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一種具備多個功能層的納米人工硬腦膜及其制備方法

文檔序號:1148393閱讀:335來源:國知局
專利名稱:一種具備多個功能層的納米人工硬腦膜及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種具備多個功能層的納米人工硬腦膜及其制備方法,屬于生 物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)
硬腦膜缺損在神經(jīng)外科臨床工作中常見,開放性顱腦損傷(工業(yè)、交通、 戰(zhàn)爭等)、腫瘤的侵蝕、先天性腦膜缺損及其它顱腦疾患原因均可引發(fā)硬腦膜 缺損。硬腦膜缺損需及時修補以防腦脊液外溢,防止腦的膨出和大氣壓的壓迫, 否則將危及人體生命。硬腦膜缺損還能引發(fā)顱內(nèi)感染、腦粘連、皮下積液等并 發(fā)癥,經(jīng)常會引起如癩痛、頭痛、腦功能障礙等疾病。
目前硬腦膜的代用品雖有很多,修復(fù)硬腦膜的材料可分為自體筋膜、同 種異體材料、天然及人工合成材料、異種材料4類。目前市場上產(chǎn)品各有其優(yōu) 缺點。已有技術(shù)的缺點如下
① 目前自身筋膜重建硬腦膜仍然是臨床應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn),但術(shù)后早期腦脊液漏 及皮下積液的發(fā)生率仍然較高,易導(dǎo)致粘連等并發(fā)癥,可能引起供區(qū)不愈或功 能障礙。
② 同種異體和異種材料無法完全避免免疫排斥,殘留的抗原會導(dǎo)致不同程 度的炎癥反應(yīng),造成纖維變性和腦粘連。易對腦組織產(chǎn)生癱痕,刺激。同種異 體材料來源受限,難以形成商業(yè)化生產(chǎn)。同時由于異體或異種來源,無法安全 避免帶來病毒傳播的危險。例如來源于牛的材料的人工腦膜,因歐洲瘋牛病發(fā) 生后,其來源大打折扣,而安全性也大受懷疑。
③ 合成的天然材料基本為天然膠原蛋白,但蛋白來源使其無法完全避免免 疫排斥。行修補時所用膠原蛋白容易被吸收,無法起著充分隔離頭皮軟組織與 腦組織作用而不利于之后的顱骨修補手術(shù)等問題,不利于術(shù)后處理。
④ 不可吸收材料/部分吸收材料的不可吸收部分對受體永遠(yuǎn)是異物,可能導(dǎo) 致慢性炎癥反應(yīng)、術(shù)區(qū)感染、延期出血,在顱腦敏感區(qū),會產(chǎn)生對中樞的壓迫 并引起其它并發(fā)癥。⑤不可吸收/部分吸收材料長期存在于體內(nèi),還會會產(chǎn)生不同程度的結(jié)締組 織增生包裏,更嚴(yán)重的是溶脹碎裂和植入后周圍組織愈著形成纖維性包裹,即 所謂"膜片致癌"。
不同的不可吸收材料還各有不足如金屬類還不利于CT 、核磁及放射
檢查和治療;硅橡膠生有凝血、吸收類脂物后會溶脹碎裂,抗張強度差等問題,
滌綸布類外面可形成較厚的癱痕,其下方易與腦粘連等缺點;碳纖維本身機(jī)械 性能有限。
⑦已有的可吸收人工腦膜產(chǎn)品在降解速度、降解性能上在有一定缺陷, 臨床應(yīng)用范圍有限。
總之,目前人工腦膜在臨床應(yīng)用上存在著不足,不利于大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn) 及臨床推廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服已有技術(shù)的不足,提供一種具備多個功能層的納米 人工硬腦膜,所述納米仿生人工硬腦膜可被完全吸收、且具有良好的柔韌性、 彈性及生物組織相容性,具有防止腦粘連、可完全降解吸收且降解速度適中、 能促進(jìn)硬膜化過程、不帶病毒、無免疫排斥的、可根據(jù)需要任意裁剪、成本較 低、生產(chǎn)周期短、保存、運輸容易、臨床應(yīng)用操作簡單、應(yīng)用范圍廣泛的納米 仿生人工硬腦膜。
本發(fā)明的另 一 目的是提供上述納米人工硬腦膜的制備方法。
本發(fā)明通過以下,技術(shù)方案實現(xiàn)上述目的
一種具備多個功能層的納米人工硬腦膜,包含至少兩層結(jié)構(gòu),面向大腦的 一層為疏水性的防粘連電紡層,背向大腦的一層為親水性的納米細(xì)胞支架層; 兩層之間還可以有過渡層;任意兩個相鄰層之間的連接方式優(yōu)選通過電紡連 接。
所述親水性的納米細(xì)月包支架層由靜電紡制成,即背向大腦面的電紡層為細(xì) 胞支架層,是為了有效誘導(dǎo)干細(xì)胞及成纖維細(xì)胞的遷入,該層則采用采用生物 相容性好的親水性材料,再者,通過靜電紡絲參數(shù)調(diào)整,設(shè)計上將平均孔徑達(dá) 到20 100)nM。這樣有利于成纖維細(xì)胞的遷入、粘附、增殖和生長分化。
所述防粘連層是采用疏水性材料,不利于細(xì)胞的遷入,從而達(dá)到防粘連的 目的;制備該層材料的靜電紡絲參數(shù)進(jìn)行調(diào)整,其孔隙孔徑在納米以下,比細(xì)胞,J、一到二個數(shù)量級,從而阻止細(xì)胞進(jìn)入,防止腦粘連產(chǎn)生。因為人體細(xì)胞f.
徑平均在10 20jliM, —般成纖維細(xì)胞直徑在20 30juM之間。腦膜主要分布 成纖維細(xì)胞及其分泌的膠原纖維。平均孔徑在3 juM以下,已經(jīng)可以有效的防 止腦粘連的產(chǎn)生。靜電紡纖維得到的孔隙大小分布很大程度上依賴于纖維直 徑,已知纖維直徑減小時,孔徑也在同時減小。據(jù)已發(fā)表的文獻(xiàn),纖維直徑在 4 10/aM時,孔徑從20 45juM。文獻(xiàn)報道,靜電紡再生絲素纖維非織造織物 的平均孔徑可達(dá)到2jjM。
本發(fā)明同時提供了 一種上述具備多個功能層的納米人工硬腦膜的制備方 法,包括以下步驟
(1)制備疏水性聚合物的電紡溶液;制備親水性聚合物的電紡溶液; (2 )用制得的疏水性聚合物的電紡溶液通過靜電紡制成疏水性的防粘連 電紡層;
(3)用制得的親水性聚合物的電紡溶液在所述防粘連電紡層上通過靜電 紡制備疏水性的細(xì)胞支架層,接收為膜狀結(jié)構(gòu)得到納米仿生人工硬腦膜。 制得的人工硬腦膜經(jīng)清洗、滅菌、包裝后貯存。
上述步驟(1)中所述制備親水性聚合物的電紡溶液也可以在步驟(2)和 步驟(3)之間進(jìn)行;所述步驟(2)、 (3)可以重復(fù)若干次,達(dá)到合適的厚度。 所述防粘連層的靜電紡的工藝參數(shù)為
微量注射泵的速率為0.1~5.0毫升/小時,高壓發(fā)生器的電壓為5 40KV, 接收距離為5.0 30.0厘米。細(xì)胞支架層的靜電紡的工藝參數(shù)為0.5 20.0毫升 /小時,調(diào)節(jié)高壓發(fā)生器的電壓為10~45 KV,調(diào)節(jié)接收裝置的接收距離為 5.0 30.0厘米。
所述疏水性的電紡溶液可選"f奪疏水性的L 聚乳酸和s-己內(nèi)酯,兩者重量 比為50: 50或30:70或70:30,作為共聚高分子材料,數(shù)均分子量是 150000~500000,溶于六氟異丙醇或二氯曱烷;可用溶液總重量8 14%的聚己 內(nèi)酯的氯仿/曱醇混合溶液;或者其他合適的聚合物及溶劑。
將上述溶液加入靜電紡裝置的注射器中,調(diào)節(jié)微量注射泵的速率為0.1~10 毫升/小時,調(diào)節(jié)高壓發(fā)生器的電壓為10 45 KV,調(diào)節(jié)接收裝置的接收距離 為10 40厘米,并將纖維接收為膜狀結(jié)構(gòu)。
此處通過靜電紡制備得到纖維直徑平均孔徑在3 pM或以下,纖維直徑在50 1000nM之間。
所述親水性的電紡溶液選擇的親水性材料作制備細(xì)胞支架層,可以選用親 水性聚氨酯或者天然明膠、纖維素、殼聚糖、硫酸軟骨素等親水性材料;優(yōu)選 的方案親水性聚氨酯,與/或天然明膠,硫酸軟骨素、聚乙二醇,重量比20~80: 80 20,紡絲液為溶液總重量的3~15%;或者用親水性聚氨酯與天然明膠,或 硫酸軟骨素,重量比20 80: 80 20,紡絲液為溶液總重量的3 15 %;也可選 用其他合適聚合物及溶劑。
上述親水性聚合物電紡溶液的靜電紡絲參數(shù)為接收距離從15 25cm,電 壓15 45KV,親水性的納米細(xì)胞支架層孔徑為20 200mM。納米細(xì)胞支架層 纖維直徑介于5-200 開啟靜電紡絲,在已紡好的防粘連層上繼續(xù)紡細(xì)胞
支架層。
所述電紡溶液是一種或兩種以上聚合物混合的電紡溶液,親水性聚合物材 料選自硫酸軟骨素,肝素,瓊脂,葡聚糖、褐藻酸、改性纖維素、海藻酸、淀 粉、纖維素、明膠、纖維蛋白、絲蛋白、彈力蛋白擬態(tài)的肽聚合物、膠原蛋白、 殼聚糖、改性殼聚糖、親水性聚氨酯、聚乙二醇、聚甲基丙烯酸曱酯、聚7 基丙烯酸曱酯、聚羥基丁酸戊酸酯、聚羥基丁酸己酸酯、聚乙烯醇或聚丙交酯; 疏水性聚合物材料選自疏水性聚氨酯、聚碳酸酯、聚乳酸、聚已內(nèi)酯、聚乙交 酯或聚對苯二曱酸乙二酯。由于目前高分子材料改性研究在不斷發(fā)展,原本親 水性材料改性為疏水或疏水材料改性為親水都越來越常見,范圍也越來越廣。
將上述材料溶于一定的溶劑,形成電紡液,就可以通過靜電紡絲技術(shù)制得 納米仿生支架。
所述電紡溶液的溶劑可以為曱酸、乙酸、乙醇、丙酮、二曱基曱酰胺、二 甲基乙酰胺、四氫呋喃、二曱基亞砜、六氟異丙醇、三氟乙醇、二氯曱烷、三 氯曱烷、甲醇、乙醇、氯仿、二噁烷、三氟乙烷、三氟乙酸、水或它們的任意 混合物。上文所述的高分子材料和溶劑用于靜電紡絲,這類報道在已有的文獻(xiàn) 中有相當(dāng)多的數(shù)量。
制得的產(chǎn)品經(jīng)清洗、滅菌,包裝后貯存。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有以下有益效果
(1 )本發(fā)明人工硬腦膜機(jī)械特性能滿足適應(yīng)癥對抗拉伸強度及柔韌性的 要求,具有可靠的強度和良好的柔韌性、彈性;能夠支持縫針,不透水,在外科修補時和修補后能承受一定的力并產(chǎn)生變形而不破損,使腦脊液不至于滲
漏,起到保護(hù)腦組織的作用,而且可根據(jù)需要任意裁剪;
(2)本發(fā)明人工硬腦膜的內(nèi)側(cè)面(即面向大腦的一面)光滑,能防粘連, 能起著很好地隔離頭皮軟組織與腦組織的作用,外側(cè)面(即背向大腦的一面) 和側(cè)邊則為多孔結(jié)構(gòu),允許細(xì)胞長入;可促使盡早自體成纖維細(xì)胞以及某些未 分化的細(xì)胞向膠原內(nèi)部沁潤生長浸潤,促使腦膜早日修復(fù)。利于日后進(jìn)行顱骨 修復(fù)手術(shù);
(3 )本發(fā)明的硬腦膜采用的材料是被證實能夠在新生組織生成后被完全 吸收的,避免了膜片致癌;
(4)本發(fā)明的納米仿生人工腦膜本身不含活細(xì)胞成分,不使用外源細(xì)胞 和蛋白,免除了因此而帶來免疫排斥、病毒傳播、疾病傳染的諸多風(fēng)險;能杜 絕疾病傳播;
(5 )本發(fā)明所使用的材料是目前已經(jīng)證實對人體無毒無害的安全生物材 料,具有良好的生物組織相容性,無異物排斥反應(yīng),無毒性反應(yīng),無致癌、至( 畸作用。不會帶來免疫排斥、病毒傳播、疾病傳染的諸多風(fēng)險,也不會帶來其 它毒害作用;
(6) 本發(fā)明的人工腦膜材料來源充分,成本較低,避免了天然材料來源 不足,成本高,改性復(fù)雜的缺點,貯存運輸筒單;
(7) 本發(fā)明的人工腦膜的制備方法工藝步驟簡化,生產(chǎn)時間短,能有效 避免加工過程中產(chǎn)品受到污染,產(chǎn)品質(zhì)量易于控制,產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)容易實現(xiàn),產(chǎn)品 可實現(xiàn)低成本、高效率的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
(8) 根據(jù)本發(fā)明制備的人工腦膜臨床應(yīng)用簡單,由于在處理中沒有引入 戊二醛等毒性物質(zhì),在臨床應(yīng)用時不需要再進(jìn)行嚴(yán)格的浸泡和清洗,也因此避 免了由于提前浸泡造成的預(yù)選尺寸不夠而使產(chǎn)品報廢的情況。


圖1為實施例1制得的人工腦膜結(jié)構(gòu)示意圖,其中1為細(xì)胞支架層,2為 防粘連層。
具體實施例方式
以下通過具體的實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案。 實施例1
8(1 )制備防粘連層選擇疏水性的L 聚乳酸和e-己內(nèi)酯,兩者比值為50: 50,作為共聚高分子材料,數(shù)均分子量是260000,溶于六氟異丙醇。
將上述溶液加入靜電紡裝置的注射器中,調(diào)節(jié)微量注射泵的速率為5毫升 /小時,調(diào)節(jié)高壓發(fā)生器的電壓為30KV,調(diào)節(jié)接收裝置的接收距離為20厘米, 并將纖維接收為膜狀結(jié)構(gòu)。
此處通過靜電紡制備得到纖維直徑平均300nm。。
關(guān)閉靜電裝置。
(2)制備細(xì)胞支架層本實施例選用以下方案聚乙二醇與硫酸軟骨素
質(zhì)量比為70:30,紡絲液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為9%。
開啟靜電紡絲,在已紡好的防粘連層上繼續(xù)紡細(xì)胞支架層。 接收距離從llcm,電壓20KV,纖維平均直徑在10jam。制得的人工硬腦
膜結(jié)構(gòu)見圖l所示,其中1為細(xì)胞支架層,2為防粘連層。
將制得的人工腦膜從培養(yǎng)皿中取出,用蒸餾水漂洗5遍,經(jīng)凍干后真空包
裝,經(jīng)25kGy鈷-60滅菌后負(fù)20攝氏度低溫保存。
實施例2
(1 )制備防粘連層選擇疏水性的L 聚乳酸和s-己內(nèi)酯,兩者比值為50: 50,作為共聚高分子材料,數(shù)均分子量是260000,溶于六氟異丙醇。
將上述溶液加入靜電紡裝置的注射器中,調(diào)節(jié)微量注射泵的速率為5毫升 /小時,調(diào)節(jié)高壓發(fā)生器的電壓為30KV,調(diào)節(jié)接收裝置的接收距離為20厘米, 并將纖維接收為膜狀結(jié)構(gòu)。
此處通過靜電紡制備得到纖維直徑平均300nm。。
關(guān)閉靜電裝置。
(2) 制備過渡層本實施例選用以下方案聚氨酯與透明質(zhì)酸的質(zhì)量比 為70:30,紡絲液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%。
開啟靜電紡絲,在已紡好的防粘連層上繼續(xù)紡過渡層。 接收距離從11 cm,電壓20KV,纖維平均直徑在5 jli m。 關(guān)閉靜電紡。
(3) 制備細(xì)胞支架層本實施例選用以下方案聚乙二醇與硫酸軟骨素 質(zhì)量比為70:30,紡絲液質(zhì)量分^:為9%。
開啟靜電紡絲,在已紡好的過渡層上繼續(xù)紡細(xì)胞支架層。接收距離從llcm,電壓20KV,纖維平均直徑在10)um。 清洗、保存方式同實施例1。 實施例3
用實施例1制得的硬腦膜進(jìn)行犬動物實驗
實驗犬體重15-20 KG,年齡1.5 2歲,雌雄不拘,共5只。以氯胺酮肌 肉注射全麻,麻醉剃毛后,將動物置于專用手術(shù)臺上,腹臥位。用2%石典酒和 75%酒精消毒。動物頭頂正中,縱向切開。用剝離器分離骨膜,暴露雙頂部顱 骨板,用高速磨鉆磨開顱骨,雙頂部形成骨窗。用小剪刀剪掉雙側(cè)頂部3 cm x3cm大小的矩形硬腦膜,制造出頂部的硬腦膜缺損。在暴露的腦表面電灼, 造成6個1 mm x 1 mm大小的損傷點。將用本發(fā)明實施例1所制備的人工腦膜 修剪成相應(yīng)形狀及尺寸的修補材料,防粘連層向腦表面,用4/0無損傷絲主、 間斷縫合,針距4mm,修補于犬頂部的缺損。用圓針4號絲線縫合肌肉。術(shù) 后對動物進(jìn)行常規(guī)的喂養(yǎng)及觀察。術(shù)后動物恢復(fù)良好,切口愈合良好,無腦脊 液漏,無癲癇發(fā)生。術(shù)后進(jìn)食進(jìn)水正常,動物的戶外活動正常,沒有發(fā)現(xiàn)運動 障礙,存活至預(yù)定期限。
術(shù)后18個月,動物以手術(shù)部位為中心,在大于手術(shù)部位lcm范圍切取標(biāo) 本,使其包括人工腦膜及周邊硬腦膜及內(nèi)面的腦組織。切取出標(biāo)本后,可見人 工腦膜與硬腦膜的連接處對合平整,無分界,已完全愈合,僅見縫合的絲線。 原生硬腦膜之間未見明顯充血,出血等棑異反應(yīng)。 實施例4
用實施例2制得的硬腦膜進(jìn)行新西蘭兔動物實驗
實驗的動物施行頂部開顱,人為制造部分硬腦膜缺損及腦組織損傷,然后 以人工腦膜分別實施硬腦膜修補術(shù)。術(shù)后對動物進(jìn)行常規(guī)的喂養(yǎng)及觀察。術(shù)后 動物恢復(fù)良好。術(shù)后18個月,動物以手術(shù)部位為中心,在大于手術(shù)部位lcm 范圍切取標(biāo)本,使其包括人工腦膜及周邊硬腦膜及內(nèi)面的腦組織。切取出標(biāo)本 后,可見內(nèi)側(cè)表面可見上皮細(xì)胞覆蓋,上皮下可見纖維組織增生,纖維母細(xì)碎 增生,膠原纖維增多,致使材料內(nèi)帶血運的新生組織增生,宿主新生組織侵入, 材料降解,總量明顯減少,內(nèi)部可見毛細(xì)血管。新老組織界面無中性粒細(xì)胞, 淋巴細(xì)胞等炎癥細(xì)胞反應(yīng),界面處無嚢壁形成。蛛網(wǎng)膜及腦組織正常。
權(quán)利要求
1. 一種具備多個功能層的納米人工硬腦膜,其特征在于包含至少兩層結(jié)構(gòu),面向大腦的一層為疏水性的防粘連電紡層,背向大腦的一層為親水性的納米細(xì)胞支架層;所述親水性的納米細(xì)胞支架層由靜電紡制備得到。
2. 如權(quán)利要求1所述的納米人工硬腦膜,其特征在于所述防粘連電紡層 和親水性的納米細(xì)胞支架層之間還有過渡層。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的納米人工硬腦膜,其特征在于所述親水性的 納米細(xì)胞支架層孔徑為20 200 ju M,纖維直徑在5~200 ja M之間。
4. 如權(quán)利要求1或2所述的納米人工硬腦膜,其特征在于所述防粘連電 紡層孔徑在3 ja M以下,纖維直徑在50~1000nM之間。
5. —種權(quán)利要求1所述納米人工硬腦膜的制備方法,其特征在于包括以 下步驟(1)制備疏水性聚合物的電紡溶液;制備親水性聚合物的電紡溶液; (2 )用制得的疏水性聚合物的電紡溶液通過靜電紡制成疏水性的防粘連 電紡層;紡制備疏水性的細(xì)胞支架層,接收為膜狀結(jié)構(gòu)得到納米仿生人工硬腦膜。
6. 如權(quán)利要求5所述的制備方法,其特征在于步驟(1)中所述制備親水 性聚合物的電紡溶液在步驟(2)和步驟(3)之間進(jìn)行。
7. 如權(quán)利要求5或6所述的制備方法,其特征在于步驟(2)所述靜電紡 的工藝參數(shù)為微量注射泵的速率為0.1 5.0毫升/小時,高壓發(fā)生器的電壓 為5 40KV,接收距離為5.0 30.0厘米。
8. 如權(quán)利要求5或6所述的制備方法,其特征在于步驟(3)所述靜電紡 的工藝參數(shù)為0.5~20.0毫升/小時,調(diào)節(jié)高壓發(fā)生器的電壓為10 45 KV, 調(diào)節(jié)接收裝置的接收距離為5.0~30.0厘米。
9. 如權(quán)利要求5或6所述制備方法,其特征在于所述親水性聚合物選自 硫酸軟骨素、肝素、瓊脂、葡聚糖、褐藻酸、改性纖維素、海藻酸、淀粉、纖 維素、明膠、纖維蛋白、絲蛋白、彈力蛋白擬態(tài)的肽聚合物、膠原蛋白、殼聚 糖、改性殼聚糖、親水性聚氨酯、聚乙二醇、聚曱基丙烯酸曱酯、聚曱基丙 烯酸曱酯、聚羥基丁酸戊酸酯、聚羥基丁酸己酸酯、聚乙烯醇或聚丙交酯的任意一種或幾種的混合物;所述疏水性聚合物選自疏水性聚氨酯、聚碳酸酯、聚 乳酸、聚已內(nèi)酯、聚乙交酯或聚對苯二曱酸乙二酯的任意一種或幾種的混合物。 所述電紡溶液的溶劑為曱酸、乙酸、乙醇、丙酮、二曱基曱酰胺、二曱基 乙酰胺、四氫呋喃、二曱基亞砜、六氟異丙醇、三氟乙醇、二氯曱烷、三氯甲 烷、甲醇、乙醇、氯仿、二噁烷、三氟乙烷、三氟乙酸、水的任意一種或它介J 的任意混合物。
10.如權(quán)利要求5或6所述的制備方法,其特征在于步驟(2 )和步驟(3 ) 重復(fù)若干次。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種具備多個功能層的納米人工硬腦膜,包含至少兩層結(jié)構(gòu),面向大腦的一層為疏水性的防粘連電紡層,背向大腦的一層為親水性的納米細(xì)胞支架層。本發(fā)明還提供了所述納米人工硬腦膜的制備方法,包括以下步驟制備疏水性聚合物的電紡溶液;制備親水性聚合物的電紡溶液;用制得的疏水性聚合物的電紡溶液通過靜電紡制成疏水性的防粘連電紡層;用制得的親水性聚合物的電紡溶液在所述防粘連電紡層上通過靜電紡制備疏水性的細(xì)胞支架層,接收為膜狀結(jié)構(gòu)得到納米仿生人工硬腦膜。本發(fā)明人工硬腦膜機(jī)械特性能滿足適應(yīng)癥對抗拉伸強度及柔韌性的要求,而且可根據(jù)需要任意裁剪,應(yīng)用前景廣闊。
文檔編號A61F2/02GK101507661SQ20091003773
公開日2009年8月19日 申請日期2009年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月10日
發(fā)明者弢 徐, 袁玉宇 申請人:廣州邁普再生醫(yī)學(xué)科技有限公司
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