專利名稱：：一種腹可安片的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種腹可安片的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
：腹可安片是一種用于治療急性胃腸炎、消化不良引起的腹痛、腹瀉、嘔吐的中藥，該產(chǎn)品收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十一冊。腹可安片由扭肚藤、火炭母、車前草、救必應(yīng)、石榴皮制成，處方中，火炭母、扭肚藤、救必應(yīng)均為地方習(xí)用藥材，收載于廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)(第一冊)，標(biāo)準(zhǔn)號分別為粵D/WS-029-2003、粵D/WS-056-2003、粵D/WS-092-2003;車前草、石榴皮均收載于2005年版《中國藥典》一部。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)簡單，難以有效控制成品的質(zhì)量。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是為了提供一種能對腹可安片成品的質(zhì)量進(jìn)行有效控制的腹可安片的質(zhì)量控制方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取了以下的技術(shù)方案一種腹可安片的質(zhì)量控制方法，所述質(zhì)量控制方法采用以下鑒別和含量測定中的一種或幾種(1)以體積比為14-16:1-3:0.5-1.5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，采用薄層色譜法鑒別救必應(yīng)；(2)以體積比為4-8:2-6:0.5-1.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，采用薄層色譜法鑒別石榴皮和火炭母；(3)以體積比為4-6:3-5:0.4-0.6的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，采用薄層色譜法鑒別扭肚藤；(4)采用高效液相色譜法測定救必應(yīng)的有效成分紫丁香苷的含量。所述質(zhì)量控制方法采用以下鑒別和含量測定中的一種或幾種(1)救必應(yīng)的鑒別方法取腹可安片成品10片，除去包衣，研細(xì)，加乙酸乙酯25-35ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，作為供試品溶液；另取救必應(yīng)對照藥材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各lOpl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為15:2:1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，展距12cm，取出，晾干，噴以8%-12%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)石榴皮和火炭母的鑒別方法取(l)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒食子酸對照品，加甲醇制成每lml含0.4-0.6mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液15^1、對照品溶液5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為6:4:1的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以4%-6%三氯化鐵乙醇溶液，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)扭肚藤的鑒別方法取(l)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取扭肚藤對照藥材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為5:4:0.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.8-1.2%三氯化鋁乙醇溶液，置波長為365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4)照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定腹可安片成品中救必應(yīng)的有效成分紫丁香苷的含量以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為15:85的乙腈-水為流動相，檢測波長為265nm，理論板數(shù)按紫丁香苷峰計算應(yīng)不低于2500;取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理25-35分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；取紫丁香苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含50嗎的溶液，即得對照品溶液；分別精密吸取供試品溶液與對照品溶液各10W，注入液相色譜儀，測定，即得；按照腹可安片成品計算，每片含救必應(yīng)以紫丁香苷計，不少于設(shè)定值為合格。成品每片含救必應(yīng)以紫丁香苷(C17H2409)計，設(shè)定值為0.03mg。上述質(zhì)量控制方法并不需要按照先后順序進(jìn)行，而且同時還可以進(jìn)行常規(guī)檢測，如形狀的觀察。該成品還應(yīng)符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。符合以上條件的腹可安片成品為合格。本發(fā)明在原有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了救必應(yīng)、扭肚藤、石榴皮的薄層色譜鑒別及救必應(yīng)中紫丁香苷含量測定，本發(fā)明提高了腹可安片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有較強的專屬性與良好的重現(xiàn)性，有利于實現(xiàn)對腹可安片成品的質(zhì)量的有效控制。具體實施例方式下面結(jié)合實施例詳細(xì)說明本發(fā)明。實施例1:本實施例質(zhì)量控制方法選用廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的腹可安片(批號J01001等十批)為材料。該腹可安片的質(zhì)量控制方法包括以下鑒別和含量測定方法A、鑒別(1)取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加乙酸乙酯30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取救必應(yīng)對照藥材(廣州市藥檢所標(biāo)本室提供)0.5g，加乙酸乙酯20ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15:2:1)為展開劑，展開，展距12cm，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，日光下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)取(1)項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取沒食子酸對照品(中檢所:0831-9501)，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液15pl、對照品溶液5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(6:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，日光下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(3)取(1)項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取扭肚藤對照藥材(廣州市藥檢所標(biāo)本室提供)0.5g，加乙酸乙酯20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各l(Hil，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5:4:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。B、含量測定本發(fā)明的腹可安片的質(zhì)量控制方法，還包括選取處方救必應(yīng)藥材中紫丁香苷為含量測定指標(biāo)，采用HPLC法測定本品紫丁香苷的含量。照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法對腹可安片成品中救必應(yīng)藥材中的紫丁香苷進(jìn)行了測定，測定步驟包括(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑(色譜柱DiamonsilC18(200X4.6mm，5iim)，柱編號8022889;柱溫40。C);以乙腈(色譜純)-水(超純水)=15:85為流動相，流速為1.0ml/min;檢測波長為265nm。理論板數(shù)按紫丁香苷峰計算應(yīng)不低于2500。(2)對照品溶液的制備取紫丁香苷對照品(批號111574-200201，供含量測定用，中國藥品生物制品檢定所提供)適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含50嗎的溶液，即得。(3)供試品溶液的制備取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80。/。甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率50kHz)30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。(4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各lOpl，注入液相色譜儀，測定，即得。按照腹可安片成品計算，每片含救必應(yīng)以紫丁香苷計，不少于設(shè)定值為合格。上述質(zhì)量控制方法并不需要按照先后順序進(jìn)行，而且同時還可以進(jìn)行常規(guī)檢測，如形狀的觀察。該成品還應(yīng)符合中國藥典2005年版一部附錄ID片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。符合以上條件的腹可安片成品為合格。以下對救必應(yīng)藥材中紫丁香苷含量測定的方法學(xué)進(jìn)行考察-在該實施例中，所用儀器為島津LC-20AT高效液相色譜儀；SPD-M20A檢測器；LC-Solution色譜工作站。所用試劑中，乙腈為色譜純；水為超純水；其它試劑均為分析純。1.檢測波長取紫丁香苷對照品溶液，在190400nm波長范圍進(jìn)行掃描，結(jié)果顯示紫丁香苷在220nm和265nm波長處有最大吸收，考慮到220nm波長處測定的干擾因素較多，故選擇檢測波長為265nm。2.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱DiamonsilC18(200x4.6薩，5,)，柱編號8022889;柱溫40°C;流動相乙腈-水(15:85)，流速1.0ml/min;檢測波長為265nm。理論板數(shù)按紫丁香苷峰計算，結(jié)果見表l?？紤]到不同色譜柱的差異，將理論板數(shù)定為應(yīng)不低于2500。供試品色譜中紫丁香苷峰與相鄰峰分離度大于1.5，符合《中國藥典》2005年版一部附錄的有關(guān)要求。表l不同色譜柱的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>3.峰純度檢查分別吸取對照品和供試品溶液，按本發(fā)明救必應(yīng)中紫丁香苷含量測定項(以下簡稱[含量測定])下的色譜條件試驗，用DAD檢測器在190mn400nm波長范圍對紫丁香苷色譜峰進(jìn)行掃描，驗證其單一性，結(jié)果顯示供試品色譜中紫丁香苷峰的紫外光譜掃描圖與紫丁香苷對照品紫外光譜掃描圖一致，通過峰純度曲線計算其峰純度為98.99%。4.專屬性取救必應(yīng)陰性樣品(廣州中一藥業(yè)有限公司提供)約l.Og，精密稱定，按[含量測定]下供試品溶液的制備方法制備救必應(yīng)陰性對照溶液。精密吸取紫丁香苷對照品溶液、供試品溶液和救必應(yīng)陰性對照溶液，分別注入液相色譜儀，按含量測定項下方法測定，結(jié)果救必應(yīng)陰性對照溶液色譜圖中，在與紫丁香苷對照品色譜峰相應(yīng)的位置上，未見有色譜峰，說明處方中的其他藥味對測定無干擾。5.耐用性試驗5.1提取溶劑的選擇取同一批腹可安片樣品(批號:L07075)，按[含量測定]項下方法分別比較甲醇、80%甲醇、50%甲醇和30。/。甲醇各25ml超聲處理30分鐘的提取效果，結(jié)果見表2。結(jié)果顯示除了以甲醇為溶劑提取含量較低外，其他三種溶劑提取效果基本一致，以80%甲醇為溶劑提取雜質(zhì)相對少，且容易過濾，故選擇以80。/。甲醇為提取溶劑。表2不同提取溶劑的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>5.2提取方法的選擇取同一批腹可安片樣品(批號L07075),以80。/。甲醇25ml為提取溶劑，分別比較加熱回流1小時和超聲處理30分鐘的提取效果，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示兩種方法提取效果差別不大，超聲提取操作簡便，故選用超聲提取方法。表3不同提取方法的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>5.3提取時間的選擇取同一批腹可安片樣品(批號L07075),以80。/。甲醇25ml為提取溶劑，分別比較超聲15、30和45分鐘的提取效果，結(jié)果見表4。結(jié)果顯示上述不同超聲提取時間對提取效果影響不大，為保證提取完全，選擇超聲提取30分鐘。表4提取時間的選擇<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>0.99260.7761.00200.782450.78l觀40.7885.4穩(wěn)定性考察取同一份供試品溶液(批號L07075),在室溫放置0、2、4、8、12、24小時后分別進(jìn)樣，依法測定，結(jié)果見表5。紫丁香苷平均含量為0.803mg/片，RSD為0.9%(n=6)，表明供試品溶液在24小時內(nèi)測定結(jié)果基本穩(wěn)定。表5穩(wěn)定性試驗結(jié)果時間(小時)02481224含量(mg/片)0.8020.8160.8020.7940.8010.8025.5色譜柱的考察分別選用不同品牌的色譜柱，按[含量測定]項下方法測定同一供試品溶液(批號L07075)，結(jié)果見表l。紫丁香苷的平均含量為0.78mg/片，RSD為2.7。/。(n=3)，結(jié)果顯示所選用的三種色譜柱均能達(dá)到系統(tǒng)適用性的要求。6，線性考察分別精密吸取紫丁香苷對照品溶液(濃度為0.117mg/ml)1^1、3^1、5^1、1(^1、15^1、20|il，注入液相色譜儀，依法測定。以峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣量C(ng)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(見表6)，得線性方程A=2X106C+64866，r=0.999，結(jié)果表明紫丁香苷在0.U72.34嗎范圍內(nèi)與其峰面積線性關(guān)系良好。表6線性考察結(jié)果編號進(jìn)樣量(ug)平均峰面積(A)10.11725847720.35182882130.585139161741.1727754931.755402664162.3451957757.重復(fù)性試驗取腹可安片同一批號(批號L07075)樣品細(xì)粉約l.Og，精密稱取6份，按[含量測定]項下方法制備供試品溶液，依法測定，結(jié)果見表7。紫丁香苷平均含量為0.802mg/片，RSD為0.5%(n=6)。表7重復(fù)性試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>8.準(zhǔn)確度(以加樣回收率表示)取已知含量(批號L07075，含量為0.802mg/片，即2.38mg/g)的樣品粉末約0.5g，精密稱取共6份，置具塞錐形瓶中，分別精密加入80%甲醇15ml和紫丁香苷對照品溶液(0.117mg/ml)10ml，稱定重量，按[含量測定]項下方法制備供試品溶液，依法測定，計算回收率，結(jié)果見表8。紫丁香苷平均回收率為103.1%，RSD為1.1%(n=6)。表8加樣回收試驗結(jié)果取樣量樣品含量對照品加入量測得總量回收率<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>9.樣品含量測定取收集的樣品共10批，按[含量測定]項下方法制備供試品溶液，依法測定，計算供試品中紫丁香苷的含量，結(jié)果見表9。表9樣品含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>權(quán)利要求1.一種腹可安片的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法采用以下鑒別和含量測定中的一種或幾種(1)以體積比為14-16∶1-3∶0.5-1.5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，采用薄層色譜法鑒別救必應(yīng)；(2)以體積比為4-8∶2-6∶0.5-1.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，采用薄層色譜法鑒別石榴皮和火炭母；(3)以體積比為4-6∶3-5∶0.4-0.6的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，采用薄層色譜法鑒別扭肚藤；(4)采用高效液相色譜法測定救必應(yīng)的有效成分紫丁香苷的含量。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腹可安片的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述質(zhì)量控制方法采用以下鑒別和含量測定中的一種或幾種(1)救必應(yīng)的鑒別方法取腹可安片成品10片，除去包衣，研細(xì)，加乙酸乙酯25-35ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，作為供試品溶液；另取救必應(yīng)對照藥材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10^1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為15:2:1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，展距12cm，取出，晾干，噴以8%-12%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)石榴皮和火炭母的鑒別方法取(l)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒食子酸對照品，加甲醇制成每lml含0.4-0.6mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液15^1、對照品溶液5pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為6:4:1的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以4%-6%三氯化鐵乙醇溶液，日光下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)扭肚藤的鑒別方法取(l)項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取扭肚藤對照藥材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液揮千，殘渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，制成對照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為5:4:0.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.8-1.2%三氯化鋁乙醇溶液，置波長為365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。(4)照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定腹可安片成品中救必應(yīng)的有效成分紫丁香苷的含量以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為15:85的乙腈-水為流動相，檢測波長為265nm，理論板數(shù)按紫丁香苷峰計算應(yīng)不低于2500;取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理25-35分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；取紫丁香苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含50昭的溶液，即得對照品溶液；分別精密吸取供試品溶液與對照品溶液各10pl，注入液相色譜儀，測定，即得；按照腹可安片成品計算，每片含救必應(yīng)以紫丁香苷計，不少于設(shè)定值為合格。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的腹可安片的質(zhì)量控制方法，其特征在于按照腹可安片成品計算，每片腹可安片含救必應(yīng)以紫丁香苷計，設(shè)定值為0.03mg。全文摘要本發(fā)明公開了一種腹可安片的質(zhì)量控制方法，在原有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了救必應(yīng)、扭肚藤、石榴皮的薄層色譜鑒別及救必應(yīng)中紫丁香苷含量測定，本發(fā)明提高了腹可安片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有較強的專屬性與良好的重現(xiàn)性，有利于實現(xiàn)對腹可安片成品的質(zhì)量的有效控制。文檔編號A61K36/704GK101653483SQ20091019248公開日2010年2月24日申請日期2009年9月18日優(yōu)先權(quán)日2009年9月18日發(fā)明者伍麗萍,何藝蘭,晶孫,程艷陽,謝友蓮,邱文珍,黎炳華申請人:廣州中一藥業(yè)有限公司