專利名稱：一種用于治療慢性阻塞性肺疾病的脂質(zhì)體維甲酸氣霧劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于呼吸疾病治療藥物，特別涉及維甲酸在制備慢性阻塞性呼吸疾病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases，COPD)是一類以氣道不完全可逆性氣流受限為特征的疾病，其發(fā)病率高且呈逐年增加趨勢，目前，COPD已是全球第五大疾病。COPD的病變主要表現(xiàn)為由于各種致病因素的反復(fù)刺激，導(dǎo)致氣道上皮細(xì)胞纖毛發(fā)生粘連、倒伏和脫失，繼而發(fā)生上皮細(xì)胞的變性、壞死及增生、化生，最終導(dǎo)致粘液纖毛運(yùn)動系統(tǒng)受損。
正常人呼吸道具有完善的防御功能，氣道粘液纖毛運(yùn)動系統(tǒng)處于核心地位，其中纖毛柱狀上皮細(xì)胞是主要的細(xì)胞成分。纖毛柱狀上皮細(xì)胞作為細(xì)胞周期中的終末細(xì)胞，在損傷后自身不能增殖修復(fù)；而氣道上皮的粘液細(xì)胞和基底細(xì)胞作為纖毛柱狀上皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，在損傷后的修復(fù)中，可部分進(jìn)入細(xì)胞周期進(jìn)行增殖、分化為新的纖毛柱狀上皮細(xì)胞。氣道前體細(xì)胞向纖毛柱狀上皮細(xì)胞的分化過程受多種因素調(diào)節(jié)，因此，通過人為外來因素促進(jìn)氣道前體細(xì)胞向纖毛柱狀上皮細(xì)胞分化，從而修復(fù)氣道粘液纖毛運(yùn)動系統(tǒng)，達(dá)到阻斷COPD的發(fā)生和發(fā)展，有可能成為早期治療COPD的一種有效措施。
目前，吸煙是導(dǎo)致COPD發(fā)生發(fā)展的重要原因之一，故從病因?qū)W上考慮，戒煙被認(rèn)為是能減緩COPD進(jìn)展的有效措施，但對于已發(fā)生的COPD患者，藥物治療仍用于預(yù)防和控制癥狀，目的是減少急性發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度，期待能提高患者運(yùn)動耐力和生活質(zhì)量。目前藥物治療主要有以下幾種1、茶堿類藥物如氨茶堿、喘定，此類藥物不僅可擴(kuò)張支氣管，而且可改善呼吸肌強(qiáng)度，增加心輸出量，減少肺循環(huán)阻力；有一定的抗炎、利尿作用。但對老年人及持續(xù)發(fā)熱、心功能不全、肝功不良者使用茶堿類藥物時，容易發(fā)生危險。
2、β2受體興奮劑如舒喘靈及博利康尼，β2受體主要分布于小氣道吸入或服用β2-受體興奮劑后，小氣道可明顯擴(kuò)張，從而減輕或緩解癥狀，但β2受體興奮劑的副作用為擴(kuò)張支氣管的同時使血管擴(kuò)張，引起肺通氣/血流比例失調(diào)；過量應(yīng)用可引起手顫、心悸等。
3、抗膽堿能藥物如阿托品、654-2，此類藥物通過拮抗支氣管中的副交感神經(jīng)而起作用。雖然有支氣管解痙作用，但因其有口干、痰液粘稠不易咯出、心悸等副作用故臨床使用受限。
4、激素如強(qiáng)的松，對于足量支氣管擴(kuò)張劑治療病情仍無改善或趨向惡化的COPD患者，加用激素治療可能有效。但激素有致水鈉儲留不良、骨質(zhì)疏松等不良影響，且大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，長期使用激素僅有20％~30％的COPD患者病情改善，所以對老年人僅限于短期服用大量激素以緩解病情。
5、抗生素種類多，應(yīng)根據(jù)患者的藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用。但因COPD患者多反復(fù)發(fā)作，因預(yù)防濫用抗生素引起的二重感染以及有些抗生素的肝、腎、耳毒性使其應(yīng)用受限。
6、蛋白酶抑制劑和抗氧化劑如α1抗胰蛋白酶、N-乙酰半光氨酸，蛋白酶可分解間質(zhì)中的結(jié)締組織成分，破壞肺組織結(jié)構(gòu)造成肺氣腫。COPD患者存在氧化-抗氧化失衡。但會引起痰液高分泌加重呼吸困難。
維甲酸(retinoic acid，RA)具有多種生理功能，而最令人鼓舞的是RA具有促進(jìn)細(xì)胞分化的作用。通過基因芯片技術(shù)，已從人原代氣道上皮細(xì)胞中克隆出RA誘導(dǎo)的特異性基因-spurt，提示RA與氣道組織的形成及其功能有相關(guān)性。有研究認(rèn)為，RA能夠抑制彈性蛋白酶介導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞損傷；也有研究認(rèn)為RA能夠通過其特異性受體RAR激發(fā)粘液纖毛細(xì)胞分化，同時抑制鱗狀細(xì)胞分化。
隨著研究的深入，人們逐漸意識維甲酸參與炎癥細(xì)胞的發(fā)生，對哮喘氣道炎癥、以及多種皮膚病如銀屑病、膠樣?jì)雰?、頑固性扁平疣、痤瘡、口腔扁平苔蘚、皮膚T細(xì)胞淋巴瘤、聯(lián)合甲硝唑治療毛囊蟲病、暴發(fā)性酒渣鼻、淋巴瘤樣丘疹病、治療泛發(fā)性連續(xù)肢端皮炎、掌跖角化病等都有治療作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于治療慢性阻塞性呼吸疾病的脂質(zhì)體維甲酸氣霧制劑。
本脂質(zhì)體維甲酸氣霧制劑由維甲酸脂質(zhì)體、頭孢吡肟或頭孢他啶、地塞米松或氫化可的松、以及蒸餾水組成。所述維甲酸脂質(zhì)體采用以下重量份數(shù)比的原料維甲酸1～2、膽固醇10～15、卵磷脂10～15，維生素E 0.01～0.2，先溶于乙醇中，緩慢注入恒溫攪拌下的PBS緩沖液中，再通過微孔濾膜過濾，最后冷凍干燥后得到維甲酸脂質(zhì)體。按重量份數(shù)比將2～3的維甲酸脂質(zhì)體與頭孢吡肟或頭孢他啶0.1～0.2、地塞米松0.0005～0.0025或氫化可的松0.01～0.05混合，將混合物再按重量份數(shù)比1∶5～1∶20的比例加入蒸餾水混合，分裝入潔凈的氣霧罐中即可得到氣霧制劑。
其中，微孔濾膜的孔徑為0.1um，PBS緩沖液的PH為7.2~7.4。
一、臨床使用效果選擇經(jīng)過現(xiàn)有治療方法反復(fù)治療無效的慢性阻塞性肺疾病患者23例，根據(jù)病情程度進(jìn)行臨床分級，包括輕度、中度和重度患者，分別采用脂質(zhì)體維甲酸霧化療法，應(yīng)用2周為1個療程，結(jié)果表明，治療后18位患者達(dá)到正常，另外2例患者得到好轉(zhuǎn)，治愈率為18/23，有效率為20/23，治療后療效穩(wěn)定維持時間長。
對血漿炎癥因子內(nèi)皮素(ET)、腫瘤壞死因子(TNF-a)的影響檢測。ET與TNF-a在具有組織缺血、缺氧和血管內(nèi)皮損傷的疾病中它起著重要的作用，對心肺功能有抑制作用。本研究結(jié)果顯示，COPD患者血漿內(nèi)皮素水平較正常人明顯升高，與文獻(xiàn)報道一致。兩組患者血漿ET、TNF-a于治療后均下降，治療組顯著低于對照組，結(jié)果見下表，說明該氣霧劑能有效降低COPD患者血漿ET、TNF-a水平。
脂質(zhì)體維甲酸霧化治療前后23位患者血漿ET、TNF-a變化

二、對培養(yǎng)細(xì)胞的毒性測定將氣霧制劑樣品用細(xì)胞培養(yǎng)液從1∶10濃度開始做2倍系列稀釋，MTT法計(jì)算細(xì)胞增殖指數(shù)。結(jié)果見下表，說明該消毒液對細(xì)胞增殖無顯著影響。
維甲酸脂質(zhì)體對Hep-2細(xì)胞的增殖影響

三、藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)脂質(zhì)體維甲酸氣霧劑常溫高速離心(3000-20000rpm/10-30min)，無沉淀和分層現(xiàn)象發(fā)生，45℃孵浴1h或4℃冷藏1h后，以上述同樣條件高速離心，也均未見沉淀和分層出現(xiàn)。
本發(fā)明配制的維甲酸脂質(zhì)體氣霧劑是一種復(fù)合物，具有良好的吸收作用，能有效達(dá)到氣管局部，脂質(zhì)體包裝能使維甲酸有效透過微孔屏障，在局部得到有效的吸收，對其他器官不造成損害，最終達(dá)到藥效增加、穩(wěn)定性增加的結(jié)果。因此脂質(zhì)體維甲酸氣霧劑能大大增加藥物到達(dá)局部氣管的濃度，延長維甲酸在氣管的作用時間，有利于藥效的發(fā)揮，減少了維甲酸副作用的發(fā)生。總的來說，具有穩(wěn)定性好、藥效長、療效顯著、配制方便、低或無副作用等優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的維甲酸氣霧劑還可以與多種成分配伍產(chǎn)生多重的治療效果，如抗生素、激素、疫苗等，使用不同的濃度從而達(dá)到不同的治療目的。
具體實(shí)施例方式
維甲酸與頭孢吡肟、地塞米松配伍制成氣霧劑，具有有高的局部抗炎活性和糖皮質(zhì)激素受體特異性，吸入后在肺部有顯著抗炎作用，可減輕癥狀和阻止病情惡化，實(shí)施例1-6中絕大部分患者在1～2周內(nèi)病情有所緩解。而且還可以加入其他成分，達(dá)到有效治療的目的。

上述實(shí)施例，都是先將維甲酸、膽固醇、卵磷脂，維生素E溶于200ml乙醇中，緩慢注入恒溫攪拌下PH為7.2～7.4的PBS緩沖液中，進(jìn)一步通過含有孔徑為0.1um的微孔濾膜，冷凍干燥后將樣品充氮?dú)饷芊?，獲得維甲酸脂質(zhì)體。再將維甲酸脂質(zhì)體與頭孢吡肟或頭孢他啶、地塞米松或氫化可的松混合，再與蒸餾水混合，分裝入潔凈的氣霧罐中即得到其氣霧制劑。
權(quán)利要求
1.一種用于治療慢性阻塞性肺疾病的脂質(zhì)體維甲酸氣霧劑，其特征在于由維甲酸脂質(zhì)體、頭孢吡肟或頭孢他啶、地塞米松或氫化可的松、以及蒸餾水組成；所述維甲酸脂質(zhì)體采用以下重量份數(shù)比的原料制備維甲酸1～2、膽固醇10～15、卵磷脂10～15，維生素E 0.01～0.2，將上述原料先溶于乙醇，緩慢注入恒溫攪拌下的PBS緩沖液中，再通過微孔濾膜過濾，最后冷凍干燥得到維甲酸脂質(zhì)體；按重量份數(shù)比將2～3的維甲酸脂質(zhì)體與頭孢吡肟或頭孢他啶0.1～0.2、地塞米松0.0005～0.0025或氫化可的松0.01～0.05混合，再按重量份數(shù)比1∶5～1∶20的比例加入蒸餾水混合，分裝入潔凈的氣霧罐中即可得到氣霧制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體維甲酸氣霧劑，其特征在于微孔濾膜的孔徑為0.1um。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體維甲酸氣霧劑，其特征在于PBS緩沖液的PH為7.2-7.4。
全文摘要
本發(fā)明公開一種防治慢性阻塞性肺疾病的脂質(zhì)體維甲酸氣霧劑，由維甲酸脂質(zhì)體、頭孢吡肟或頭孢他啶、地塞米松或氫化可的松、以及蒸餾水組成；所述維甲酸脂質(zhì)體采用以下重量份數(shù)比的原料制備維甲酸1～2、膽固醇10～15、卵磷脂10～15，維生素E 0.01～0.2；按重量份數(shù)比將2～3的維甲酸脂質(zhì)體與頭孢吡肟或頭孢他啶0.1～0.2、地塞米松0.0005～0.0025或氫化可的松0.01～0.05混合，再按重量份數(shù)比1∶5～1∶20的比例加入蒸餾水混合，分裝入潔凈的氣霧罐中即可得到氣霧制劑。本發(fā)明以維甲酸為主要活性成分，具有穩(wěn)定性好、藥效長、療效顯著、配制方便、低或無副作用等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號A61K31/185GK1927207SQ200610095078
公開日2007年3月14日 申請日期2006年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月30日
發(fā)明者熊瑋, 楊和平, 戴曉天 申請人:中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院