專利名稱：：抗皺劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種新型的抗皺劑。更詳細(xì)地說，本發(fā)明涉及以西洋菜，杜松，白術(shù)和/或款冬來源的提取物作為有效成分的抗皺劑。另外，本發(fā)明還涉及以上述提取物作為有效成分的基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑以及皮膚松弛和皮膚彈力改善劑，以及使用上述提取物的人工皮膚制造方法，減輕皺紋的方法，皮膚松弛和皮膚彈力改善的方法。
背景技術(shù)：
：覆蓋包括人在內(nèi)的各種動(dòng)物全身的皮膚，承受著如下的變化由于日光、干燥、氧化、環(huán)境因素所致的壓力和精神壓力等的外部因子、以及老化導(dǎo)致皺紋形成、硬化、色斑、晦暗、彈性降低等。這里，對皮膚進(jìn)行大致劃分的話，可分為表皮和真皮兩層結(jié)構(gòu)。在表皮與真皮之間有一種稱為基底膜的薄薄的纖細(xì)膜層存在。表皮的代謝是通過這層基底膜，獲取真皮細(xì)胞產(chǎn)生的因子或血液供給的。皮膚中表皮的增殖與分化是通過基底膜和真皮進(jìn)行調(diào)節(jié)的。因此，借助于基底膜的表皮與真皮間的交流，對皮膚表皮的功能調(diào)節(jié)來^t，起著至關(guān)重要的作用。皮趺基底膜中存在有一種稱為錨著復(fù)合體的特殊結(jié)構(gòu)，具有穩(wěn)定表皮和真皮兩種組織間的粘連和交流的重要作用。錨著纖維復(fù)合體的蛋白質(zhì)可質(zhì)這兩者相互聯(lián)結(jié)起來。錨著纖維復(fù)合體的重要構(gòu)成成分之一就是層粘連蛋白-5(Rousselleetal.，JCellBiol.1991Aug;114(3):567-76)。迄今為止的研究揭示了造成所謂Herlitz交界型大皰性表皮松解癥這樣的重度水皰病的先天性遺傳疾病的原因是由于編碼層粘連蛋白-5三條肽鏈的基因的遺傳學(xué)變異。(Aberdametal"NatGenet.1994Mar;6(3):299-304)。明層粘連蛋白-5是表皮粘連所不可或缺的物質(zhì)。而且已知該粘連蛋白-5會(huì)形成錨絲(anchoringfilament),進(jìn)而與已知作為層粘連蛋白-5受體的整聯(lián)蛋白ct6(34(半橋粒中存在的跨膜型整聯(lián)蛋白)發(fā)生結(jié)合(Niessenetal.，ExpCellRes.1994Apr;211(2):360-7)。有報(bào)道指出，層粘連蛋白-5不僅直接結(jié)合形成連接真皮乳頭層錨著纖維的VII型膠原蛋白，而且還同其它的層粘連蛋白-6或-7—起形成復(fù)合體，該復(fù)合體通過巢蛋白與基底膜骨架IV型膠原蛋白結(jié)合。有報(bào)告指出，觀察到構(gòu)成上述復(fù)合體的IV型膠原蛋白的表達(dá)水平會(huì)隨著年齡老化而降低(VazquezFetal.，Maturitas1996，25:209-215)，關(guān)于層粘連蛋白-5結(jié)合的VII型膠原蛋白，來源于高齡者的皮膚成纖維細(xì)胞比來源于年輕人的皮膚成纖維細(xì)胞，其蛋白質(zhì)水平以及mRNA水平的生成能力都有下降(Chenetal.，J.Invest.Dermatol"102:205-209，1994)。也有報(bào)道指出,由VII型膠原蛋白構(gòu)成的錨著纖維在正常皮膚中也會(huì)伴隨著生理老化和光老化而減少(辻卓夫，日皮會(huì)誌105:963-975，1995，Tidmanetal.,J.InvestDermatol.，83:448-453,1984)。除了它們的種種的構(gòu)成成分特征之外，已知基底膜本身伴隨著皮膚老化也會(huì)出現(xiàn)多層化、分解斷裂等等結(jié)構(gòu)(lavkeretal.，J，InvestDermatol.197973:59-66)，并且認(rèn)為這種結(jié)構(gòu)變化的結(jié)果造成了皺紋、松弛等老化特征的出現(xiàn)，以及伴隨老化的皮膚功能低下。為此，促進(jìn)構(gòu)成基底膜骨架的層粘連蛋白-5、IV型以及VII型膠原蛋白的生成本身，對于保持良好的基底膜構(gòu)造狀態(tài)和防止皮膚老化是極其重要的。事實(shí)上有才艮道指出，對皮膚基底膜構(gòu)造進(jìn)行詳細(xì)觀察時(shí)，以二十歲后期到三十歲早期為對象進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)基底膜損傷發(fā)生頻率是較高，說明基底膜構(gòu)造變化在誘導(dǎo)皮膚老化中具有重要的作用(IFSCCMagazine,20004(4):15-23)。為防止皮趺老化，主要問題之一就是抗皺。而且，皺紋大致分類為皮溝較淺的"表皮皺紋"(小皺紋)和皮溝較深的"真皮皺紋，，(大皺紋)，然而，特別是真皮皺紋隨著基底膜的變化，會(huì)發(fā)生真皮層的變性和塌陷，因此，鑒于這一原因，基底膜的維護(hù)被認(rèn)為是很重要的。進(jìn)而，除上述基底膜的構(gòu)成成分之外，真皮中大量存在的I型和III型膠原蛋白(大約分別為80%和15%),由于隨著年齡老化在真皮中的絕對值有所減少，所以認(rèn)為它們的變化很可能同真皮彈性以及皮膚彈力的減少、皺紋、或者真皮的萎縮有4艮密切的關(guān)系。我們對III型膠原蛋白進(jìn)行了調(diào)查，在胚胎的幼兒組織中III型^^、蛋白的比例要高于成人組織的比率，在鈹紋明顯的Ehlers-Danlos綜合征IV型的病人組織中未發(fā)現(xiàn)III型膠原蛋白的存在，因此認(rèn)為構(gòu)成正常的柔軟皮膚時(shí)III型膠原蛋白可能是一種很重要成分。而且，真皮中的I型和III型膠原蛋白是由成纖維細(xì)胞合成的。如果在膠原蛋白中培養(yǎng)這種成纖維細(xì)胞，則膠原蛋白出現(xiàn)收縮。收縮的^f、蛋白的纖維密度與真皮中的纖維密度值很接近。這是由于成纖維細(xì)胞使得膠原蛋白纖維靠近所生成的現(xiàn)象。在實(shí)際的真皮中，可以認(rèn)為，成纖維細(xì)胞通過使得膠原蛋白纖維充分緊密接近來保持皮膚彈力的。可以說，為維持抗鈹、改善皮膚松弛和皮膚彈力等的皮膚恒常性，除基底膜外，真皮的功能維持也4艮重要。至今為止，從維持皮膚恒常性的觀點(diǎn)出發(fā)，已經(jīng)提出專利申請的包括具有增強(qiáng)基底膜主要成分層粘連蛋白-5的生成能力的大豆來源的調(diào)制品和溶血磷脂酰膽喊、溶血磷脂酸，以及巽粟科屬(Bacconia屬)、四棱豆屬(Psophoca卬us)、決明屬(Cassia)和百金花屬(Erythraea)植物的提取物(特開平11-343226號(hào)、特開2000-226308號(hào)、以及特開2003-313135號(hào)公凈艮)。同樣，已知的III型、IV型、VII型膠原蛋白生成促進(jìn)劑有大豆、日本山毛櫸的樹芽、葛根、歐洲常春藤、山毛櫸科山毛櫸屬植物的提取物等各種植物來源的提取物(特開2001-39849號(hào)、特開2004-18471號(hào)、特開2004-75661號(hào)等)。但是，既促il&底膜重要構(gòu)成成分層粘連蛋白-5、IV型、VII型膠原蛋白，又促進(jìn)真皮的重要構(gòu)成成分III型^^蛋白生成的促進(jìn)物質(zhì)只有葛根提取物(特開2001-39849號(hào)、特開2003-137767號(hào)和特開2004-18471號(hào)),
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及^l:供一種新型的抗鈹劑。本發(fā)明人特別是為達(dá)到針對真皮抗皺的目的，對各種植物提取物進(jìn)行了深入的研究，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)，西洋菜、杜松、白術(shù)、款冬能顯著促進(jìn)基底膜的重要構(gòu)成要素層粘連蛋白-5、IV型膠原蛋白、VII型膠原蛋白，以及真皮的重要構(gòu)成成分III型膠原蛋白的生成，而且在應(yīng)用于皮膚的情況下，發(fā)現(xiàn)其具有防止皮膚老化作用、特別是抗鈹作用和皮膚N^弛與皮膚彈力的改善作用。同時(shí)，發(fā)現(xiàn)上述的提取物中的杜木>、白術(shù)、款冬具有抗炎作用和創(chuàng)傷愈合作用。迄今，尚未報(bào)道過上述植物提取物促進(jìn)包括層粘連蛋白-5在內(nèi)的細(xì)胞外基質(zhì)生成的促進(jìn)作用，以及在皮膚老化過程中的抗鈹作用。西洋菜(學(xué)名NasturtiumofficinalisR.Brown):作為一種十字花科植物的西洋菜的提取物，已知具有活血作用(特開2001-181120)，并由于促進(jìn)生成血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子而被用作育發(fā)產(chǎn)品(特開2003-313113)。但是并不知道其對于皮膚老化的作用。4i松(學(xué)名JuniperusoxycedrusLinne):作為一種柏科植物的^M^的提取物，已知具有改善皮膚干糙等的皮膚屏障功能的效果(特開2001-288066)，但是并不知道關(guān)于皮膚老化、抗皺、皮膚松弛和皮膚彈力的改善作用。另外，這里所說的改善皮膚屏障功能效果是針對角質(zhì)層而言的，并不涉及對角質(zhì)層以下的真皮等的效果。白術(shù)(學(xué)名Atractylodesmacrocephale):作為一種菊科植物的白術(shù)的提取物，已知有抗皮膚千糙的作用(特開2003-194809)、抗白發(fā)作用(特開2004-161639)，但是并不知道關(guān)于皮膚老化、抗皺、皮膚松弛和皮膚彈力的改善作用?？疃?學(xué)名TussilagofarfaraLinne):作為一種菊科植物的款冬的提取物，已知有抑制光毒性效果、可例舉出防止UVA照射大氣污染物質(zhì)產(chǎn)生的產(chǎn)物所導(dǎo)致的老化的作用(特開2002-12548)，但是并不知道對于主要由UVB照射引起的皺紋的預(yù)防/改善作用以及皮膚松弛和皮膚彈力的改善作用。因此，本發(fā)明提供，含有西洋菜、衫々〉、白術(shù)以及款冬提取物中的至少任意一種作為有效成分而形成的抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑、皮膚松弛和皮膚彈力改善劑，以及使用上述提取物的人工皮膚的制造方法、為皺紋減輕以及改善皮膚松弛和皮膚彈力的美容方法。本發(fā)明涉及的抗皺劑，通過含有西洋菜、杜松、白術(shù)、款冬提取物，促進(jìn)基底膜重要構(gòu)成成分層粘連蛋白-5、IV型膠原蛋白、VII型膠原蛋白，以及作為真皮重要構(gòu)成成分的III型膠原蛋白等的細(xì)胞外基質(zhì)的生成。此外，通過促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的生成，修復(fù)基底膜和真皮，使得創(chuàng)傷愈合，實(shí)現(xiàn)減少皮膚水分蒸發(fā)量、增加皮膚粘彈性等的皮膚狀態(tài)向正常轉(zhuǎn)化、或者實(shí)現(xiàn)減少皺紋數(shù)目及其長度的抗鈹作用。雖然確切的機(jī)理還不清楚，但是皮的修復(fù)與穩(wěn)定的結(jié)果。因此，上述的提取物也能改善基底膜細(xì)胞的松解、基底膜從表皮的剝離、VII型膠原蛋白的異常等、由于基底膜不穩(wěn)定所導(dǎo)致的表皮水皰病的癥狀改善。另外，本申請發(fā)明最獨(dú)特的效果是上述所有的提取物不是單一地促進(jìn)層粘連蛋白-5、III型、IV型膠原蛋白以及VII型膠原蛋白的某一種，而是促進(jìn)它們所有的生成。具體實(shí)施方式抗皺劑本發(fā)明的抗皺劑是以西洋菜、杜松、白術(shù)和/或款冬的提取物作為有效成分的。本說明書中使用的"抗皺"意思是指，在后述的"防止皮膚老化作用，，中，防止和/或改善皮膚皺紋的作用，特別是減輕皮膚皺紋的數(shù)目和長度，但是有時(shí)與"防止皮膚老化作用"同義使用。另外，通過本發(fā)明所改善/防止的"鈹紋"特指基底膜變化導(dǎo)致的真皮層塌陷生成的皮溝較較深的真皮皺紋。這些作用可以考慮例如，依據(jù)視覺感官判定的角質(zhì)改善、皮膚水分量增加、皮膚彈性增加等的要因進(jìn)行判斷。本發(fā)明所實(shí)現(xiàn)的上述作用，雖然祐:認(rèn)為是通過西洋菜、杜松、白術(shù)和款冬來源的提取物增加層粘連蛋白-5、III型、IV型或VII型膠原蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)的生成量，由此4吏基底膜和真皮穩(wěn)定，并改善皮趺的恒常性的，但是明確的機(jī)理還不清楚。鑒于此，通過本發(fā)明的抗皺劑所獲得的抗鈹作用并不僅僅是限于細(xì)胞外基質(zhì)生成量的增加所導(dǎo)致的結(jié)果。此外，已知款冬提取物具有預(yù)防/改善UVA輻射所產(chǎn)生的皮膚老化或者皺紋產(chǎn)生的作用(特開2002-12548)，但是并不知道對于主要由UVB引起的皺紋的預(yù)防/改善作用。本說明書中使用的"防止皮膚老化作用，，是指，防止和改善伴隨年齡老化或光老化51起的基底膜構(gòu)造變化的積累所導(dǎo)致的皮膚功能降低，具體的是皮膚的皺紋、松弛、硬化等，維持具有彈力的年輕健康的皮膚狀態(tài)。基底膜穩(wěn)定劑本發(fā)明提供以西洋菜、杜松、白術(shù)和款冬來源的提取物中至少任意一種作為有效成分的基底膜穩(wěn)定劑。這里，本說明書中使用的"基底膜穩(wěn)定化"的含義是指，對于存在于表皮與真皮之間的，與維持皮膚恒常性密切相關(guān)的基底膜，穩(wěn)定其骨架，進(jìn)而進(jìn)行修復(fù)。更具體地講，就是通過促進(jìn)構(gòu)成基底膜的重要成分，特別是細(xì)胞外基質(zhì)的生成，對基底膜產(chǎn)生的全部作用。細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑本發(fā)明還提供，以上述提取物中的至少任意一種作為有效成分的細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑。這里，本說明書中使用的"細(xì)胞外基質(zhì)，，的含義是指，為所屬行業(yè)中所公認(rèn)的，特別是包含層粘連蛋白-5、IV型或VII型膠原蛋白在內(nèi)的基底膜中的重要構(gòu)成成分，以及III型膠原蛋白等真皮的重要構(gòu)成成分。皮膚松弛、皮膚彈力的改善劑本發(fā)明還提供，以上述提取物中的至少任意一種作為有效成分的皮膚松弛、皮膚彈力改善劑。這里，本說明書中使用的"皮膚松弛、皮膚彈力的改善，，的含義是指，通過提高皮膚彈性和收緊皮膚來改善由干燥、紫外線等外界刺激、老化導(dǎo)致的皮膚松弛和皮膚彈力。例如，，能夠通過體外試驗(yàn)的膠原蛋白凝膠的收縮促進(jìn)作用等進(jìn)行評價(jià)，通過活體試驗(yàn)的皮膚粘彈性等進(jìn)行評價(jià)。此外，上述提取物除具有抗鈹作用、基底膜穩(wěn)定作用、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)作用、皮膚松弛和皮膚彈力改善作用以a原蛋白凝膠收縮促進(jìn)作用之外，還具有抗炎作用和傷口愈合作用。但是，上所迷所有這些的作用的確切機(jī)理尚不清楚。本說明書中使用的"抗炎作用"以及"創(chuàng)傷愈合促進(jìn)作用"是指，將本發(fā)明的植物提取物應(yīng)用于各種炎癥部位以及創(chuàng)傷部位的情況下，同非4吏用部位相比較而言進(jìn)行相對確定的。利用本發(fā)明所得到的創(chuàng)傷愈合促進(jìn)作用包括促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)生成所產(chǎn)生的結(jié)果，穩(wěn)定以及修復(fù)基底膜所產(chǎn)生的結(jié)果。但是，該作用并不限于細(xì)胞外基質(zhì)生成增加所引起的。此外，本發(fā)明中使用的提取物中，已經(jīng)報(bào)道了西洋菜提取物有創(chuàng)傷愈合效果(特開2003-313134)。除上述抗炎作用和創(chuàng)傷愈合作用外，本發(fā)明使用的植物提取物也具有表皮水皰病的改善作用。這里，本說明書中使用的"表皮水皰病的改善作用，，的意思是指，不僅可以緩和、治療被分類為單純型表皮水皰病、接合型表皮水皰病以及營養(yǎng)失養(yǎng)型表皮水皰病的常見表皮水皰病，而且還可以預(yù)防該疾病的癥狀。該作用是通過促進(jìn)基底膜的重要構(gòu)成成分膠原蛋白等的生成，從而穩(wěn)定基底膜構(gòu)造而帶來的。本發(fā)明中使用的植物提取物來源于西洋菜、杜松、白術(shù)和款冬。從草本植物西洋菜、杜松、白術(shù)和款冬各植物的根、葉、莖、花等提取，從木本植物杜松的根、芽、樹皮、果實(shí)、葉、花等部位提取。提取方法可以采用溶劑提取法，用溶劑提取時(shí)，根據(jù)需要對植物材料進(jìn)行干燥，而且根據(jù)需要將植物材料切碎或粉碎后，用水性提取劑，例如冷水、溫水、或者沸水或較沸點(diǎn)溫度稍低的熱水；或者用有機(jī)溶劑，例如曱醇、乙醇、1，3-丁二醇，乙醚等在常溫或者加熱條件下進(jìn)行提取。但是，提取方法不限于溶劑提取，所在行業(yè)內(nèi)已知的常用方法都可以使用。上述提取物的形態(tài)不僅包括提取液本身，還包括采用常用方法進(jìn)行適當(dāng)稀釋或者濃縮、或者干燥后的形態(tài)。本發(fā)明的抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚松弛和皮膚彈力改善劑可以單獨(dú)地含有各提取物，或者組合含有多種的提取物。作為其它的形式，本發(fā)明的抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚爭^弛和皮膚彈力改善劑，有時(shí)進(jìn)一步含有絲氨酸蛋白酶抑制劑而構(gòu)成。如后述實(shí)施例所記栽的那樣，本發(fā)明的抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚松弛和皮膚彈力改善劑，通過進(jìn)一步含有絲氨酸蛋白酶抑制劑，能抑制膠原蛋白的分解，佳羞底膜和真皮保持更良好的狀態(tài)。其結(jié)果是，利用本發(fā)明獲得的抗鈹作用、皮膚松弛和皮膚彈力的改善作用、創(chuàng)傷愈合促進(jìn)作用、表皮水皰病的改善作用等都將會(huì)有良好的效果。作為該絲氨酸蛋白抑制劑，并沒有限定，可以例舉，歐薄荷、鹿蹄草、小連翹、魚腥草、山金車、木瓜、山楂、旋果蚊子草、西洋玫瑰、野薔薇、葡萄、牡丹、蛇麻、覆盆子、羅馬甘菊的提取物，這些也都可以按照上述的西洋菜等的提取方法，同樣采用溶劑提取等進(jìn)行提取。此外，上述的絲氨酸蛋白酶抑制劑也包括抑肽酶、凝血酸、S-氨基己酸等。本發(fā)明使用的上述提取物，按照能夠?qū)崿F(xiàn)防止皮膚老化作用、特別是抗鈹作用以及皮膚松弛和皮膚彈力改善作用所必需的量，或者按照能夠?qū)崿F(xiàn)基底膜和真皮的穩(wěn)定或者層粘連蛋白-5、III型、VI型或VII型膠原蛋白等的細(xì)胞外基質(zhì)生成量增加所需的量進(jìn)行配合。此外，根據(jù)增加角質(zhì)或者透皮水分含量增加(改善干糙)、增加皮膚彈性、改善皮膚紋理等的目的進(jìn)行相應(yīng)量的配合，而且該配合量也可依據(jù)配合劑型等的各種因素而有所變化。對配合量沒有任何限制，但是上述提取物的配合量，相對于抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚松弛和皮膚彈力改善劑的總質(zhì)量而言，為0.0001-10質(zhì)量％的濃度，最優(yōu)選為0.001-1質(zhì)量％的濃度。本發(fā)明的抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚松弛和皮膚彈力改善劑中，除上述"^取物外，在不影響抗鈹作用等的范圍內(nèi)，也可以根據(jù)需要適當(dāng)配合一般化妝品和醫(yī)藥品中可以配合的成分，例如，液態(tài)油脂、固體油脂、蠟、碳水化合物、高級(jí)脂肪酸、高級(jí)醇、酯類、硅油類、陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性表面活性劑、非離子表面活性劑、保濕劑、水溶性高分子化合物、增粘劑、成膜劑、紫外線吸收劑、金屬離子螯合劑、低級(jí)醇、多元醇、糖類、氨基酸類、有機(jī)胺類、pH調(diào)節(jié)劑、皮膚營養(yǎng)劑、維生素類、防氧化劑、香料、粉末、色素材料、水等。另外，也可以適當(dāng)配合L-抗壞血酸及其鹽、L-抗壞血酸磷酸酯、L-抗壞血酸硫酸酯等的L-抗壞血酸的酯衍生物及其鹽；L-抗壞血酸葡萄糖苷等的L-抗壞血酸的配糖體及其鹽；4-甲氧基水楊酸等的烷氧基水楊酸及其鹽；對苯二酚P-D-葡萄糖、對苯二酴a-D-葡萄糖等的對苯二酚配糖體及其鹽；凝血酸、凝血酸甲酰胺鹽酸鹽等的凝血酸衍生物；4-正丁基間苯二酚等的間苯二酚衍生物；曲酸、鞣花酸、亞油酸、洋甘菊提取物、視黃酸、視黃醇、視黃醇醋酸酯、視黃醇棕櫚酸酯、甘草酸及其衍生物等；溶血磷脂酰膽堿和溶血礴脂酸、大豆調(diào)制品等的層粘連蛋白-5生成促進(jìn)劑；葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖等的糖類；煙酸千酯、煙酸P-丁氡基乙酯、辣椒素、姜酮、斑蝥酊、魚石脂、咖啡因、單寧酸、cc-冰片、煙酸生育酚酯、六煙酸肌醇酯、環(huán)扁桃酯、桂利喚、妥拉唑林、乙酰膽喊、維拉帕米、千金幕喊、Y-谷維醇等的活血?jiǎng)幌趸?、噢嗯素等的抗脂溢劑；從多樣的目的出發(fā)，可適當(dāng)配合檜;^充醇、秀尾提取物、兒茶鉤M取物、尿囊素、,薈提取物、鹿蹄草提取物、百里香提取物、姜黃提取物、黃柏提取物、黃連提取物、小連翹提取物、刺芒柄花拔:取物、水解酪蛋白、水解酵母提取液、葛根提取物、木糖醇、苦參提取物、大米提取物的水解液、柴胡提取物、藏紅花提取物、氧化鋅、四棱豆提取物、紫草41取物、芍藥提取物、生姜提取物、包覆了二氧化硅的氧化鋅、鼠尾草提取物、錦g取物、川芎提取物、當(dāng)藥提取物、陳皮提取物、辣椒提取物、當(dāng)歸提取物、桃仁提取物、疏代?；撬?、人M取物、大蒜提取物、射干提取物、亞牛磺酸、樺樹提取物、枇杷提取物、葡萄提取物、山毛櫸樹芽提取物、絲瓜提取物、牛至提取物、百合提取物、薏苡仁提取物、迷迭香^:取物、精氨酸及其鹽酸鹽、絲氨酸及其鹽酸鹽等氨基酸及其衍生物；泛酸铞、D-泛醇、泛醇乙醚、乙酰泛醇乙醚等的泛酸類；麥角鈣化醇、膽鉤化醇等的維生素D類；煙酸、煙酸酰胺、煙酸節(jié)酯等的煙酸類；a-生育盼、生育盼醋酸酯、DL-cc-生育酚煙酸酯、DL-ct-生育酚琥珀酸酯等的維生素E類、維生素K、維生素P、生物素等的維生素類；泛醌等的輔酶等。本發(fā)明的抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚松弛和皮膚彈力改善劑的劑型沒有特殊的限制，可以制成，溶液體系、可溶化體系、乳化體系、粉末M體系、水-油xM目體系、水-油-粉末三相體系、軟青、凝膠、氣霧劑等的任何劑型。另外，使用形態(tài)也沒有特殊的限制，可以使用化妝水、乳液、霜?jiǎng)?、精華液、啫哩、凝膠、軟膏、面膜、粉底等的任何形態(tài)。皮膚外用劑進(jìn)而，本發(fā)明提供含有上述提取物形成的皮膚外用劑。這里，本發(fā)明的皮膚外用劑是指，以抗鈹作用和皮膚松弛與皮膚彈力改進(jìn)作用之外的防止皮膚老化作用、抗炎作用、創(chuàng)傷愈合促進(jìn)作用、表皮水皰病改善作用等為目的使用的外用劑。但是，本發(fā)明的皮膚外用劑并不僅限于上述目的，還包括有意利用上述提取物的細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)作用試圖進(jìn)行皮膚的各種癥狀的改善。本發(fā)明的皮膚外用劑可以配合的物質(zhì)同上述的抗皺劑等一樣，但是可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員所希望的目的來決定適合的種類、數(shù)量、濃度等。例如，以抗炎作用和創(chuàng)傷愈合作用為目的的情況下，上述提取物相對于皮膚外用劑總質(zhì)量的配合濃度為0.0001-10質(zhì)量％，優(yōu)選的配合濃度為0.001-1質(zhì)量％?？蛊聞?、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚松弛和皮膚彈力改善劑的制造方法。在另一方式中，本發(fā)明提供包括添加西洋菜、杜松、白術(shù)和款冬來源的提取物到7jc相或者油相的工序的抗皺劑、基底膜穩(wěn)定劑、細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑或者皮膚松弛和皮膚彈力改善劑的制造方法。該方法也可以適用于上述的皮膚外用劑。人工皮膚的制造方法進(jìn)而，本發(fā)明提供人工皮膚的制造方法，其特征在于，將西洋菜、杜松、白術(shù)和款冬的提取物中的至少任意一種添加到人工皮膚形成培養(yǎng)基中。本發(fā)明中用于人工皮膚制造的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，可以使用以前用于人工皮膚制造的任意培養(yǎng)基，作為這些培養(yǎng)基可以例舉出，含10%胎牛血清的Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基(DMEM培養(yǎng)基)；含10%胎牛血清、轉(zhuǎn)鐵蛋白5yg/ml、胰島素5pg/ml、三硪曱狀腺原氨酸2nM、霍亂毒素O.lnM、氬化可的松0.4|ag/ml的DMEM-Ham，sF12(3:l)培養(yǎng)基；角質(zhì)形成細(xì)胞生長培養(yǎng)基(KGM)和含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基的1:1混合培養(yǎng)基等。在這些培養(yǎng)基中添加的上述提取物，依據(jù)種類各有不同，但大約為0.001質(zhì)量％-1質(zhì)量％的程度。除該提取物以外，抗皺劑的形態(tài)中使用的各種物質(zhì)也可以一同添加進(jìn)去，特別是上述的絲氨酸蛋白酶抑制劑，為了抑制膠原蛋白的分解、穩(wěn)定基底膜，被認(rèn)為是優(yōu)選的物質(zhì)。在本發(fā)明的人工皮膚制造中，首先將含有人成纖維細(xì)胞的收縮I型膠原蛋白放置在金屬網(wǎng)上。含有人成纖維細(xì)胞的收縮I型^^、蛋白可以按如下進(jìn)行調(diào)制。在水上制備好成纖維細(xì)胞的膠原蛋白懸液后，皮氏培養(yǎng)i上使膠原蛋白凝膠化而進(jìn)行制備。然后，從皮氏培養(yǎng)臟上將膠原蛋白寧膠剝離，將膠原蛋白》t^二氧化碳孵箱使其收縮。接下來，在上述的膠原蛋白凝膠上培養(yǎng)表皮細(xì)胞，例如人正常表皮的表皮形成細(xì)胞，形成表皮。通過培養(yǎng)皮膚細(xì)胞來形成表皮可如下進(jìn)行。將收縮的膠原蛋白凝膠放置在金屬網(wǎng)上，接著將玻璃環(huán)狀物放置在該凝膠上。在該玻璃環(huán)內(nèi)加/VA包皮來源的表皮形成細(xì)胞懸液并使液體不外漏。在二氧化碳孵箱中使表皮形成細(xì)胞附著，移走玻璃環(huán)。表皮層長滿上述培養(yǎng)基表面后，將表皮層暴露于空氣中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，以形成角質(zhì)層。按照這種方法可以獲得，在含有成纖維細(xì)胞的收縮I型膠原蛋白皿構(gòu)成的真皮層和表皮層之間有充足沉淀了基底膜成分的，與自然皮膚接近的人工皮膚。本發(fā)明使用的上述提取物不僅是在表皮細(xì)胞接種后的幾天時(shí)間內(nèi)，在交換培養(yǎng)基時(shí)^L加入到新鮮培養(yǎng)基中，而且并不只限定于這個(gè)時(shí)期，可以根據(jù)需要適量添加。減輕皺紋的方法和皮膚*>弛與皮膚彈力的改善方法在另一方式中，本發(fā)明提供美容方法，其特征是，通過在皮膚上使用西洋菜、松&、白術(shù)和款冬提取物中的至少任意一種，來減輕缺紋，改善皮膚松弛和皮膚彈力。而且該方法不僅可以減輕皺紋，改善皮膚松弛與皮膚彈力，還可以用于上述的細(xì)胞外基質(zhì)的生成促進(jìn)，進(jìn)一步用于需要基底膜以及真皮穩(wěn)定的各種皮膚癥狀，例如在表皮水皰病的改善中使用。在該方法中，上述提取物所應(yīng)用的對象通常是哺乳動(dòng)物，特別是適用于人類。實(shí)施例以下，列舉實(shí)施例來更詳細(xì)地說明本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)方法-lJ關(guān)于層粘連蛋白-5生成促進(jìn)效果的試驗(yàn)方法(1)表皮角質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)表皮角質(zhì)細(xì)胞由人包皮分離而來，并在低濃度铞的表皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(KGM)中培養(yǎng)。向該培養(yǎng)基中加入牛腦下垂⑩取液和EGF。細(xì)胞在KGM中繼代培養(yǎng)4代后，經(jīng)胰蛋白酶-EDTA處理后懸浮附著細(xì)胞，過濾去除細(xì)胞團(tuán)塊，獲得均一的細(xì)胞懸液。離心分離收集細(xì)胞，按照8xl04/ml的密度再懸浮在DMEM-F12(2:1)-0.1%BSA培養(yǎng)基中。將0.5ml該細(xì)胞懸液，加入到含有2倍藥物濃度的相同培養(yǎng)基0.51111中。培養(yǎng)使用24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，37C進(jìn)行24小時(shí)培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束后，將上清液移入Eppendroff管中，10000rpm、5分鐘離心分離，將上清液轉(zhuǎn)移至一支新管中，直到層粘連蛋白-5的測定日都保存在-:zo。c。此外，為溶解出細(xì)胞內(nèi)部和培養(yǎng)塑料容器上結(jié)合的層粘連蛋白-5,向各孔中加入含有各種表面活性劑的Tris鹽酸緩沖液(pH7.4)，誦20。C過夜保存。第二天，進(jìn)行超聲波處理，再度冷凍。次日，再溶解后，10000rpm、5分鐘離心分離，將上清液轉(zhuǎn)移至管中，直到層粘連蛋白-5的測定日都保存在-20匸。(2)層粘連蛋白-5的夾心ELISA法測定采用夾心ELISA法測定培養(yǎng)上清、細(xì)胞層中存在的層粘連蛋白-5。96孔ELISA板的固相表面包被上抗層粘連蛋白-5的層粘連蛋白o(hù)c3鏈的單克隆抗體BM165。為使用夾心法測定層粘連蛋白-5,將另外一種抗體，即抗層粘連蛋白P3鏈的單克隆抗體6F12預(yù)先進(jìn)行生物素標(biāo)記(b-6F12)。本方法，僅能測定具有功能的異源三聚體(cx3P3y2)，不能檢測異源二聚體(P3y2)。在預(yù)先加有含b-6F12的3。/。明膠磷酸緩沖液的各孔中加入樣品?？變?nèi)樣品的最終稀釋率為，培養(yǎng)液1/4，細(xì)胞層1/10?？乖贵w在37C反應(yīng)2小時(shí)，沖洗培養(yǎng)板后添加生物素hrp(辣根過氧化物酶)溶液，進(jìn)一步反應(yīng)30分鐘到1小時(shí)。沖洗后，加入hrp底物ABTS溶液，用ELISA板讀數(shù)儀讀取405nm吸光度。在0~40ng/ml濃度范圍內(nèi)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。層粘連蛋白-5的生成量按照培養(yǎng)基中的游離量和細(xì)胞層的殘留量的總和進(jìn)行計(jì)算，用相對未添加植物提取物的樣品(對照)的相對比值進(jìn)行表示。如表1所示，給出了各提取物的層粘連蛋白-5生成量的增長率。表l(結(jié)果-l)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實(shí)驗(yàn)方法-2關(guān)于IV型膠原蛋白、VII型膠原蛋白生成促進(jìn)效果的試驗(yàn)方法(1)人成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)將在含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞播種于24孔板，細(xì)胞附著后，用含有0.25%FBS和250|iM抗壞血酸葡萄糖苷的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)基交換，加入測試藥物。培養(yǎng)一天后，回收上清，離心分離，測定所得上清中的IV型、VII型膠原蛋白，并測定細(xì)胞的DNA量，作為細(xì)胞數(shù)目的指標(biāo)。(2)DNA的定量DNA量的測定采用Hoechst公司的H33342進(jìn)行熒光測定法的測定。(3)用夾心ELISA法測定IV型、VII型膠原蛋白IV型、VII型M^、蛋白用夾心ELISA法進(jìn)行測定。本實(shí)施例中使用的抗體如下所示。-IV型膠原蛋白特異性抗體；單克隆抗體JK-199和多克隆抗體MO國S-CLIV-VII型膠原蛋白特異性抗體；單克隆抗體NP-185和單克隆抗體NP-32將單位未添加測試藥物的樣品(對照)DNA的IV型、VII型膠原蛋白量為100時(shí)，單位測試藥物樣品DNA的IV型、VII型膠原蛋白量作為IV型、VII型膠原蛋白量生成促進(jìn)率。如表2所示，給出了對應(yīng)的^f、蛋白生成促進(jìn)率。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>[實(shí)驗(yàn)方法-3III型膠原蛋白生成促進(jìn)效果的試驗(yàn)方法(1)人成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)將在含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞播種于24孔板，細(xì)胞附著后，用含有0.25%FBS和250fiM抗壞血酸磷酸鎂的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)基交換，加入測試藥物。培養(yǎng)三天后，回收培養(yǎng)基上清，離心分離，測定所得上清中的III型膠原蛋白，并測定細(xì)胞的DNA量，作為細(xì)胞數(shù)目的指標(biāo)。(2)DNA的定量DNA量的測定采用Hoechst公司的H33342進(jìn)行熒光測定法的測定。(3)III型膠原蛋白的測定細(xì)胞中III型膠原蛋白的生物合成能力的評價(jià)方法是測定培養(yǎng)上清中分泌的III型膠原蛋白的末端肽(ProcollagentypeIII-peptide:簡稱為PIIIP)的含量。具體地講就是，用"RIA-gnostPllIP(PIIIP)測定試劑盒(CIS.Diagnostic公司產(chǎn)品)，，進(jìn)行測定。III型膠原蛋白生成量表示為，相對DNA量的比值，和相對未添加植物提取物的樣品(對照)的相對值(參照表3)。表3(結(jié)果-3)樣品濃度(％)相對無添加對照和相對DNA比的III型膠原蛋白生成量(％)西洋菜提取物0.0011170.01124從以上的結(jié)果看出，西洋菜提取物的III型膠原蛋白的生成促進(jìn)作用具有有意差。[實(shí)驗(yàn)方法-41用人皮膚成纖維細(xì)胞評價(jià)I型膠原蛋白凝膠收縮能力的方法在冰上制備好成纖維細(xì)胞(5x104cell/ml)的膠原蛋白懸液(使用高研林式會(huì)社生產(chǎn)的I型l^f、蛋白)后，37匸下進(jìn)行膠原蛋白的凝膠化。然后，加入待測物(對照使用DMSO)和含(K25。/oFBS的DMEM培養(yǎng)基，從玻璃皿的壁上將凝膠剝落下來，使膠原蛋白發(fā)生收縮(各組11=3)。1、2天后，從三個(gè)方向測量膠原蛋白的直徑，求平均值。收縮前的直徑設(shè)為收縮率定為0%，求待測物加入后的收縮率(參照表4)。表4(結(jié)果-4)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>從以上結(jié)果看出，西洋菜提取物對膠原蛋白凝膠收縮促進(jìn)作用具有有意差。實(shí)驗(yàn)方法-5人工皮膚的制造方法膠原蛋白凝膠，在冰上制備好人真皮來源的成纖維細(xì)胞(1x105cells/ml)的膠原蛋白懸液后，加入到60mm皮氏培養(yǎng)臟中37。C下進(jìn)行膠原蛋白的凝膠化。然后從玻璃皿的壁上將凝膠剝落下來，將膠原蛋白凝膠放置在金屬網(wǎng)上，接下來在凝膠上放置一個(gè)玻璃環(huán)狀物(內(nèi)徑Umm)。加入含人包皮來源的表皮形成細(xì)胞懸液的KGM-DMEM(1:1)的混合培養(yǎng)基并使得其不會(huì)從玻璃環(huán)內(nèi)漏出。過夜孵育，使表皮細(xì)胞附著，第二天拿走玻璃環(huán)。表皮層長滿上述培養(yǎng)基表面后，將表皮層暴露于空氣中，制備成顯示角質(zhì)形成過程的具有多層細(xì)胞表皮的皮膚模型。從播種表皮細(xì)胞后的第4天起，交換含有(1)無測試藥物添加、(2)0.3。/。西洋菜提取物、(3)0.3%西洋菜提取物+0.5%歐薄荷提取物、(4)0.3%杜松油、(5)0.3%杜松油+0.5%鹿蹄草提取物、(6)0.3%白術(shù)提取物、(7)0.3%白術(shù)提取物+0.5%小連翹提取物、(8)0.3%款冬提取物、(9)0.3%款冬提取物+0.5%魚腥草提取物的培養(yǎng)基。之后每隔2-3天交換含有測試藥物種類和濃度一樣的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)2周。形成的人工皮膚用蘇木精-伊紅染色法以及免疫染色法(抗IV型膠原蛋白抗體和抗VII型M^、蛋白抗體)進(jìn)行染色。IV型以及VII型^^蛋白的染色程度按照從低到高的順序進(jìn)行5階段的1-5點(diǎn)評分。如表5所示，給出了膠原蛋白染色程度的點(diǎn)數(shù)。表5(結(jié)果-5)IV型膠原蛋白的染色程度VII型膠原蛋白的染色程度(1)21(2)54(3)55(4)33(5)45(6)43(7)55(8)33(9)44如上所述，對照(1)中，IV型膠原蛋白著色較弱，而VII型膠原蛋白基本觀察不到。與此相對，在人工皮膚模型中可以看到，有層粘連蛋白-5、IV型膠原蛋白和VII型膠原蛋白生成促進(jìn)作用的西洋茱、杜松、白術(shù)和款冬都可以提高IV型和VII型膠原蛋白的著色性能。而且表明，作為絲氨酸蛋白酶抑制劑的歐薄荷、鹿蹄草、小連翹、魚腥草的提取物也能進(jìn)一步提高其著色性能。[實(shí)驗(yàn)方法-6在30-45歲的健康男性3名的皮膚上，分別涂抹西洋菜、杜松、白術(shù)和款冬的提取物，測定其角質(zhì)層水分含量，并與對照部位進(jìn)行比較。對照使用離子交換水。對每位測試者的前臂內(nèi)側(cè)2.5cm見方的正方形區(qū)域內(nèi)進(jìn)行涂抹，4吏用CorneoMeterCM825C(Courage+Khazaka/>司產(chǎn)品)對涂抹前、涂抹后1小時(shí)的角質(zhì)層水分含量進(jìn)行測定，求出水分含量增加率。如表6所示，給出了在涂有各植物提取物的情況下的角質(zhì)層水分含量的增力口率。表6(結(jié)果-6)待測物質(zhì)涂:沐1小時(shí)后的角質(zhì)層水分含量的增加率對照部位測試藥物涂抹部位西洋菜杜松白術(shù)款冬1%40%35%38%30%如上所述，通過測試物質(zhì)的涂抹，角質(zhì)層水分含量上升，表明皮膚有改善效果。[實(shí)驗(yàn)方法-7對40-55歲的健康女性志愿者進(jìn)行了下述處方的霜?jiǎng)┻B續(xù)使用試驗(yàn)。志愿者48名被分為4組，各組分別在面部的一側(cè)涂抹霜?jiǎng)?本發(fā)明產(chǎn)品l-4),在另一側(cè)涂抹比較品1，共4周，每天涂抹二次。角質(zhì)層水分含量用CorneoMeterCM825C測定，皮膚水分蒸發(fā)量用TewaMeterTM210測定，皮膚粘彈性用彈性測量儀(全部為Courage+Khazaka公司產(chǎn)品)進(jìn)行測定，并分別作為水分含量的增加程度、皮膚干糙改善程度，皮膚彈力改善程度的指標(biāo)。彈性測量儀按照常規(guī)方法負(fù)壓吸引2秒，釋放1秒，重復(fù)3次，將第一次和第三次的皮膚拉伸(Uf值，最大振幅)以及粘性/彈性比率(Uv/Ue值)同連續(xù)使用前進(jìn)行比較。而且使用硅膠印模(Silflo，F(xiàn)LEXICODEVELOPMENTS公司產(chǎn)品)采集外眼角的印模，測定皺紋的數(shù)目和長度，對連續(xù)使用前后的數(shù)值進(jìn)行比較。并且通過不干皿帶采集角質(zhì)層的脫落程度，由專業(yè)人員的視感判定評價(jià)皮膚的紋理完整程度，和角質(zhì)層脫落的均一程度。結(jié)果(同連續(xù)使用前的比較值)列于以下表7-11中。括弧中的數(shù)值表示成對學(xué)生t枱:驗(yàn)的檢4^值。表7(結(jié)果-7)印模的分析結(jié)果本發(fā)明品l使用組本發(fā)明品2使用組本發(fā)明品3使用組本發(fā)明品4使用組皺紋數(shù)目-9%(p=0.003)-6%(p=0.004)-7%(p=0.009)-6%(p-0.003)皺紋長度-12%(p=0.010)-10%(p-0.009)-11%(p-0.015)-9%(p=0.008)從以上的結(jié)果可以看出本發(fā)明品的抗鈹作用具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表8角質(zhì)水分含量本發(fā)明品1使用組本發(fā)明品2使用組本發(fā)明品3使用組本發(fā)明品4使用組+22%(p=0.0001)+24%(p=0.0001)+20%(p-0.0001)+15%(p=0.0008)從以上的結(jié)果可以看出本發(fā)明品的保濕效果具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表9皮膚水分蒸發(fā)量本發(fā)明品1使用組本發(fā)明品2使用組本發(fā)明品3使用組本發(fā)明品4使用組-40%(p=0.0001)-34%(p=0.0009)-33%(p-0.0009)-27%(p=0.0012)從以上的結(jié)果可以看出本發(fā)明品的皮膚千槌改善效果具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表IO皮膚粘彈性本發(fā)明品1使用組本發(fā)明品2使用組本發(fā)明品3使用組本發(fā)明品4使用組Uf(第一次)-20%(p=0.0052)-21%(p=0.0049)-19%(p=0.0073)-23%(p=0.0051)Uf(第三次)-21%(p=0.0007)-29%(p-0.0033)-25%(p-0.0019)-24%(p=0.0088)Uv/Ue-25%(p=0.0030)-22%(p=0.0002)-30%(p=0.0007)-18%(p=0.0001)從以上的結(jié)果可以看出本發(fā)明品的皮膚彈性增加具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意表ll皮膚故理本發(fā)明品1使用組本發(fā)明品2使用組本發(fā)明品3使用組本發(fā)明品4使用組紋理完整程度+23%(p=0.0021)+20%(p=0.0088)+33%(p=0.0071)+18%(p=0.0009)角質(zhì)脫落+33%(p-0.0001)+34%(p=0.0022)+40%(p=0.0005)+29%(p=0,0002)均一程度從以上的結(jié)果可以看出本發(fā)明品的紋理改善效果具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上述發(fā)明品1-4以及比較品的組成在以下表12列出。同時(shí)，數(shù)值全部以相對于全體的重量V。進(jìn)行表示。表12<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>[實(shí)驗(yàn)方法-8抗炎、創(chuàng)傷愈合促進(jìn)試驗(yàn)對8周齡HR-1小鼠人工形成炎癥或者創(chuàng)傷，各組(n-5)分別涂抹含有(1)無測試藥物添加、(2)5%杜松油、(3)5%白術(shù)提取物、(4)5%款冬提取物的1,3-丁二醇0,5g,每天2次，涂抹5天，笫五天，見察炎癥部位或者創(chuàng)傷部位的狀態(tài)?？寡鬃饔?、創(chuàng)傷愈合作用分別從^f氐到高進(jìn)行5階段的1-5點(diǎn)的評分。其結(jié)果表示在表13。表13(結(jié)果-8)抗炎作用創(chuàng)傷愈合促進(jìn)作用(1)12(2)34(3)44")54如表13所示，對照(1)中，炎癥和創(chuàng)傷的改善程度較低。與此相比，在活體實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)，西洋茱、杜松、白術(shù)和款冬提取物都表現(xiàn)出具有抗炎作用和創(chuàng)傷愈合促進(jìn)作用。實(shí)施例1-霜?jiǎng)?1)處方(A相)硬脂酸10.0重量％硬脂醇4.0硬脂酸丁酯8.0硬脂酸單甘油酯2.0維生素E乙酸酯0.5維生素A棕櫚酸酯0.1澳洲堅(jiān)果油1.0防腐劑適量香料適量(B相)甘油4.0200680011784.1說明書第22/31頁1,2-戊二醇3.0氫氧化鉀0.4抗壞血酸磷酸鎂0.1L-精氨酸鹽酸鹽0,01EDTA三鈉0,05西洋菜l，3-丁二醇提取物0.5離子交換水其余(2)制造方法A的油相部分和B的7K相部分分別在70"C加熱至完全溶解。將A相加入到B相，用乳化設(shè)備進(jìn)行乳化。將乳化物用熱交換器進(jìn)行冷卻。實(shí)施例2-霜?jiǎng)?1)處方硬脂酸5,0重量％硬脂醇4.0肉豆蔻酸異丙酯18，0甘油單硬脂酸酯3.0丙二醇10.0;ti^^的曱醇提取物0,01苛性鉀0.2亞硫酸氬鈉0.01防腐劑適量香料適量離子交換水余量(2)制造方法在離子交換水中加入丙二西孚、杜松的甲醇提取物和苛性鉀，溶解，加熱，在70。C保溫(水相)?；旌掀渌煞旨訜崛芙?，在70C保溫(油相)。將油相慢慢地加入到水相中，全部加完后在該溫度放置一段時(shí)間使其進(jìn)行反應(yīng)。然后，用均質(zhì)器進(jìn)行均質(zhì)乳化，充分?jǐn)嚢柘吕鋮s到3ox:。實(shí)施例3-防鈹霜(1)處方硬脂酸2.0重量％硬脂醇7.0氫化羊毛脂2.0角鯊?fù)?,02-辛基十二烷醇6.0聚氧乙烯(25摩爾)十六烷醇醚3.0甘油單硬脂酸酯2.0丙二醇5.0白術(shù)的乙醇4^取物0.05姜黃的乙醇提取物0.05亞石克酸氫鈉0.03對羥基笨甲酸乙酯0,3香料適量離子交換水余量(2)制造方法在離子交換水中加入丙二醇，加熱，在70。C保溫(水相)。混合其它成分，加熱溶解，在70。C保溫(油相)。將油相慢慢地加入到水相中，進(jìn)行預(yù)備乳化反應(yīng)，用均質(zhì)器進(jìn)行均質(zhì)乳化，充分?jǐn)嚢柘吕鋮s到30'C。實(shí)施例4-抗老化霜(1)處方固體石蠟5.0重量％蜂蠟10.0凡士林15.0液體石蠟41.0甘油單硬脂酸酯2.0失水山梨糖醇聚氧乙烯(20摩爾)醚單月桂酸酯2.0肥皂粉末0.1硼砂0.2款冬的丙酮提取物0.05柴胡的乙醇提取物0.05亞硫酸氫鈉0.03對羥基苯曱酸乙酯03香料適量離子交換水余量(2)制造方法在離子交換水中加入肥皂粉末和硼砂，加熱溶解，在70"C保溫(7jc相)?；旌掀渌煞郑訜崛诮?，在70'C保溫(油相)。將油相邊攪拌邊慢慢地加入到水相中進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，用均質(zhì)器進(jìn)行均質(zhì)乳化，乳化后在充分?jǐn)嚢柘吕鋮s到30匸。實(shí)施例5-乳液(1)處方硬脂酸1.0重量％凡士林5.0液體石錯(cuò)10,0聚氧乙烯(10摩爾)單油酸酯2.0聚乙二醇15003.0三乙醇胺1.0羧乙烯基聚合物0.2(商品名稱卡波姆941，固特立化學(xué)公司產(chǎn)品)西洋菜的乙酸乙酯提取物0.01亞硫酸氬鈉0.01對羥基苯曱酸乙酯0.3香料適量離子交換水余量(2)制造方法用少量的離子交換水溶解羧乙烯基聚合物(A相)。在余下的離子交換水中加入聚乙二醇1500和三乙醇胺，加熱溶解，在70。C保溫(水相)。混合其它成分，加熱融解，在70。C保溫(油相)。將油相加入到水相中，進(jìn)行預(yù)備乳化反應(yīng)，加入A相，用均質(zhì)器進(jìn)行均質(zhì)乳化，乳化后在充分?jǐn)嚢柘吕鋮s到3ox:。實(shí)施例6-乳液(1)處方微晶蠟1.0重量％蜂蠟2.0羊毛脂2.0液體石蠟10.0角豈烷5.0失水山梨糖醇倍半油酸酯4.0失水山梨糖醇聚氧乙烯(20摩爾)醚單油酸酯1.0丙二醇7.0杜松的1，3-丁二醇提取物10.0亞^^酸氬鈉0.01對羥基苯甲酸乙酯0.3香料適量離子交換水余量(2)制造方法在離子交換水中加入丙二醇，加熱，在70。C保溫(水相)?；旌掀渌煞郑訜崛诮?，在7ox:保溫(油相)。將油相邊攪拌邊慢慢地加入到水相中，用均質(zhì)器進(jìn)行均質(zhì)乳化。乳化后在充分?jǐn)嚢柘吕鋮s到3or;。實(shí)施例7-乳液(1)處方(A相)角鯊?fù)?.0重量％油酸油基酯3.0凡士林2.0失水山梨糖醇倍半油酸酯0.8聚氧乙烯油基醚(20EO)1.2月見草油0.5防腐劑適量香料適量(B相)1，3-丁二醇4.5白術(shù)的乙醇提取液1.5乙醇3.0羧乙烯基聚合物0.2氫氧化鉀0.1L-精氨酸L-天門冬氨酸鹽0,01葛根的乙醇提取物1.5赤蘚醇0.5離子交換水余量(2)制造方法將A油相部分和B水相部分分別在70。C加熱，完全溶解。將A相加入到B相中，用乳化設(shè)備進(jìn)行乳化。將乳化物用熱交換器進(jìn)行冷卻。實(shí)施例8-啫哩(1)處方95%乙醇10.0重量％一縮二丙二醇15.0聚氧乙烯(50摩爾)油醇醚2.0羧乙烯基聚合物1.0(商品名稱卡波姆940，固特立化學(xué)公司產(chǎn)品)苛性鈉0.15L-精氨酸0.1款冬的乙醇提取物7.02-羥基-4-甲氧基二苯曱酮磺酸鈉0.05二水合乙二胺四乙酸三鈉0.05對羥基苯甲酸乙酯0.2香料適量離子交換水其余(2)制造方法在離子交換水中均勻溶解卡波姆940，另外，在95%乙醇中溶解款冬的乙醇提取物、聚氧乙烯(50摩爾)油醇醚，加入到7jc相中。隨后，加入其它成分后，用苛性鈉和L-精氨酸中和，進(jìn)行增粘。實(shí)施例9-美溶液(1)處方(A相)乙醇(95%)10.0重量％聚氧乙烯(20摩爾)辛基十二醇醚1.0泛醇乙醚0.1西洋菜的甲醇提取物1.5對羥基苯曱酸甲酯0.15(B相)氫氧化鉀0.1(C相)甘油5.0一縮二丙二醇10.0亞石危酸氬鈉0.03羧乙烯基聚合物0.2(商品名稱卡波姆940，固特立化學(xué)公司產(chǎn)品)離子交換水余量(2)制造方法分別均勻溶解A相和C相，把A相加入到C相中，形成可溶化狀態(tài)。再加入B相，然后進(jìn)行填充。實(shí)施例10-面膜(1)處方(A相)一縮二丙二醇5.0重量％聚氧乙烯(60摩爾)氫化蓖麻油5.0(B相)杜松提取物0.01M油5.0生育酚醋酸酯0.2對羥基苯甲酸乙酯0.2香料0.2(C相)亞石危酸氫鈉0.03聚乙二醇(凝膠化度90，聚合度2000)13.0乙醇7.0離子交換水余量(2)制造方法分別均勻溶解A相、B相和C相，把B相加入到A相中，形成可-溶化狀態(tài).再將其加入到C相，然后進(jìn)行填充。實(shí)施例11-化妝水(1)處方(A相)乙醇5.0重量％聚氧乙烯油醇醚2.0油醇0.1對二甲基氨基苯甲酸-2-乙基己酯0.18香料適量(B相)1,3-丁二醇9.5甘油2.0吡咯烷酮羧酸鈉0.5煙酰胺0.3白術(shù)的l,3-丁二醇提取物0.1P-環(huán)糊精1.0赤蘚醇0.05離子交換水余量(2)制造方法將A的醇相加入到B的水相中，進(jìn)行可溶化得到化妝水。實(shí)施例12-固體粉底(1)處方滑石粉43.1重量％高嶺土15.0絹云母則氧化鋅7.0二氧化鈦3.8氧化鐵黃2.9氧化鐵黑0.2角鯊?fù)?.0異硬脂酸4.0聚氧乙烯失水山梨糖醇醚單油酸酯3.0辛酸異十六烷基酯2.0款冬的乙醇提取物0.5防腐劑適量香料適量(2)制造方法用攪拌機(jī)充分混合滑石粉-氧化鐵黑粉末成分,在其中加入角鯊?fù)閪辛酸異十六烷基酯的油性成分、款冬的乙醇提取物、防腐劑、香料，充分?jǐn)嚢韬?，進(jìn)行容器填充和成型。實(shí)施例13-乳化型粉底(膏霜型)(1)處方(粉體部分)二氧化鈦10.3重量％絹云母5.4高呤土3.0氧化鐵黃0,8氧化鐵紅0.3氧化鐵黑0.2(油相)十甲基環(huán)五硅氧烷11.5液體石蠟4.5聚氧乙烯改性的聚二曱基硅氧烷4.0C水相)離子交換水50.01,3-丁二醇4.5西洋菜的乙醇提取物0.5失水山梨糖醇倍半油酸酯3.0防腐劑適量香料適量(2)制造方法加熱水相攪拌后，添加經(jīng)過充分混合粉碎的粉體部分進(jìn)行均質(zhì)處理。然后加入加熱混合的油相進(jìn)行均質(zhì)處理后，邊攪拌邊加入香料，冷卻到室權(quán)利要求1.一種抗劑，其特征在于，含有來源于西洋菜，杜松，白術(shù)以及款冬提取物中的至少任意一種作為有效成分。2.—種基底膜穩(wěn)定劑，其特征在于，含有來源于西洋菜，杜松，白術(shù)以及款冬提取物中的至少任意一種作為有效成分。3.—種細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑，其特征在于，含有來源于西洋菜，杜松，白術(shù)以及款冬提取物中的至少任意一種作為有效成分。4.如權(quán)利要求3所述的細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑，其特征在于，生成促進(jìn)的細(xì)胞外基質(zhì)的構(gòu)成成分為選自層粘連蛋-5，m型膠原蛋白，IV型膠原蛋白以及vn型膠原蛋白組成的組中的一種或二種以上。5.如權(quán)利要求3或4所述的細(xì)胞外基質(zhì)生成促進(jìn)劑，其特征在于，生成促進(jìn)所有的層粘連蛋白-5，ffl型膠原蛋白，iv型膠原蛋白以及vn型膠原蛋白。6.—種皮膚*>弛和皮膚彈力改善劑，其特征在于，含有來源于西洋菜，杜松，白術(shù)以及款冬的提取物中的至少任意一種作為有效成分。7.—種人工皮膚的制造方法，其特征在于，包括將來源于西洋菜，杜松，白術(shù)以及款冬的提取物中的至少任意一種添加到人工皮膚生長培養(yǎng)基中的工序。8.—種美容方法，其特征在于，通過在皮膚上使用來源于西洋菜，杜松，白術(shù)以及款冬的提取物中的至少任意一種來減輕皺紋，改善皮膚松弛和皮膚彈力。全文摘要本發(fā)明提供含有西洋菜，杜松，白術(shù)以及款冬的提取物中的至少任意一種作為有效成分而形成的新型抗皺劑。文檔編號(hào)A61K8/97GK101155576SQ20068001178公開日2008年4月2日申請日期2006年4月12日優(yōu)先權(quán)日2005年4月13日發(fā)明者小倉有紀(jì),海鹽健一,豬股慎二,高田惠子申請人:株式會(huì)社資生堂