學