專利名稱：一種用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的配伍組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的配伍組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：
類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎為一主要累及關(guān)節(jié)的全身性系統(tǒng)性風(fēng)濕病。在人群各種族中均有較高的發(fā)病率和嚴(yán)重的致殘率，對人類有極大的危害性。
衛(wèi)矛科(Celastraceae)雷公藤屬(Tripterygium)植物在我國有四種，分別為雷公藤(Tripterygium wilfordiiHook.F.)、昆明山海棠(T.hypoglaucum(Levl.Hutch)、黑蔓(東北雷公藤，T.regelii Sprague et Takeda)和蒼山雷公藤(T.forretii Dicls)。另外，國外文獻(xiàn)中報(bào)道有變種雷公藤(T.wilfordii var.regrlii)。雷公藤最早收載于《(神農(nóng)本草經(jīng)》，味苦，辛涼，有大毒，氣味特異，其藥用部位主要為根及根莖，民間用于治療關(guān)節(jié)炎、跌打損傷、皮膚病、殺蟲等。目前，已經(jīng)有雷公藤片、雷公藤多苷片、雷公藤總萜片、雷公藤內(nèi)酯軟膏、昆明山海棠片、雷公藤雙層片等多種制劑，可用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。
雷公藤屬植物化學(xué)成分復(fù)雜，至今已發(fā)現(xiàn)的成分約有200多種，分為生物堿、二萜、三萜、倍半萜等，已經(jīng)從雷公藤屬植物中分離出三十多種生物堿、五十多種二萜類成分、五十多種三萜類成分、四十多種倍半萜類成分，二萜類為其主要活性成分，三萜類和生物堿也是活性成分。雷公藤屬植物化學(xué)成分包括二萜類如雷公藤內(nèi)酯酮(triptophenide)、雷公藤內(nèi)酯醇(triptolide)、雷公藤乙素(tripdiolide)、雷公藤丙素(triperolide)、雷醇內(nèi)酯(triptolidenol)、16-羥基雷公藤內(nèi)酯醇(16-hydroxytriptolide)、雷藤內(nèi)酯四醇(triptetraolide)、雷藤內(nèi)酯三醇(triptriolide)、雷藤氯內(nèi)酯(tripchlorolide)、12-表雷藤內(nèi)酯三醇(12-epitriptriolide)、異雷公藤內(nèi)酯四醇(isotriptetraolide)、13，14-epoxide 9，11，12-trihydroxytriptolide、新雷公藤內(nèi)酯四醇(neotriptetraolide)、雷公藤內(nèi)酯二醇酮(tripdioltonide)、雷酚內(nèi)酯(triptophenolide)、雷酚內(nèi)酯甲醚(triptophenolide methyl ether)、雷酚酮內(nèi)酯(triptonolide)、雷酚新內(nèi)酯(neotriptophenolide)、異雷酚新內(nèi)酯(isoneotriptophenolide)、雷酚萜(triptonoterpene)、雷酚萜甲醚(triptonoterpene methylether)、neatripeonoterpent、雷酚萜醇(triptonterpenol)、11-hydroxy-14-methoxyldehydroabietane、雷藤二萜酸(triptoditerpenic acid)、山海棠酸(hypogtic acid)、雷酚二萜酸(triptonoditerpenic acid)、wilforol E、F、tripfinin B、triptoquinone(A、B、C、D、E、F、G)、triptobenzene(A、B、C、D、E、F、G、J、K)、雷公藤苯L、M、N(triptobenzene L、M、N)、異雷酚內(nèi)酯(isotriptophenolide)、雷藤素(wilforonide)、山海棠二萜內(nèi)酯A(hypodiofide A)、16-hydroxy-19，20-epoxy-kaurane A等；生物堿如雷公藤定堿(Wilfordine)、雷公藤次堿(Wilforine)、雷公藤吉堿(wilforgine)、雷公藤春堿(wilfortrine)、雷公藤堿庚(wilforine)、雷公藤堿戊(wilforidine)、雷公藤堿己(wilformine)、雷公藤寧堿(wilfornine)、雷公藤精堿(wilforjine)、1-desacetylwilfordlne、1-desacetyl wilfortrlne、2-debenzoyl-2-nicotinoylwilforine、雷公藤堿辛(neowilforine)、triptonine A、triptonine B、雷公藤堿壬(neowilforzine)、peritass-ines A、異雷公藤春堿(isowilfortrine)、雷公藤明堿(wilford-sine)、雷公藤榕堿(wilfordlongine)、衛(wèi)矛堿(euonymine)、異雷公藤定堿(isowilfordine)、雷公藤定寧D、E、F、G、H(wilfordinineD、E、F、G、H)、苯乙烯南蛇堿(celacinnine)、呋喃南蛇堿(celafurine)、苯代南蛇堿(celabenzine)、南蛇藤別肉桂酰胺堿(celallocinnine)、黑蔓酯堿(regefidine)、雷公藤植堿(wilfordsuine)、雷公藤康堿(wilfordconine)等；三萜類如雷公藤紅素(tripterine)、扁朔藤素(printimerin)、3，24-二氧代木栓烷-29-羥酸(3，24-dioxofridelan-29-oic)、polpunonic acid、2-hydroxy-polpunonic acid、wilforol A、demethyl-zeylasteral、demethylzeylastemne、23-nor-6-oxo-demethyl-zeylastemne、3-hydroxy-2-oxo-3-fridelen-20α-carboxylic acid、tripterygone、2，3-dihydroxy-friedelΔ1，3，5，(10)，7-6-actone-29-oic acid、orthosphenic acid、薩拉子酸(salasponnic acid)、triptotin C、wilforol B(2，3-dihydroxy-friedel-6，9(11)-en-29-oicacid)、wilforolD、3β，29-dihydroxy-DB-friedolean-5-en、Congomnine、卡漆-5-烯-3β，28-二醇(glut-5-en-3β，28-diol)、雷公藤內(nèi)酯甲、乙(wilfortide A、B)、山海棠內(nèi)酯(hypoglaulide)、黑蔓內(nèi)酯(regelide)、雷藤三萜酸A、B、C(triptotriterpenic acid A、B、C)、3-epikatonic acid、雷二羥酸甲酯(triptodihydroxy acid methyl ether)、黑蔓酮酯甲、乙、丙、丁(regelin I、II、III、D)、黑蔓醇酯甲、乙(regelindiol A、B)、demethylregelinn、oleana-9(11)，12-dien-3-one、齊墩果酸乙酸酯(3-acetoxyoleanolic acid)、山海棠萜酸(hypoglauterpenicacid)、tripterygic acid A、齊墩果酸乙酸酯(3-alhoxyoleanolic alid)、山海棠萜酸(hypogxauserponicalid)、tripterygic alid A、齊墩果酸(oleanohc acid)、3-oxo-22α-hydroxy-Δ12-OleaHen-29-oic acid、3β，2α-二羥基-Δ12-齊墩果烯-29-羥酸(3β，2α-dihydroxy-Δ12-oleanen-29-oic acid)、3-acetyl-oleanolic acid、wifoml C、3α，24-di-hydroxy-olean-12-en-28-oic acid、2α，，3α，24-trihydroxy-Δ12-ursene-28-oic acid、3β，15β-dihydroxy-Δ12-oleanen-28-oic acid、3β-hydroxy-olean-11，13(18)-diene、烏索-3β，5α-二醇(ursan-3β，5α-diol)、triptotriterpenoidal lactone A、zeorin、triptolactone、薩拉子酸-3-乙基醚(salaspormicacid-3-ethyfic aether)等。
雷公藤對各種動(dòng)物毒性不同，它對人、犬、豬及昆蟲的毒性很大，可以發(fā)生中毒甚至死亡，但是對羊、兔、貓、鼠、魚卻無毒性。雷公藤對機(jī)體的作用有二一為對胃腸道局部的刺激作用；二為吸收后對中樞神經(jīng)系統(tǒng)(包括視丘、中腦、延髓、小腦及脊髓)的損害，及引起肝、心的出血與壞死。雷公藤主要毒害動(dòng)物的心臟，對其他平滑肌及橫紋肌亦有毒性，引起中毒致死。中毒后采用催吐、洗胃、灌腸、導(dǎo)瀉等一般急救措施解毒。雷公藤屬植物制劑在治療中也容易出現(xiàn)毒副作用，如引起患者血液白細(xì)胞或紅細(xì)胞下降，引起惡心、胃痛、腹瀉，引起肝功能損害，能明顯加重老年人腎功能不全，引起生殖系統(tǒng)不良反應(yīng)(女性月經(jīng)不調(diào)，男性精子活力減弱、數(shù)量減少)，還可能出現(xiàn)紅斑、引起脫發(fā)，聽力減退，手足小關(guān)節(jié)痛等。
芍藥屬植物約35種，分布于歐、亞大陸溫帶地區(qū)，根據(jù)其生長習(xí)性和花盤形狀分為兩組，一是牡丹組，二是芍藥組。芍藥組植物約30種，主要分布在歐、亞大陸溫帶地區(qū)，有二種產(chǎn)于美洲。國外產(chǎn)的芍藥組植物，都是花卉的重要種；我國產(chǎn)的芍藥組植物有八種和六個(gè)變種，八種芍藥分別是草芍藥、美麗芍藥、芍藥、多花芍藥、白花芍藥、川赤藥、新疆芍藥和窄葉芍藥。芍藥組植物大都含芍藥苷，根中含量1.8～7.3％，葉中含量1％左右，另含芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥新苷等苷類成分以及揮發(fā)油、脂肪油、樹脂、鞣質(zhì)、糖、淀粉、粘液質(zhì)、蛋白質(zhì)等。
《天津中醫(yī)藥》2005年6月第22卷第3期發(fā)表一篇白芍總苷聯(lián)合雷公藤多苷治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的論文，該論文的結(jié)論指出白芍總苷和雷公藤多苷聯(lián)合使用不但提高了治療RA的療效，并且降低了單一使用雷公藤對肝臟的損害，但其療效還不盡人意，而且對肝臟還存在一定程度的損害。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的雷公藤和芍藥配伍組合物及其制備方法。
上述的目的通過以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn) 一種雷公藤與芍藥的配伍組合物，由雷公藤和芍藥配伍成藥方，所述的雷公藤與芍藥的配伍其重量份比為雷公藤∶芍藥＝0.01～100∶1的比例。
所述的雷公藤是指衛(wèi)矛科雷公藤屬植物、雷公藤屬植物提取物、雷公藤屬植物加工成的藥材和炮制品以及雷公藤屬植物中含有的單一活性成分。衛(wèi)矛科雷公藤屬植物包括雷公藤、昆明山海棠、黑蔓(東北雷公藤)和蒼山雷公藤、變種雷公藤。雷公藤活性成分包括包括雷公藤內(nèi)酯酮、雷公藤內(nèi)酯醇、雷公藤乙素、雷公藤丙素、雷醇內(nèi)酯、16-羥基雷公藤內(nèi)酯醇、雷藤內(nèi)酯四醇、雷藤內(nèi)酯三醇、雷藤氯內(nèi)酯、12-表雷藤內(nèi)酯三醇、異雷公藤內(nèi)酯四醇、13，14-epoxide 9，11，12-trihydroxytriptolide、新雷公藤內(nèi)酯四醇、雷公藤內(nèi)酯二醇酮、雷酚內(nèi)酯、雷酚內(nèi)酯甲醚、雷酚酮內(nèi)酯、雷酚新內(nèi)酯、異雷酚新內(nèi)酯、雷酚萜、雷酚萜甲醚、neatripeonoterpent、雷酚萜醇、11-hydroxy-14-methoxyldehydroabietane、雷藤二萜酸、山海棠酸、雷酚二萜酸、wilforol E、F、tripfinin B、triptoquinone(A、B、C、D、E、F、G)、triptobenzene(A、B、C、D、E、F、G、J、K)、雷公藤苯L、M、N、異雷酚內(nèi)酯、雷藤素、山海棠二萜內(nèi)酯A、16-hydroxy-19，20-epoxy-kaurane A、雷公藤定堿、雷公藤次堿、雷公藤吉堿、雷公藤春堿、雷公藤堿庚、雷公藤堿戊、雷公藤堿己、雷公藤寧堿、雷公藤精堿、1-desacetyl wilfordlne、1-desacetyl wilfortrlne、2-debenzoyl-2-nicotinoylwilforine、雷公藤堿辛、triptonine A、triptonine B、雷公藤堿壬、peritass-inesA、異雷公藤春堿、雷公藤明堿、雷公藤榕堿、衛(wèi)矛堿、異雷公藤定堿、雷公藤定寧D、E、F、G、H、苯乙烯南蛇堿、呋喃南蛇堿、苯代南蛇堿、南蛇藤別肉桂酰胺堿、黑蔓酯堿、雷公藤植堿、雷公藤康堿、雷公藤紅素、扁朔藤素、3，24-二氧代木栓烷-29-羥酸、polpunonic acid、2-hydroxy-polpunonic acid、wilforol A、demethyl-zeylasteral、demethylzeylastemne、23-nor-6-oxo-demethyl-zeylastemne、3-hydroxy-2-oxo-3-fridelen-20α-carboxylic acid、tripterygone、2，3-dihydroxy-friedel Δ1，3，5，(10)，7-6-actone-29-oic acid、orthosphenic acid、薩拉子酸、triptotin C、wilforol B、wilforol D、3β，29-dihydroxy-DB-friedolean-5-en、Congomnine、卡漆-5-烯-3β，28-二醇、雷公藤內(nèi)酯甲、乙(wilfortide A、B)、山海棠內(nèi)酯(hypoglaulide)、黑蔓內(nèi)酯(regelide)、雷藤三萜酸A、B、C(triptotriterpenic acid A、B、C)、3-epikatonic acid、雷二羥酸甲酯(triptodihydroxy acidmethyl ether)、黑蔓酮酯甲、乙、丙、丁、黑蔓醇酯甲、乙(regelindiol A、B)、demethylregelinn、oleana-9(11)，12-dien-3-one、齊墩果酸乙酸酯、山海棠萜酸、tripterygicacid A、齊墩果酸乙酸酯、山海棠萜酸、tripterygic alidA、齊墩果酸、3-oxo-22α-hydroxy-Δ12-OleaHen-29-oicacid、3β，2α-二羥基-Δ12-齊墩果烯-29-羥酸(3β，2α-dihydroxy-Δ12-oleanen-29-oic acid)、3-acetyl-oleanolic acid、wifoml C、3α，24-di-hydroxy-olean-12-en-28-oic acid、2α，，3α，24-trihydroxy-Δ12-ursene-28-oic acid、3β，15β-dihydroxy-Δ12-oleanen-28-oic acid、3β-hydroxy-olean-11，13(18)-diene、烏索-3β，5α-二醇、triptotriterpenoidal lactone A、zeorin、triptolactone、薩拉子酸-3-乙基醚。
所述的芍藥指毛茛科芍藥屬芍藥組植物、芍藥屬芍藥組植物提取物、芍藥屬芍藥組植物加工而成的藥材和炮制品以及芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥新苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷。芍藥組植物包括草芍藥、美麗芍藥、芍藥、多花芍藥、白花芍藥、川赤藥、新疆芍藥和窄葉芍藥及其變種。
上述雷公藤與芍藥的配伍組合物，是雷公藤屬植物、雷公藤屬植物提取物、雷公藤屬植物加工成的藥材和炮制品以及雷公藤屬植物中含有的單一活性成分任意一種，與芍藥屬芍藥組植物、芍藥屬芍藥組植物提取物、芍藥屬芍藥組植物加工而成的藥材和炮制品以及芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥新苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷任意一種配伍組成組合物。
依照上述雷公藤與芍藥的配伍組合物，可將本發(fā)明配伍組合物制成片劑或膠囊劑或栓劑或顆粒劑或口服液或糖漿或合劑或口服混懸液或丸劑或酊劑或膜劑或散劑或乳膏劑或注射劑或與其他藥物復(fù)方制劑。
這個(gè)技術(shù)方案有以下有益效果 1.本發(fā)明雷公藤與芍藥的配伍組合物，治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎效果不僅好于雷公藤制劑單用效果，而且好于白芍總苷聯(lián)合雷公藤多苷治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的效果，同時(shí)可以大大減輕或避免雷公藤制劑單用引起的毒副作用。
2.本發(fā)明可以制成藥劑學(xué)上的各種制劑，如片劑、膠囊劑、栓劑、顆粒劑、口服液、糖漿、合劑、口服混懸液、丸劑、酊劑、膜劑、散劑、乳膏劑、注射劑等，并且可以和其他藥物復(fù)方制劑。



圖1，本發(fā)明組合物對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎足爪腫脹度的影響(容積測量)圖 圖2，本發(fā)明組合物對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)指數(shù)的影響圖 圖3，本發(fā)明組合物對LPS誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞IL-1βmRNA表達(dá)的抑制作用圖 圖4，本發(fā)明組合物對LPS誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞TNF-αmRNA表達(dá)的抑制作用圖 1、對照組，2、模型組，3、組合物組，4、強(qiáng)的松組
具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 取雷公藤干品10g，赤芍藥10g，粉碎成粗粉，加入95％乙醇滲漉，滲漉液回收乙醇，得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例2 取雷公藤干品10g，炒白芍藥100g，粉碎成粗粉，加入70％乙醇加熱提取，重復(fù)提取提取三次，提取液回收乙醇，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例3 取雷公藤干品2g，赤芍藥100g，粉碎成粗粉，加入甲醇加熱提取，重復(fù)提取提取三次，提取液回收甲醇，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例4 取昆明山海棠干品100g，草芍藥干品10g，粉碎成粗粉，加入丙醇加熱提取，重復(fù)提取三次，提取液回收丙醇，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例5 取黑蔓(東北雷公藤)干品100g，多花芍藥干品2g，粉碎成粗粉，加入異丙醇加熱提取，重復(fù)2次，提取液回收異丙醇，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例6 取雷公藤干品50g，川赤芍90g，粉碎成粗粉，加入純化水提取，合并提取液，濃縮，減壓干燥，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例7 取蒼山雷公藤干品100g，白花芍藥干品30g，粉碎成粗粉，加入純化水加熱提取，提取液濃縮成每m l約相當(dāng)于生藥1g，加入醋酸乙酯萃取，合并醋酸乙酯萃取液，回收醋酸乙酯，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例8 取變種雷公藤干品20g，美麗芍藥干品150g，粉碎成粗粉，加入純化水加熱提取，提取液濃縮成每ml約相當(dāng)于生藥1g，加入正丁醇醋酸乙酯(1∶1)混合萃取劑，合并正丁醇醋酸乙酯混合萃取液，加熱回收正丁醇醋酸乙酯混合溶劑，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例9 取雷公藤干品20g，赤芍藥10g，粉碎成粗粉，加入95％乙醇滲漉，滲漉液回收乙醇，得雷公藤芍藥乙醇提取浸膏；乙醇提取浸膏中加入醋酸乙酯提取，提取液回收醋酸乙酯，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例10 取雷公藤干品50g，炒白芍藥100g，粉碎成粗粉，加入70％乙醇加熱提取，重復(fù)提取提取三次，提取液回收乙醇，得到雷公藤芍藥乙醇提取浸膏；乙醇提取浸膏中加入醋酸乙酯提取，提取液回收醋酸乙酯，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例11 取雷公藤干品1g，赤芍藥90g，粉碎成粗粉，加入甲醇加熱提取，重復(fù)提取提取三次，提取液回收甲醇，得到雷公藤芍藥甲醇提取浸膏；甲醇提取浸膏中加入醋酸乙酯提取，提取液回收醋酸乙酯，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例12 取昆明山海棠干品110g，草芍藥干品15g，粉碎成粗粉，加入丙醇加熱提取，重復(fù)提取三次，提取液回收丙醇，得到雷公藤芍藥丙醇提取浸膏；丙醇提取浸膏加入醋酸乙酯提取，提取液回收醋酸乙酯，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例13 取黑蔓(東北雷公藤)干品100g，多花芍藥干品2g，粉碎成粗粉，加入異丙醇加熱提取，重復(fù)2次，提取液回收異丙醇，得到雷公藤芍藥異丙醇提取浸膏；異丙醇提取浸膏加入醋酸乙酯提取，提取液回收醋酸乙酯，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例14 取蒼山雷公藤干品100g，白花芍藥干品30g，粉碎成粗粉，加入純化水加熱提取，提取液濃縮成每ml約相當(dāng)于生藥1g，加入醋酸乙酯萃取，合并醋酸乙酯萃取液，回收醋酸乙酯，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例15 取變種雷公藤干品20g，美麗芍藥干品150g，粉碎成粗粉，加入純化水加熱提取，提取液濃縮成每ml約相當(dāng)于生藥1g，加入正丁醇醋酸乙酯(1∶1)混合萃取劑，合并正丁醇醋酸乙酯混合萃取液，加熱回收正丁醇醋酸乙酯混合溶劑，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例16 取雷公藤干品50g，草赤芍200g，加入純化水加熱提取，合并提取液，放涼后上HPD-500大孔樹脂柱，先用水洗去雜質(zhì)，再用乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收乙醇，干燥，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
實(shí)施例17 取雷公藤干品1000g，加入甲醇回流提取，合并甲醇提取液，回收甲醇得甲醇提取浸膏；甲醇醇提取浸膏加入醋酸乙酯提取，合并醋酸乙酯提取液，回收醋酸乙酯得雷公藤提取物。
取赤芍藥飲片9000g，加入70％乙醇回流提取，回收乙醇得乙醇提取浸膏；乙醇提取浸膏加入醋酸乙酯提取，回收醋酸乙酯得到赤芍藥提取物。
將上述制備而得的雷公藤提取物與赤芍藥提取物充分混合均勻，即得雷公藤芍藥配伍組合物。
本發(fā)明雷公藤芍藥配伍組合物對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的藥效試驗(yàn)。
以下試驗(yàn)中所用的雷公藤和芍藥配伍組合物為實(shí)施例17中制備而得的雷公藤芍藥配伍組合物。
1、目的雷公藤和芍藥配伍組合物對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的藥效。
2、動(dòng)物SD大鼠體重180+20g，雄性 3.方法 3.1實(shí)驗(yàn)分組SD大鼠，隨機(jī)分為4組，即正常組、模型組、雷公藤和芍藥配伍組合物組和陽性對照藥強(qiáng)的組。每組12只。
3.2AA模型誘導(dǎo)大鼠足爪皮內(nèi)注射福氏佐劑(CFA)0.1ml，同時(shí)設(shè)生理鹽水對照組。炎癥出現(xiàn)后用藥，用藥10天。CFA的配制方法將10mg卡介苗加入1ml石蠟油中，充分混勻后置4℃冰箱中過夜，注射前再進(jìn)行充分混勻。
3.3給藥時(shí)間及用藥方法誘導(dǎo)后，每天觀察足爪腫脹，足爪評分，足爪出現(xiàn)紅腫，開始用藥。灌胃給藥，每天一次，用藥12天。d28，處死大鼠，觀察藥效指標(biāo)。
3.4檢測指標(biāo) (1)足爪腫脹度的測定用足爪容積測量儀于致炎前，致炎后d12、d16、d20、d24、d28定期檢測大鼠足爪腫脹度。
(2)全身病變體重變化，前肢、耳和尾部病變的發(fā)生率和嚴(yán)重度。
(3)關(guān)節(jié)指數(shù)按0-4五級評分，0＝無紅腫；1＝小趾關(guān)節(jié)稍腫；2＝趾關(guān)節(jié)和足跖腫脹；3＝踝關(guān)節(jié)以下的足爪腫脹；4＝包括踝關(guān)節(jié)在內(nèi)的全部足爪腫脹。
(4)疼痛指數(shù)用壓痛儀測定每只大鼠的機(jī)械痛閾。先使用一定力度刺激，若沒有縮腿反應(yīng)，則選擇其上一個(gè)力度刺激后趾，若有縮腿反應(yīng)，則選擇其下一個(gè)力度刺激后趾，即出現(xiàn)一次與前一次不同反應(yīng)(有縮腿反應(yīng)至無縮腿反應(yīng)或無縮腿反應(yīng)至有縮反應(yīng))時(shí)，即可記錄該力度作為機(jī)械痛閾(超過25g的記為“無”壓痛)。
(5)胸腺指數(shù)、脾指數(shù)；稱大鼠體重，脫頸處死大鼠，剝離胸腺和脾臟，分別稱重，以胸腺或脾臟的重量比上大鼠的體重，而得到胸腺指數(shù)或脾臟指數(shù)，結(jié)果以胸腺指數(shù)或脾臟指數(shù)表示。
(6)LPS和ConA誘導(dǎo)的T和B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，無菌取脾臟用RPMI1640制備淋巴細(xì)胞懸液，在96孔培養(yǎng)板上，每孔加入100μl細(xì)胞懸液(終濃度為5×106·ml-1)及LPS(終濃度4mg·L-1)或ConA(終濃度3mg·L-1)，終容積為200μl，各設(shè)3個(gè)復(fù)孔，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，誘導(dǎo)T、B淋巴細(xì)胞增殖。終止培養(yǎng)前2h，每孔加入20l MTT，培養(yǎng)結(jié)束后收集細(xì)胞，離心500g×10min，吸棄上清，每孔加入120ml冰醋酸，震蕩30秒，選擇波長為570nm的酶標(biāo)儀檢測其吸光度(A)，結(jié)果以3個(gè)復(fù)孔A的均值表示。
(7)IL-1的誘生與檢測 制備大鼠腹腔巨噬細(xì)胞懸液(2×106·ml-1)，加入24孔培養(yǎng)板，每孔1ml，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)2h，棄取上清液，用D-Hank｀s液洗3遍，除去非粘附細(xì)胞，獲單層細(xì)胞，然后各加入500l RPMI1640和LPS(終濃度4mg·L-1)，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-1，收取上清(含IL-1活性)，-20℃保存待測。
無菌取C57BL/6J小鼠胸腺，用RPMI1640制備胸腺細(xì)胞懸液(5×106·ml-1)，在96孔培養(yǎng)板上，每孔加入100μl細(xì)胞懸液、50μl ConA(終濃度3mg·L-1)和50μl不同稀釋度的待測上清，各設(shè)3個(gè)復(fù)孔，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，終止培養(yǎng)前2h，每孔加入20μl MTT，培養(yǎng)結(jié)束后收集細(xì)胞，離心500g×10min，吸棄上清，每孔加入120ml冰醋酸，震蕩30秒，選擇波長為570nm的酶標(biāo)儀檢測其吸光度(A)，結(jié)果以3個(gè)復(fù)孔A的均值表示。
(8)IL-2的誘生與測定 無菌取胸腺用RPMI1640制備T淋巴細(xì)胞懸液，在24孔培養(yǎng)板上，每孔加入500μl細(xì)胞懸液(終濃度為5×106·ml-1)及500μl ConA(終濃度3mg·L-1)，終容積為1ml，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，誘導(dǎo)大鼠T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2，培養(yǎng)結(jié)束后，離心(2000rpm，10min)，收取上清(含IL-2活性)，-20℃保存待測。
無菌取C57BL/6J小鼠脾臟，用RPMI1640制備脾細(xì)胞懸液(2×106·ml-1)，取10ml放入培養(yǎng)瓶中，加入ConA(終濃度3mg·L-1)，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，離心(1500rpm，10min)，取細(xì)胞分別加入盛有4ml的分層液中，離心(1500rpm，10min)，再吸取單層細(xì)胞用PBS液洗滌2次，再用RPMI 1640洗滌1次，配成1×107·ml-1的細(xì)胞懸液，按每孔100μl、50μl ConA(終濃度3mg·L-1)和50μl不同稀釋度的待測上清，加入96孔培養(yǎng)板中。各設(shè)3個(gè)復(fù)孔，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h，終止培養(yǎng)前2h，每孔加入20μl MTT，培養(yǎng)結(jié)束后收集細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后，離心500g×10min，吸棄上清，每孔加入120ml冰醋酸，震蕩30秒，選擇波長為570nm的酶標(biāo)儀檢測其吸光度(A)，結(jié)果以3個(gè)復(fù)孔A的均值表示。
(9)關(guān)節(jié)病理檢查。
處死大鼠，取后足炎性踝關(guān)節(jié)進(jìn)行HE染色，觀察炎性關(guān)節(jié)組織的病理改變根據(jù)嚴(yán)重程度對滑膜增生、炎癥、血管翳、軟骨破壞進(jìn)行評分。
炎癥評分按0-3四級評分，0＝正常；1＝軟組織較少炎細(xì)胞浸潤；2＝中度炎細(xì)胞浸潤；3＝明顯炎細(xì)胞浸潤。
軟骨破壞評分按0-5六級評分，0＝正常；1＝甲苯胺藍(lán)染色，輕微軟骨丟失，無明顯膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。2＝甲苯胺藍(lán)染色，輕度軟骨丟失，伴有焦點(diǎn)性膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。3＝甲苯胺藍(lán)染色，中度軟骨丟失，伴有多焦點(diǎn)膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。4＝甲苯胺藍(lán)染色，明顯軟骨丟失，伴有多焦點(diǎn)膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。5＝甲苯胺藍(lán)染色，嚴(yán)重融合性軟骨丟失，伴有多焦點(diǎn)膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。
4.結(jié)果 4.1對足爪腫脹度的影響 1)大鼠足爪皮內(nèi)注射CFA(10g/L)0.1ml，用足爪容積測量儀于致炎后d12、d16、d20、d24、d28定期檢測大鼠足爪腫脹度。結(jié)果顯示足爪腫脹度定期檢測值模型組均較正常對照組明顯增加(P＜0.05)，見圖1。
2)陽性對照藥強(qiáng)的松10mg/kg灌胃給藥(ig)后第3天(d3)、d7、d11測量足爪容積，與模型組比較，足爪腫脹度均明顯減輕(P＜0.05-0.01)，見圖1。
3)組合物100mg/kg灌胃給藥(ig)后d3、d7、d11測量足爪容積，與模型組比較，可見足爪腫脹度均明顯減輕(P＜0.05-0.01)，見圖1 4.2.對關(guān)節(jié)指數(shù)的影響 1)大鼠足爪皮內(nèi)注射CFA(10g/L)0.1ml，按0-4五級評分，于給藥后d3、d7、d11定期評估關(guān)節(jié)指數(shù)。結(jié)果顯示關(guān)節(jié)指數(shù)評估積分模型組均較正常對照組明顯增加(P＜0.01)，見圖2。
2)陽性對照藥強(qiáng)的松10mg/kg灌胃給藥(ig)后d3、d7、d11評估關(guān)節(jié)指數(shù)，與模型組比較，關(guān)節(jié)指數(shù)評估積分均明顯減少(P＜0.05-0.01)，見圖2。
3)組合物100mg/kg灌胃給藥(ig)后d3、d7、d11評估關(guān)節(jié)指數(shù)，與模型組比較，可見能減少關(guān)節(jié)指數(shù)積分(P＜0.05-0.01)，見圖2。
4.3.對胸腺指數(shù)和脾指數(shù)的影響 1)大鼠足爪皮內(nèi)注射CFA(10g/L)0.1ml，于給藥d12后麻醉處死大鼠，稱體重，取胸腺和脾臟稱重，計(jì)算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。結(jié)果顯示模型組脾臟指數(shù)明顯大于正常對照組(P＜0.01)，但胸腺指數(shù)無明顯差異。
2)陽性對照藥強(qiáng)的松10mg/kg灌胃給藥(ig)，與模型組比較胸腺指數(shù)明顯減小(P＜0.05)，對脾臟指數(shù)無明顯影響。
3)組合物100mg/kg(ig)，與模型組比脾臟指數(shù)無明顯差異，與強(qiáng)的松組比較也無明顯差異。
4)綜合評價(jià)各受試藥物對胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的影響，陽性對照強(qiáng)的松有明顯的免疫器官抑制作用，可明顯減小胸腺指數(shù)，而組合物則無免疫器官的抑制作用。
4.4.對LPS和ConA誘導(dǎo)的T和B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響 1)大鼠足爪皮內(nèi)注射CFA(10g/L)0.1ml，于給藥d12后麻醉處死大鼠，無菌取脾臟用RPMI1640制備淋巴細(xì)胞懸液，在96孔培養(yǎng)板上，每孔加入100μl細(xì)胞懸液(終濃度為5×106ml-1)及LPS(終濃度4mg·L-1)或ConA(終濃度3mg·L-1)，終容積為200μl，各設(shè)3個(gè)復(fù)孔，置37℃、5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，誘導(dǎo)T、B淋巴細(xì)胞增殖。結(jié)果顯示模型組與對照組比較，無論是LPS還是ConA誘導(dǎo)的T和B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)均受到明顯抑制(P＜0.01)。
2)陽性對照藥強(qiáng)的松10mg/kg灌胃給藥(ig)，與模型組比較，無論是LPS還是ConA誘導(dǎo)的T和B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)均進(jìn)一步受到明顯抑制(P＜0.001)。
3)組合物組對ConA誘導(dǎo)的T和B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)有明顯的增強(qiáng)作用，與模型組比較有顯著差異(P＜0.05-0.01)，與強(qiáng)的松組比較則無明顯差異。組合物組對LPS誘導(dǎo)的T和B淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)無明顯影響，與模型組比較無明顯差異，但與強(qiáng)的松組比較有明顯差異(P＜0.01)。
4.5對LPS誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表達(dá)，Con A誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞生成IL-2mRNA表達(dá)的影響 1)大鼠足爪皮內(nèi)注射CFA(10g/L)0.1ml，于給藥d12后麻醉處死大鼠，無菌取腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)，用LPS刺激巨噬細(xì)胞IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表達(dá)，用RT-PCR法測定。另無菌取大鼠胸腺用RPMI1640制備T淋巴細(xì)胞懸液培養(yǎng)，用ConA刺激胸腺T細(xì)胞IL-2mRNA表達(dá)，用RT-PCR法測定。結(jié)果顯示模型組與對照組比較，LPS刺激巨噬細(xì)胞IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表達(dá)有明顯提高(P＜0.01)，而ConA刺激胸腺T細(xì)胞IL-2mRNA表達(dá)無明顯提高，見圖3、圖4。
2)陽性對照藥強(qiáng)的松10mg/kg灌胃給藥(ig)，與模型組比較，可明顯抑制LPS刺激巨噬細(xì)胞IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表達(dá)(P＜0.01)，對ConA刺激胸腺T細(xì)胞IL-2mRNA表達(dá)無明顯影響，見圖3、圖4。
3)組合物對對TNF-αmRNA表達(dá)的抑制較強(qiáng)，對IL-1βmRNA表達(dá)的抑制作用較弱(見圖3、圖4)。
4.6.對全身病變體重變化，前肢、耳和尾部病變的發(fā)生率和嚴(yán)重度 1)分別于注射佐劑致炎后d16(給藥前)、致炎后d20(給藥d3)、致炎后d24(給藥d7)和致炎后d28(給藥d11)稱體重，計(jì)算體重增量。增量(g)＝給藥后體重-給藥前體重。結(jié)果顯示，模型組與對照組比較，體重明顯下降；與模型組相同，組合物組體重也明顯下降。
2)觀察記錄前肢、耳和尾部病變的發(fā)生率和嚴(yán)重度，除對照組，模型組和各受試藥物組在致炎后隨時(shí)間而發(fā)生后肢被注射部位不同程度的腫脹，部分發(fā)生潰瘍或潰爛，前肢和耳發(fā)生輕度腫脹、部分大鼠尾巴發(fā)生結(jié)節(jié)，其發(fā)生率和嚴(yán)重度在給藥前基本是一致的。在開始給藥后，組合物組、陽性對照藥強(qiáng)的松組全身病變的沒有發(fā)生進(jìn)一步的惡化，部分開始減輕。
4.7.關(guān)節(jié)病理檢查 1)于注射佐劑致炎后d28(給藥前)，即各受試藥物給藥d12后處死大鼠，取后足炎性踝關(guān)節(jié)進(jìn)行HE染色，觀察炎性關(guān)節(jié)組織的病理改變根據(jù)嚴(yán)重程度對滑膜增生、炎癥、血管翳進(jìn)行評分。炎癥評分按0-3四級評分，0＝正常；1＝軟組織較少炎細(xì)胞浸潤；2＝中度炎細(xì)胞浸潤；3＝明顯炎細(xì)胞浸潤。結(jié)果顯示模型組滑膜增生明顯，滑膜中有大量的中性粒細(xì)胞浸潤和少量的血管翳生成以及輕度的軟骨破壞；陽性對照藥強(qiáng)的松能明顯減輕AA炎癥，減輕滑膜增生，減少中性粒細(xì)胞浸潤以及血管翳生成；組合物組能明顯減輕AA炎癥，減輕滑膜增生，減少中性粒細(xì)胞浸潤以及血管翳生成。
2)軟骨破壞評分按0-5六級評分，0＝正常；1＝甲苯胺藍(lán)染色，輕微軟骨丟失，無明顯膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。2＝甲苯胺藍(lán)染色，輕度軟骨丟失，伴有焦點(diǎn)性膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。3＝甲苯胺藍(lán)染色，中度軟骨丟失，伴有多焦點(diǎn)膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。4＝甲苯胺藍(lán)染色，明顯軟骨丟失，伴有多焦點(diǎn)膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。5＝甲苯胺藍(lán)染色，嚴(yán)重融合性軟骨丟失，伴有多焦點(diǎn)膠原分裂和軟骨細(xì)胞丟失。結(jié)果顯示與對照組比較，模型組軟骨破壞不明顯，組合物組的軟骨破壞也不明顯。
本發(fā)明雷公藤芍藥配伍組合物志愿者藥物試驗(yàn)。
1、試驗(yàn)藥物的制備 取雷公藤干品20Kg，加入甲醇回流提取，合并甲醇提取液，回收甲醇得甲醇提取浸膏；甲醇醇提取浸膏加入醋酸乙酯提取，合并醋酸乙酯提取液，回收醋酸乙酯得雷公藤提取物。把雷公藤提取物分成兩等份，其中一份加入適當(dāng)藥用輔料后制備成約雷公藤膠囊(每粒相當(dāng)于含雷公藤藥材0.5g)約20000粒，另一份備用。
取赤芍藥飲片180Kg，加入70％乙醇回流提取，回收乙醇得乙醇提取浸膏；乙醇提取浸膏加入醋酸乙酯提取，回收醋酸乙酯得到赤芍藥提取物。把赤芍藥提取物分成兩等份，其中一份直接灌裝膠囊制備成芍藥膠囊(每粒相當(dāng)于含赤芍藥4.5g)約20000粒，另一份備用。
將上述雷公藤提取物和赤芍藥提取物充分混合均勻，得雷公藤芍藥配伍組合物，把雷公藤芍藥配伍組合物灌裝膠囊，得雷公藤芍藥組合物膠囊(每粒相當(dāng)于含雷公藤藥材0.5g，芍藥藥材4.5g)約20000粒。
2、藥物試驗(yàn)方法與療效指標(biāo) 選取了60位患類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎志愿者進(jìn)行臨床觀察，60位類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎完全出于自愿，均簽訂了知情同意書，都符合美國風(fēng)濕病協(xié)會(huì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎修訂分類標(biāo)準(zhǔn)(1987)和活動(dòng)性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎標(biāo)準(zhǔn)，近期未接受糖皮質(zhì)激素或抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎藥物治療，無心、肝、腎等重要臟器疾病。隨機(jī)分為兩組，每組組30例。試驗(yàn)組(雷公藤芍藥組合物膠囊組)每人每天3次，每次2粒雷公藤芍藥組合物膠囊；對照組(雷公藤膠囊、芍藥膠囊聯(lián)合用藥組)每人每天3次，每次2雷公藤膠囊、2粒芍藥膠囊；連續(xù)服用12周。
觀察指標(biāo)晨僵時(shí)間；雙手握力；關(guān)節(jié)壓痛數(shù)；關(guān)節(jié)腫脹數(shù)；血沉(ESR，魏氏法)及C-反應(yīng)蛋白(CRP，火箭電泳法)；肝功能檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)；血液白細(xì)胞檢測；觀察不良反應(yīng)等。于治療前及治療期間每隔4周重復(fù)檢查并記錄。
療效標(biāo)準(zhǔn)主要以晨僵、握力、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)、腫脹數(shù)、ESR、CRP指標(biāo)作為評價(jià)指標(biāo)，以下降(握力為增加)50％作為有效計(jì)。評定級別晨僵時(shí)間＜15min；握力改善；無關(guān)節(jié)壓痛；無關(guān)節(jié)腫脹；ESR＜20mm/h或30mm/h(女性)。上述5項(xiàng)中至少具備4項(xiàng)者為臨床緩解；5項(xiàng)中至少3項(xiàng)達(dá)到上述有效者為顯效；5項(xiàng)中至少2項(xiàng)達(dá)到上述有效者為有效；5項(xiàng)中不足2項(xiàng)達(dá)到“有效”者為無效。
3、結(jié)果 分別于治療前和治療后4、8、12周觀察并記錄檢測結(jié)果，其結(jié)果如下表 表1患者療效比較
從以上患者療效比較可以看出，雷公藤芍藥組合物治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的效果要好于雷公藤與芍藥分別制備成制劑后聯(lián)合用藥效果。
經(jīng)過12周治療后，不良反應(yīng)觀察情況如下 表2不良反應(yīng)情況觀察表
從不良反應(yīng)對比可以看出，雷公藤芍藥組合物治出現(xiàn)不良反應(yīng)的人數(shù)比雷公藤與芍藥分別制備成制劑后聯(lián)合用藥要少。
權(quán)利要求
1.一種用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的配伍組合物，其特征是由雷公藤與芍藥按照重量份比為雷公藤∶芍藥＝0.01～100∶1的比例配伍而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的組合物，其特征是所述雷公藤是指衛(wèi)矛科雷公藤屬植物、雷公藤屬植物提取物、雷公藤屬植物加工成的藥材和炮制品以及雷公藤屬植物中含有的單一活性成分；所述芍藥指毛茛科芍藥屬芍藥組植物、芍藥屬芍藥組植物提取物、芍藥屬芍藥組植物加工而成的藥材和炮制品以及芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥新苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷；芍藥組植物包括草芍藥、美麗芍藥、芍藥、多花芍藥、白花芍藥、川赤藥、新疆芍藥和窄葉芍藥及其變種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是雷公藤與芍藥配伍組合物，是雷公藤屬植物、雷公藤屬植物提取物、雷公藤屬植物加工成的藥材和炮制品以及雷公藤屬植物中含有的單一活性成分任意一種，與芍藥屬芍藥組植物、芍藥屬芍藥組植物提取物、芍藥屬芍藥組植物加工而成的藥材和炮制品以及芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥新苷、羥基芍藥苷、芍藥花苷任意一種配伍而成組合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征是該組合物可制成藥劑學(xué)上的各種制劑，如片劑、膠囊劑、栓劑、顆粒劑、口服液、糖漿、合劑、口服混懸液、丸劑、酊劑、膜劑、散劑、乳膏劑、注射劑，并且可以和其他藥物組成組合物制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求2中所述的組合物，其特征是雷公藤屬植物中含有的單一活性成分包括雷公藤、昆明山海棠、黑蔓(東北雷公藤)和蒼山雷公藤、變種雷公藤。雷公藤活性成分包括包括雷公藤內(nèi)酯酮、雷公藤內(nèi)酯醇、雷公藤乙素、雷公藤丙素、雷醇內(nèi)酯、16-羥基雷公藤內(nèi)酯醇、雷藤內(nèi)酯四醇、雷藤內(nèi)酯三醇、雷藤氯內(nèi)酯、12-表雷藤內(nèi)酯三醇、異雷公藤內(nèi)酯四醇、13，14-epoxide 9，11，12-trihydroxytriptolide、新雷公藤內(nèi)酯四醇、雷公藤內(nèi)酯二醇酮、雷酚內(nèi)酯、雷酚內(nèi)酯甲醚、雷酚酮內(nèi)酯、雷酚新內(nèi)酯、異雷酚新內(nèi)酯、雷酚萜、雷酚萜甲醚、neatripeonoterpent、雷酚萜醇、11-hydroxy-14-methoxyldehydroabietane、雷藤二萜酸、山海棠酸、雷酚二萜酸、wilforol E、F、tripfinin B、triptoquinone(A、B、C、D、E、F、G)、triptobenzene(A、B、C、D、E、F、G、J、K)、雷公藤苯L、M、N、異雷酚內(nèi)酯、雷藤素、山海棠二萜內(nèi)酯A、16-hydroxy-19，20-epoxy-kaurane A、雷公藤定堿、雷公藤次堿、雷公藤吉堿、雷公藤春堿、雷公藤堿庚、雷公藤堿戊、雷公藤堿己、雷公藤寧堿、雷公藤精堿、1-desacetyl wilfordlne、1-desacetyl wilfortrlne、2-debenzoyl-2-nicotinoylwilforine、雷公藤堿辛、triptonine A、triptonine B、雷公藤堿壬、peritass-inesA、異雷公藤春堿、雷公藤明堿、雷公藤榕堿、衛(wèi)矛堿、異雷公藤定堿、雷公藤定寧D、E、F、G、H、苯乙烯南蛇堿、呋喃南蛇堿、苯代南蛇堿、南蛇藤別肉桂酰胺堿、黑蔓酯堿、雷公藤植堿、雷公藤康堿、雷公藤紅素、扁朔藤素、3，24-二氧代木栓烷-29-羥酸、polpunonic acid、2-hydroxy-polpunonic acid、wilforol A、demethyl-zeylasteral、demethylzeylastemne、23-nor-6-oxo-demethyl-zeylastemne、3-hydroxy-2-oxo-3-fridelen-20α-carboxylic acid、tripterygone、2，3-dihydroxy-friedel Δ1，3，5，(10)，7-6-actone-29-oic acid、orthosphenic acid、薩拉子酸、triptotin C、wilforol B、wilforol D、3β，29-dihydroxy-DB-friedolean-5-en、Congomnine、卡漆-5-烯-3β，28-二醇、雷公藤內(nèi)酯甲、乙(wilfortide A、B)、山海棠內(nèi)酯(hypoglaulide)、黑蔓內(nèi)酯(regelide)、雷藤三萜酸A、B、C(triptotriterpenic acid A、B、C)、3-epikatonic acid、雷二羥酸甲酯(triptodihydroxy acidmethyl ether)、黑蔓酮酯甲、乙、丙、丁、黑蔓醇酯甲、乙(regelindiol A、B)、demethylregelinn、oleana-9(11)，12-dien-3-one、齊墩果酸乙酸酯、山海棠萜酸、tripterygicacid A、齊墩果酸乙酸酯、山海棠萜酸、tripterygicalidA、齊墩果酸、3-oxo-22α-hydroxy-Δ12-OleaHen-29-oicacid、3β，2α-二羥基-Δ12-齊墩果烯-29-羥酸(3β，2α-dihydroxy-Δ12-oleanen-29-oic acid)、3-acetyl-oleanolic acid、wifoml C、3α，24-di-hydroxy-olean-12-en-28-oic acid、2α，，3α，24-trihydroxy-Δ12-ursene-28-oic acid、3β，15β-dihydroxy-Δ12-oleanen-28-oic acid、3β-hydroxy-olean-11，13(18)-diene、烏索-3β，5α-二醇、triptotriterpenoidal lactone A、zeorin、triptolactone、薩拉子酸-3-乙基醚。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的配伍組合物及其制備方法，由雷公藤和芍藥配伍成藥方。所述的雷公藤與芍藥的配伍其重量份比為雷公藤∶芍藥＝0.01～100∶1的比例。本發(fā)明治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎效果不僅好于雷公藤制劑單用效果，而且好于白芍總苷聯(lián)合雷公藤多苷治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的效果，同時(shí)可以大大減輕或避免雷公藤制劑單用引起的毒副作用。
文檔編號A61P19/04GK101810686SQ20101016793
公開日2010年8月25日 申請日期2010年5月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月7日
發(fā)明者周海濱, 江海龍, 楊海玲, 張新明 申請人:寧波立華制藥有限公司