專利名稱：化合物ws727713的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用作藥物或化妝品的新化合物、其制備方法以及含有該化合物的藥物組合物。

背景技術(shù)：
黑皮質(zhì)素(MC)是一類肽類激素，它們來(lái)源于前激素原翻譯后修飾的酶裂解過(guò)程。MC包括促黑激素(MSH)，如α-MSH、β-MSH和γ-MSH，以及促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)。這些MC通過(guò)膜MC受體(MC-Rs)來(lái)調(diào)節(jié)多種生理機(jī)能。已經(jīng)克隆出5種MC-R(MC1-R、MC2-R、MC3-R、MC4-R和MC5-R)并對(duì)它們進(jìn)行了表征。MC1-R(第一種被發(fā)現(xiàn)的α-MSH受體)在皮膚的黑色素細(xì)胞中表達(dá)，參與表皮黑色素的色素形成和動(dòng)物顯色。
最近發(fā)現(xiàn)MC1-R與疼痛和炎癥有關(guān)，在炎癥細(xì)胞，如嗜中性粒細(xì)胞或單核細(xì)胞中，MC1-R的mRNA表達(dá)。MC1-R可能介導(dǎo)α-MSH抑制單核細(xì)胞中一氧化氮的生成和嗜中性粒細(xì)胞的游走。有證據(jù)表明α-MSH分子能減輕人類炎癥應(yīng)答動(dòng)物模型的炎癥反應(yīng)。α-MSH能減輕一般性刺激物誘導(dǎo)的鼠皮膚炎癥。并且，α-MSH能抑制角叉菜膠誘導(dǎo)的鼠爪水腫。因此，MC1-R激動(dòng)劑有望用作炎癥反應(yīng)的治療藥物。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種用作黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑的新化合物、其制備方法以及含有該化合物的藥物或化妝品組合物。
更具體地是，本發(fā)明涉及具有減輕炎癥反應(yīng)效果的黑皮質(zhì)素受體激動(dòng)劑化合物。
本發(fā)明的發(fā)明者還發(fā)現(xiàn)黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑，如WS727713具有有效的抗炎作用。因此，黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑，如WS727713可用作抗炎藥物的活性組分以及與黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病的治療或預(yù)防藥物，所述的相關(guān)疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部炎性疾病、腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是

氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲、厭食等。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種具有上述生物活性的化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種通過(guò)使假諾卡氏菌屬(Pseudoncardia)的WS727713產(chǎn)生菌在培養(yǎng)基中發(fā)酵，從而制備WS727713的方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種以WS727713作為活性組分的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑(如WS727713)在治療和預(yù)防上述疾病中的應(yīng)用。
因此，本發(fā)明包括以下內(nèi)容 (1)一種有以下特性的基本純的WS727713化合物。
a)分子式C30H44N8O8 b)1H核磁共振譜 (500MHz，DMSO-d6)δ9.76(1H，s，可交換)，8.76(1H，d，J＝7.5Hz，可交換)，8.23(1H，d，J＝5Hz，可交換)，7.76(1H，dd，J＝8.5和3Hz，可交換)，7.25-7.17(5H，m)，5.71(1H，dd，J＝10.5和5Hz)，5.08(1H，dd，J＝11和4Hz，可交換)，5.03(1H，m)，4.99(1H，m)，4.92(1H，m)，4.85(1H，m)，4.83(1H，d，J＝3Hz，可交換)，4.76(1H，br d，J＝12Hz，可交換)，4.12(1H，dd，J＝16.5和8.5Hz)，3.65(1H，dd，J＝16.5和3Hz)，3.58(1H，m)，3.07(1H，dd，J＝13.5和8.5Hz)，2.94(1H，br d，J＝13Hz)，2.86(1H，dd，J＝13.5和6Hz)，2.73-2.68(2H，m)，2.58(1H，m)，2.24(1H，br d，J＝13Hz)，2.08(1H，br d，J＝14Hz)，1.88(1H，m)，1.67(1H，m)，1.55(1H，m)，1.42-1.36(2H，m)，1.21(1H，m)，1.19(3H，d，J＝7Hz)，1.09(1H，m)，0.76(3H，d，J＝6.5Hz)，0.75(3H，d，J＝6.5Hz)； c)13C核磁共振譜 (125MHz，DMSO-d6)δ173.8(s)，171.7(s)，170.4(s)，169.8(s)，169.1(s)，167.6(s)，137.2(s)，129.2(d)x2，128.0(d)x2，126.3(d)，60.2(d)，53.2(t)，51.1(d)，50.8(d)，49.6(d)，47.4(d)，47.0(t)，44.7(d)，41.2(t)，36.4(t)，35.4(t)，33.2(t)，23.6(d)，23.5(t)，23.1(q)，21.7(q)，21.0(t)，15.8(q)。
(2)一種屬于假諾卡氏菌屬(Pseudonocardia)的放線菌株，其保藏編號(hào)為FERM BP-7570。
(3)一種具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物，其是通過(guò)在培養(yǎng)基中培養(yǎng)上述(2)所述的放線菌株并從所述菌株的發(fā)酵液中回收該化合物而得到的。
(4)一種制備上述(1)所述化合物WS727713的方法，該方法包括在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于假諾卡氏菌屬的WS727713產(chǎn)生菌，然后從發(fā)酵液中回收該化合物。
(5)上述(4)所述的方法，其中所述屬于假諾卡氏菌屬的WS727713產(chǎn)生菌是上述(2)所述的放線菌株。
(6)一種藥物或化妝品組合物，該組合物含有上述(1)所述的化合物WS727713或其鹽，以及可藥用的、基本無(wú)毒的載體或賦形劑。
(7)一種用作藥物或化妝品的上述(1)所述的化合物。
(8)一種制備具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物的方法，該方法包括在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于假諾卡氏菌屬的、能產(chǎn)生具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物的放線菌株，并回收所述化合物。
(9)一種具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物，其是通在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于假諾卡氏菌屬的、能產(chǎn)生具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物的放線菌株，并從該菌株的培養(yǎng)液中回收該化合物而得到的。
(10)一種包括上述(1)所述的化合物或其鹽的黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑。
(11)一種調(diào)節(jié)黑皮質(zhì)素受體的方法，該方法包括將上述(1)所述化合物或其鹽對(duì)人或動(dòng)物進(jìn)行給藥。
(12)上述(1)所述的化合物或其鹽在制備具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)作用的藥物或化妝品中的應(yīng)用。
(13)一種用于治療或預(yù)防疾病的藥物或化妝品的組合物，該藥物組合物包括上述(1)所述的化合物或其鹽，以及一種可藥用的、基本無(wú)毒的載體或賦形劑；所述疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部和腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是

氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲或厭食。
(14)一種用于治療或預(yù)防疾病的方法，該方法包括將上述(1)所述的化合物或其鹽對(duì)人或動(dòng)物進(jìn)行給藥；所述疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部和腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是

氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲或厭食。
(15)上述(1)所述的化合物或其鹽在制備用于治療或預(yù)防疾病的藥物中的應(yīng)用，所述疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部和腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是

氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲或厭食。



圖1是紅外光譜圖。
圖2是1H核磁共振譜的圖。
圖3是13C核磁共振譜的圖。

具體實(shí)施例方式 通過(guò)以下性質(zhì)可以說(shuō)明所述的對(duì)黑皮質(zhì)素受體活性具有有效調(diào)節(jié)作用的化合物的特征。圖1-3是示出紅外光譜、1H核磁共振譜和13C核磁共振譜的圖。
a)分子式C30H44N8O8 b)ESI-MS(+m/z)645(M+H)+ c)紅外光譜(圖1) vmax(KBr)3310，2950，1640，1545，1450，1410，1370，1350，1300，1245，1160，1125，1095，995cm-1 d)1H核磁共振譜(圖2) (500MHz，DMSO-d6)δ9.76(1H，s，可交換)，8.76(1H，d，J＝7.5Hz，可交換)，8.23(1H，d，J＝5Hz，可交換)，7.76(1H，dd，J＝8.5和3Hz，可交換)，7.25-7.17(5H，m)，5.71(1H，dd，J＝10.5和5Hz)，5.08(1H，dd，J＝11和4Hz，可交換)，5.03(1H，m)，4.99(1H，m)，4.92(1H，m)，4.85(1H，m)，4.83(1H，d，J＝3Hz，可交換)，4.76(1H，br d，J＝12Hz，可交換)，4.12(1H，dd，J＝16.5和8.5Hz)，3.65(1H，dd，J＝16.5和3Hz)，3.58(1H，m)，3.07(1H，dd，J＝13.5和8.5Hz)，2.94(1H，br d，J＝13Hz)，2.86(1H，dd，J＝13.5和6Hz)，2.73-2.68(2H，m)，2.58(1H，m)，2.24(1H，br d，J＝13Hz)，2.08(1H，br d，J＝14Hz)，1.88(1H，m)，1.67(1H，m)，1.55(1H，m)，1.42-1.36(2H，m)，1.21(1H，m)，1.19(3H，d，J＝7Hz)，1.09(1H，m)，0.76(3H，d，J＝6.5Hz)，0.75(3H，d，J＝6.5Hz)； c)13C核磁共振譜(圖3) (125MHz，DMSO-d6)δ173.8(s)，171.7(s)，170.4(s)，169.8(s)，169.1(s)，167.6(s)，137.2(s)，129.2(d)x2，128.0(d)x2，126.3(d)，60.2(d)，53.2(t)，51.1(d)，50.8(d)，49.6(d)，47.4(d)，47.0(t)，44.7(d)，41.2(t)，36.4(t)，35.4(t)，33.2(t)，23.6(d)，23.5(t)，23.1(q)，21.7(q)，21.0(t)，15.8(q)。
特別地是，WS727713具有以下理化性質(zhì) 分子式C30H44N8O8 ESI-MS(+m/z)645(M+H)+ HR-ESI-TOF/MS(+m/z) 計(jì)算值645.3360(M+H)+ 實(shí)測(cè)值645.3387(M+H)+ 旋光度 [α]D(23℃)32°(c＝0.5，在DMSO中) 溶解度 可溶于甲醇、乙腈、丙酮、乙酸乙酯、DMSO 難溶于H2O 顯色反應(yīng) 陽(yáng)性碘蒸汽反應(yīng)、硫酸鈰反應(yīng)、Ehrlich反應(yīng)、Dragendorff反應(yīng) 陰性Molish反應(yīng)、茚三酮反應(yīng) 薄層色譜(TLC) *由E.Merck制造 高效液相色譜(HPLC) 條件 流動(dòng)相35％的乙腈水溶液 柱Mightysil RP-18 GP(4.6×150mm) 流速1.0mL/min 檢測(cè)UV 210nm波長(zhǎng)處 滯留時(shí)間9.3min 紅外光譜(圖1) vmax(KBr)3310，2950，1640，1545，1450，1410，1370，1350，1300，1245，1160，1125，1095，995cm-1 1H核磁共振譜(圖2) (500MHz，DMSO-d6)δ9.76(1H，s，可交換)，8.76(1H，d，J＝7.5Hz，可交換)，8.23(1H，d，J＝5Hz，可交換)，7.76(1H，dd，J＝8.5和3Hz，可交換)，7.25-7.17(5H，m)，5.71(1H，dd，J＝10.5和5Hz)，5.08(1H，dd，J＝11和4Hz，可交換)，5.03(1H，m)，4.99(1H，m)，4.92(1H，m)，4.85(1H，m)，4.83(1H，d，J＝3Hz，可交換)，4.76(1H，br d，J＝12Hz，可交換)，4.12(1H，dd，J＝16.5和8.5Hz)，3.65(1H，dd，J＝16.5和3Hz)，3.58(1H，m)，3.07(1H，dd，J＝13.5和8.5Hz)，2.94(1H，br d，J＝13Hz)，2.86(1H，dd，J＝13.5和6Hz)，2.73-2.68(2H，m)，2.58(1H，m)，2.24(1H，br d，J＝13Hz)，2.08(1H，br d，J＝14Hz)，1.88(1H，m)，1.67(1H，m)，1.55(1H，m)，1.42-1.36(2H，m)，1.21(1H，m)，1.19(3H，d，J＝7Hz)，1.09(1H，m)，0.76(3H，d，J＝6.5Hz)，0.75(3H，d，J＝6.5Hz)。
13C核磁共振譜(圖3) (125MHz，DMSO-d6)δ173.8(s)，171.7(s)，170.4(s)，169.8(s)，169.1(s)，167.6(s)，137.2(s)，129.2(d)x2，128.0(d)x2，126.3(d)，60.2(d)，53.2(t)，51.1(d)，50.8(d)，49.6(d)，47.4(d)，47.0(t)，44.7(d)，41.2(t)，36.4(t)，35.4(t)，33.2(t)，23.6(d)，23.5(t)，23.1(q)，21.7(q)，21.0(t)，15.8(q)。
顏色與形態(tài) 白色晶體 熔點(diǎn) 272-277℃(分解) 生產(chǎn)菌株No.727713的特點(diǎn) 菌株No.727713由在日本千葉縣采集的落葉樣品中分離得到。采用Shirling和Gottlieb(Shirling，E.B.和D.GottliebMethods forcharacterization of Streptomyces species，Int.J.Syst.Bacteriol，16，313-340，1966)以及Waksman(Waksman，S.A.The actinomycetes Vol.2Classification，identification and description of genera and species，The Williams and Wilkins出版公司，巴爾的摩，1961)所述的方法和培養(yǎng)基來(lái)進(jìn)行菌株No.727713的分類學(xué)研究。將分離的菌株在30℃下培養(yǎng)14天后進(jìn)行觀察。使用光學(xué)顯微鏡和掃描電子顯微鏡對(duì)生長(zhǎng)在腐殖酸-維生素瓊脂培養(yǎng)基(Hayakawa，M.和Nonomura，H.Humicacid-vitamin agar，a new medium for the selective isolation of soilactinomycetes，J.Ferment.Techno1.，65，501-509，1987)上的培養(yǎng)物進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。在酵母提取物-淀粉瓊脂培養(yǎng)基上測(cè)定菌株生長(zhǎng)的溫度范圍，所述培養(yǎng)基的配制方法為將2g酵母提取物(由Daigo Eiyo株式會(huì)社出品，大阪，日本)、10g可溶性淀粉和16g瓊脂溶于1000mL自來(lái)水中(滅菌前使用1N NaOH將pH調(diào)至7.2)。在加有0.1％酵母提取物的Pridoham-Gottlieb氏培養(yǎng)基(Pridoham，T.G.和D.GottliebThe utilization of carbon compounds by some Actinomycetales as anacid for species determination，J.Bacteriol，56107-114，1948)上測(cè)定碳源的利用情況。本研究中使用的顏色名稱采用MethuenHandbook of Colour(Kornerup，A.和J.H.WanscherMethuenHandbook of Colour，Methuen，London，1978)中所述的標(biāo)準(zhǔn)。細(xì)胞制備和二氨基庚二酸異構(gòu)體的檢測(cè)是按照Becker等人(Becker，B.，M.P.Lechevalier，R.E.Gordon和H.A.LechevalierRapid differentiationbetween Nocardia and Streptomyces by paper chromatography ofwhole-cell hydrolysates，Appl.Microbiol，12，421-423，1964)的方法進(jìn)行。全細(xì)胞糖類組分的測(cè)定是按照Lechevalier和Lechevalier(Lechevalier，M.P.和H.A.LechevalierChemical composition as acriterion in the classification of aerobic actinomycetes，Int.J.Syst.Bacteriol.，20，435-443，1970)的方法進(jìn)行。按照Reichert等人(KatrinReichert，Andre Lipski，Silke Pradella，Erko Stackebrandt和KarlheinzAltendorfPseudonocardia asaccharolytica sp.nov.andPseudonocardia sulfidoxydans sp.nov.，two new dimethyldisulfide-degrading actinomycetes and emended description of thegenus Pseudonocardia，Int.J.Syst.Bacteriol，48，441-449，1998)的方法測(cè)定16S rDNA的序列。并從DDBJ數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www.ddbj.nig.ac.jp)中檢索出模式菌株的16S rDNA序列。使用CLUSTAL程序建立系統(tǒng)發(fā)育樹(Thompson，J.D.，Gibson，T.J.，Plewniak，F(xiàn).，Jeanmougin，F(xiàn).和Higgins，D.G.The CLUSTAL Xwindows interfaceflexible stradesies for multiple sequence alignmentaided by quality analysis tools，Nucleic Acids Res，244876-4882，1997)。
菌株No.727713的細(xì)菌學(xué)特征如下。
表1和表2分別示出該菌株在不同瓊脂培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征和生理特征。所述菌株被觀察到在酵母提取物-麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基、燕麥粉瓊脂培養(yǎng)基以及蛋白胨-酵母提取物-鐵瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而在無(wú)機(jī)鹽-淀粉瓊脂培養(yǎng)基、甘油-天冬酰胺瓊脂培養(yǎng)基以及酪氨酸瓊脂培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。在腐殖酸-維生素瓊脂培養(yǎng)基上僅可見(jiàn)氣生菌絲體，其氣生菌絲團(tuán)的顏色為白色。生長(zhǎng)物反面的顏色為淡橙黃色。在胰蛋白胨-酵母提取物培養(yǎng)液和蛋白胨-酵母提取物-鐵瓊脂培養(yǎng)基中不產(chǎn)生類黑素。該菌株不產(chǎn)生可溶性色素。菌絲團(tuán)顏色對(duì)pH不敏感。
關(guān)于形態(tài)學(xué)特征，基質(zhì)菌絲體發(fā)育良好，并呈不規(guī)則分支狀?？捎^察到有膨大的菌絲片斷形成。這種菌株產(chǎn)生的氣生菌絲體上具有直的孢子絲，每個(gè)孢子絲包含10個(gè)以上的孢子。孢子呈梭形(1.6-2.3×0.5-0.6μm)。并且孢子表面光滑。未觀察到硬顆粒(scleroticgranules)、孢子囊以及游動(dòng)孢子或碎片。
菌株No.727713可在11-32℃的溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度是28℃。
在該菌株的全細(xì)胞水解物中能檢測(cè)到內(nèi)消旋二氨基庚二酸、乳糖和阿拉伯糖，細(xì)胞壁類型為IV型。
序列表中SEQ ID NO1為菌株No.727713的部分序列。菌株No.727713和假諾卡氏菌屬成員的16s rDNA序列的相似值為91.8-97.4％，在系統(tǒng)發(fā)育樹上形成單簇(數(shù)據(jù)未列出)。
基于上述形態(tài)學(xué)和化學(xué)特征以及系統(tǒng)進(jìn)化分析，認(rèn)為菌株No.727713屬于假諾卡氏菌屬(Pseudonocardia)(參見(jiàn)Lechevalier，M.P.和H.A.LechevalierChemical composition as a criterion in theclasification of aerobic actinomycetes，Int.J.Syst.Bacteriol.，20，435-443，1970；Pridham，T.G.，et al.Appl.Microbiol.654，1958)。因此，將該菌株命名為假諾卡氏菌No.727713(Pseudonocardia sp.No.727713)。該菌株已在國(guó)際承認(rèn)的用于專利程序的微生物保藏單位日本國(guó)家高級(jí)產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院(AIST)(地址日本茨城縣Tsukuba市東1丁目1番地1，AIST Tsukuba Central 6，郵編305-8566)保藏，保藏編號(hào)為FERM BP-7570(保藏日期2001年4月25日)。
表1 菌株No.727713的培養(yǎng)特征 縮寫A氣生菌絲體， G生長(zhǎng)， S可溶性色素， R反面顏色。
在30℃培養(yǎng)14天后可觀察到這些特征。并根據(jù)MethuenHandbook of Colour(Kornerup，A.和J.H.Wanscher，第三版，252頁(yè)，Methuen出版公司，倫敦，1978)所述方法來(lái)進(jìn)行顏色描述。
表2 菌株No.727713的生理特征 應(yīng)該理解WS727713的制備不限于利用本文所述的特定的生物，以所述的生物為例只是為了達(dá)到說(shuō)明的目的。本發(fā)明還包括使用能合成WS727713的任何突變株，所述的突變株包括自然突變株和將上述生物經(jīng)傳統(tǒng)方法，如重組DNA技術(shù)、X射線輻射、紫外線輻射以及使用N-甲基-N’-硝基-N-亞硝基胍和2-氨基嘌呤進(jìn)行處理等方法而得到的人工突變株。
WS727713的制備 在具有上述特性的化合物中，所述的WS727713化合物可以通過(guò)這樣的方式來(lái)制備在有氧條件下(例如振蕩培養(yǎng)和深層培養(yǎng)等)，將屬于假諾卡氏菌屬的WS727713產(chǎn)生菌培養(yǎng)在含有可同化碳源和氮源的培養(yǎng)基中。
培養(yǎng)基中優(yōu)選的碳源是碳水化合物，如葡萄糖、蔗糖、淀粉、果糖或甘油等。
優(yōu)選的氮源是花生粉、酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨、聚胨、麩質(zhì)顆粒、棉籽粉、大豆粉、大豆顆粒、玉米漿、干酵母、小麥胚等，以及無(wú)機(jī)和有機(jī)含氮化合物，如銨鹽(例如硝酸銨、硫酸銨和磷酸銨等)、尿素或氨基酸等。
可以方便地將碳源和氮源結(jié)合使用，而無(wú)需使用它們的純品，這是因?yàn)榧兌容^低的原料含有微量的生長(zhǎng)因子和相當(dāng)數(shù)量的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)素，而更適合使用。
當(dāng)需要時(shí)，可以在培養(yǎng)基中加入無(wú)機(jī)鹽，如碳酸鈉或碳酸鈣、磷酸鈉或磷酸鉀、氯化鈉或氯化鉀、碘化鈉或碘化鉀、鎂鹽、銅鹽、鋅鹽、鐵鹽或鈷鹽等。
如果有必要的話，特別是當(dāng)培養(yǎng)基中泡沫較多時(shí)，可以加入消泡劑，如液體石蠟、脂肪油、植物油、礦物油或硅樹脂等。
可以通過(guò)多種途徑實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)混合物的攪拌和通氣，如使用螺旋漿或類似的機(jī)械攪拌設(shè)備進(jìn)行攪拌，以及旋轉(zhuǎn)或振蕩發(fā)酵罐等。
發(fā)酵通?？梢栽诩s10℃-40℃，優(yōu)選為20℃-30℃下進(jìn)行約50小時(shí)-150小時(shí)，這些條件可根據(jù)發(fā)酵條件和規(guī)模而改變。
可以采用各種常規(guī)的用于回收和純化生物活性物質(zhì)的方法從所得發(fā)酵液中回收WS727713，例如，使用合適的溶劑或某些溶劑的混合物進(jìn)行溶劑萃取、層析或從合適的溶劑或溶劑混合物中進(jìn)行重結(jié)晶。
WS727713可以溶劑化物的形式存在，該溶劑化物也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，該溶劑化物優(yōu)選包括水化物和醇化物。
以下示出一些生物學(xué)數(shù)據(jù)作為說(shuō)明上述化合物生物學(xué)特性的實(shí)例。
試驗(yàn)1.結(jié)合測(cè)定 結(jié)合緩沖液的組成為25mM HEPES-KOH(pH 7.0)，1.5mMCaCl2，1mM MgSO4，100mM NaCl，1mM 1，10-二氮雜菲，0.2％ BSA，并且每100mL溶液加入1片CompleteTM蛋白酶抑制劑(由Boehringer-Mannheim出品)。結(jié)合測(cè)定按照Receptor Biology公司的方法經(jīng)改進(jìn)而進(jìn)行。膜懸浮液(25μL)、[125I]-NDP-MSH(25μL，NEN，3.08×10-11M終濃度)、緩沖液(50μL)和抑制劑于37℃孵育60min。然后混合物經(jīng)GF/C(在0.5％聚乙烯亞胺中預(yù)浸漬)過(guò)濾后，用冰冷的PBS(-)洗滌2次。干燥后，用Top計(jì)數(shù)器(由Packard公司出品)測(cè)定GF/C濾膜上俘獲的放射性活度。
在補(bǔ)充有10％FBS和抗生素的RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)B16細(xì)胞。并將已伸展未匯合的細(xì)胞用冰冷的PBS(-)洗滌2次后刮下來(lái)。然后將該細(xì)胞經(jīng)超聲處理后，在4℃下2,000rpm離心5min。將由此獲得的上清液在4℃下30,000rpm離心60min。分離得到的細(xì)胞膜部分用冰冷的PBS(-)懸浮，并在-80℃下貯存。
各種受體蛋白的終濃度如下MC1-R(B16)，0.139mg/mL；MC3-R(重組體*)，0.0693mg/mL；MC4-R(重組體*)，0.104mg/mL；MC5-R(重組體*)，0.070mg/mL(*由Receptor Biology公司出品)。
如表3所示，WS727713能抑制[125I]-NDP-MSH與黑皮質(zhì)素受體結(jié)合。結(jié)果顯示W(wǎng)S727713可以作為黑皮質(zhì)素受體的激動(dòng)劑或拮抗劑。
表3 WS727713和NDP-MSH對(duì)[125I]-NDP-MSH結(jié)合黑皮質(zhì)素受體的影響 試驗(yàn)2.WS727713劑量依賴性地降低LPS誘導(dǎo)的小鼠產(chǎn)生TNF-α 腫瘤壞死因子(TNF-α)是急性和慢性炎性疾病及損傷中的病理過(guò)程和機(jī)能失調(diào)的基礎(chǔ)。神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)肽α-MSH能調(diào)節(jié)包括TNF-α在內(nèi)的促炎細(xì)胞因子的活性和合成。為了對(duì)WS727713進(jìn)行試驗(yàn)，在兩次重復(fù)實(shí)驗(yàn)中向雄性小鼠(ICR)腹膜內(nèi)注射脂多糖(LPS；Sigma，L-3129，E.coli 0127:B8，100μg/只)的生理鹽水溶液或空白生理鹽水。在注射LPS之前30min的時(shí)候，腹膜內(nèi)注射WS727713。在注射WS727713的60mim之后處死小鼠。使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法來(lái)測(cè)定血清TNF-α的濃度(TNF-αELISA試劑盒；由Amersham公司出品)。結(jié)果見(jiàn)表4。
如表4所示，通過(guò)給藥WS727713，可以劑量依賴性地減少LPS誘導(dǎo)的TNF-α水平。結(jié)果表明WS727713具有黑皮質(zhì)素受體激動(dòng)劑的作用。
表4 WS727713對(duì)LPS誘導(dǎo)的小鼠TNF-α生成的影響 MC甲基纖維素 基本純的化合物WS727713是黑皮質(zhì)素受體MC1-R、MC3-R、MC4-R和/或MC5-R的調(diào)節(jié)劑，特別地是具有MC1-R激動(dòng)劑活性。含有基本純的化合物WS727713的藥物組合物可以用作炎癥或免疫疾病的治療和預(yù)防的藥物。此外，所述組合物可以用于治療炎癥，特別地是由NF-kB激活和/或炎性細(xì)胞因子的釋放而引起的炎癥。
而且，含有基本純的化合物WS727713的藥物制劑可以用于以下疾病的治療和預(yù)防 與慢性和急性炎癥及免疫調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病，如炎性腸病、腸激惹綜合征、腹部疾病、膽囊疾病、克隆氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、外傷性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)疹性關(guān)節(jié)炎、肌肉變性、胰腺炎(急性或慢性)、牛皮癬、腎小球腎炎、血清病、狼瘡(系統(tǒng)性紅斑狼瘡)、蕁麻疹、scleraclerma、硬皮病、慢性甲狀腺炎、Grave’s病(格雷夫斯病、毒性彌漫性甲狀腺腫)、皮炎(接觸性或特應(yīng)性)、外陰前庭炎綜合征、皮肌炎、脫發(fā)、異位性濕疹、魚鱗病、發(fā)熱、膿毒癥、偏頭痛、叢集性頭痛、阿爾茨海默病、帕金森病、克-雅二氏病、多發(fā)性硬皮病、結(jié)核、癡呆以及移植或移植物-宿主排斥(如腎、肝、心、肺、胰臟、骨髓、角膜、小腸、皮膚同種異體移植物、皮膚同種移植物和異種移植物等)。
呼吸器官變態(tài)反應(yīng)和疾病，如哮喘、急性呼吸窘迫綜合征、花粉癥、過(guò)敏性鼻炎和慢性阻塞性肺疾患；中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病，如HIV腦炎、腦型瘧、腦脊膜炎和共濟(jì)失調(diào)-毛細(xì)血管擴(kuò)張癥；疼痛，如術(shù)后痛、神經(jīng)肌肉痛、頭痛、癌癥引起的疼痛、牙痛和關(guān)節(jié)炎疼痛。
病毒和自身免疫疾病，如1型單純性皰疹病毒(HSV-1)感染、2型單純皰疹病毒(HSV-2)感染、巨細(xì)胞病毒感染、愛(ài)潑斯坦-巴爾病毒感染、人類免疫缺陷病毒(HIV)感染、艾迪生病(腎上腺自身免疫疾病)、原發(fā)性腎上腺功能不全、自身免疫多腺體疾病(也稱為自身免疫多腺體綜合征)、慢性活動(dòng)性肝炎或急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、自身免疫胃炎、自身免疫溶血性貧血和自身免疫中性白細(xì)胞減少癥；真菌感染，如蕈樣肉芽腫病。
心血管系統(tǒng)疾病，如動(dòng)脈粥樣硬化、移植造成的動(dòng)脈粥樣硬化、外周血管病、炎性血管疾病、間歇性跛行、再狹窄、腦血管中風(fēng)、短暫性缺血發(fā)作、心肌缺血和心肌梗塞。以及高血壓、高脂血癥、冠心病、不穩(wěn)定心絞痛、血栓形成、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集和/或由血栓形成和/或動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成而引起的后遺癥。
中風(fēng)和其它腦缺血性疾病和/或與所述疾病相關(guān)的神經(jīng)退行性改變，以及腦外傷后的神經(jīng)退行性改變或腦外傷后遺癥。
曬傷(曬斑)、痤瘡、白斑、局限性脫發(fā)、光過(guò)敏性疾病、白化病、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)病、干皮病及卟啉病。
神經(jīng)退行性疾病，如抑郁、焦慮、強(qiáng)迫癥(強(qiáng)制性障礙)、神經(jīng)官能癥、精神病、失眠(睡眠障礙)、睡眠性呼吸暫停以及毒品或藥物濫用。
男性性功能障礙，如陽(yáng)萎、性欲缺乏和勃起功能障礙(包括不能勃起或勃起維持時(shí)間短、不能射精、早泄或不能達(dá)到高潮)。女性性功能障礙，如性喚起障礙或與性欲、性接受度、性高潮和/或性功能觸發(fā)點(diǎn)紊亂相關(guān)的疾病，以及性交疼痛，早產(chǎn)，痛經(jīng)，月經(jīng)過(guò)多及子宮內(nèi)膜異位癥。
與體重有關(guān)的疾患，如肥胖癥和厭食(如食欲、代謝率、脂肪攝取或碳水化合物的需求發(fā)生改變所引起)，以及糖尿病(由糖耐量提高和/或胰島素抵抗降低所引起)。
肺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、卵巢癌，以及骨癌、皮膚癌(如黑素瘤侵襲)或者血管源性疾病(包括實(shí)體瘤的形成和生長(zhǎng))。
纖維變性疾病，如肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化、以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病。
動(dòng)物疾病，如動(dòng)物病毒感染包括貓免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒和犬免疫缺陷病毒。
眼色素層炎，特別是

氏綜合征和結(jié)節(jié)病，脈管炎和微生物感染。
本發(fā)明的藥物和化妝品組合物可以以藥物制劑的形式，例如固體、半固體或液體形式的藥物制劑而被應(yīng)用，所述的制劑含有作為活性組分的黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑，如化合物WS727713，其與適于外部、腸道或非胃腸道給藥的有機(jī)或無(wú)機(jī)載體或賦形劑一起構(gòu)成混合物?；钚越M分可以與(例如)通常無(wú)毒的、可藥用的載體混合，從而制成片劑、丸劑、膠囊、栓劑、溶液、乳劑、混懸劑、注射劑、軟膏、搽劑、滴眼劑、洗劑、凝膠劑、霜?jiǎng)┮约叭魏芜m合應(yīng)用的劑型。
所使用的載體可以是水、葡萄糖、乳糖、阿拉伯膠、明膠、甘露醇、淀粉糊、三硅酸鎂、滑石粉、玉米淀粉、角蛋白、膠態(tài)硅石、馬鈴薯淀粉、尿素和其他適于制備固體、半固體、液體制劑的載體物質(zhì)，此外，還可以使用輔助劑、穩(wěn)定劑、填充劑、增稠劑、增溶劑以及著色劑和香料。
當(dāng)將所述組合物用于人體時(shí)，優(yōu)選的是通過(guò)靜脈、肌肉、局部或口服給藥。黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑，如WS727713的有效治療劑量根據(jù)接受治療的每一個(gè)患者個(gè)體的年齡和身體條件而變化并取決于接受治療的患者的所述條件。在個(gè)體患者接受治療時(shí)，如果采用靜脈給藥，黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑，如WS727713的每日給藥劑量通常為O.001-100mg/kg體重；如果采用肌肉給藥，黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑，如WS727713的每日給藥劑量通常為0.001-100mg/kg體重；如果采用口服給藥，黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑，如WS727713的每日給藥劑量通常為0．01-320mg/kg體重。
下面給出實(shí)施例以便更具體地說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1 (1)用于制備WS727713的Pseudonocardia sp.No.727713的發(fā)酵 將1菌環(huán)量的斜面培養(yǎng)物接種于60mL已滅菌的種子培養(yǎng)基中，所述的種子培養(yǎng)基裝于225mL的廣口三角燒瓶中，其中含有2％可溶性淀粉、0.8％酵母提取物和0.5％瓊脂(滅菌前將pH調(diào)至7.0)。將三角燒瓶置于旋轉(zhuǎn)搖床(220rpm，5.1cm半徑)上，在30℃下孵育7天。然后按2％的接種量轉(zhuǎn)接入5瓶225mL廣口三角燒瓶中，每瓶裝有80mL與上述相同的、已滅菌的培養(yǎng)基中。將三角燒瓶置于旋轉(zhuǎn)搖床(220rpm，5.1cm半徑)上，在30℃下孵育4天。
將得到的種子培養(yǎng)物以2％的接種量接入裝有20L已滅菌的生產(chǎn)培養(yǎng)基的發(fā)酵罐(30L)中，所述生產(chǎn)培養(yǎng)基的組成為1％葡萄糖、1.5％可溶性淀粉、0.5％酵母提取物、1％β-環(huán)糊精、1％CaCO3、0.05％Adekanol LG-109(由日本Asahi Denka Kogyo K.K.公司出品)以及0.05％硅樹脂KM-70(由日本Shin-Etsu化學(xué)株式會(huì)社出品)，在滅菌前將培養(yǎng)基pH調(diào)至7.0。在28℃下以20L/min的通氣量和200rpm的攪拌速度發(fā)酵5天。
采用高效液相色譜分析法按以下所示的條件來(lái)監(jiān)測(cè)發(fā)酵液中WS727713的生成。
(分析型高效液相色譜條件) 柱 Mightysil RP-18 GP 150-4.6，5μm (5μm，4.6mm ID×150mm L，日本關(guān)東化學(xué)株式會(huì)社) 洗提液 CH3CN∶H2O＝35∶65 流速1mL/min. 溫度室溫 檢測(cè)UV在210nm波長(zhǎng)處 保留時(shí)間9.3min (2)WS727713的分離 培養(yǎng)完成后，在室溫和攪拌條件下，使用等量的丙酮對(duì)發(fā)酵液(16L)提取幾分鐘。并以硅藻土作為助濾劑將提取液過(guò)濾。濾液經(jīng)真空濃縮得到水溶液(15L)。將所得溶液上樣于Diaion HP20(由三菱化學(xué)株式會(huì)社出品)柱(800mL)，使用20％乙腈(4L)洗柱。再分別用40％乙腈(2.4L)和60％乙腈(3.6L)洗脫。用水將洗脫液(6.0L)稀釋至12L，然后通過(guò)1L的Daisogel SP-120-ODS-B(15/30μm，由日本大創(chuàng)株式會(huì)社出品)柱(已用水裝過(guò)柱)。用32.5％乙腈洗脫。使用分析型高效液相色譜按上述的條件監(jiān)測(cè)洗脫過(guò)程。將含有WS727713的級(jí)分合并，并真空濃縮得到粉末。將粉末溶于少量甲醇中，并通過(guò)水而結(jié)晶。過(guò)濾晶體，經(jīng)干燥后得到1.5g白色針狀的WS727713。
工業(yè)應(yīng)用 本發(fā)明所述的新化合物具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性，可以用作抗炎藥物的活性組分以及與黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病的治療和預(yù)防的藥物。
本申請(qǐng)是根據(jù)澳大利亞專利No.2004901919，并將其內(nèi)容以引用方式并入本文。
序列表
<110>日本藤澤藥品工業(yè)株式會(huì)社(Fujisawa Pharmaceutical Co.，Ltd.)
<120>新化合物
<130>09726
<150>AU2004901919
<151>2004-04-08
<160>1
<170>PatentIn version 3.2
<210>1
<211>1483
<212>DNA
<213>Pseudonocardia sp.No.727713
<220>
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<222>(469)..(470)
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<220>
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<220>
<221>misc_feature
<222>(836)..(836)
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<220>
<221>misc feature
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<223>n is a，c，g，or t
<400>1
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acgaagtcgt aacaaggtag ccgtaccgga aggtgcggct gta 148權(quán)利要求
1.一種基本純的化合物WS727713，該化合物具有以下性質(zhì)
a)分子式C30H44N8O8
b)1H核磁共振譜
(500MHz，DMSO-d6)δ9.76(1H，s，可交換)，8.76(1H，d，J＝7.5Hz，可交換)，8.23(1H，d，J＝5Hz，可交換)，7.76(1H，dd，J＝8.5和3Hz，可交換)，7.25-7.17(5H，m)，5.71(1H，dd，J＝10.5和5Hz)，5.08(1H，dd，J＝11和4Hz，可交換)，5.03(1H，m)，4.99(1H，m)，4.92(1H，m)，4.85(1H，m)，4.83(1H，d，J＝3Hz，可交換)，4.76(1H，br d，J＝12Hz，可交換)，4.12(1H，dd，J＝16.5和8.5Hz)，3.65(1H，dd，J＝16.5和3Hz)，3.58(1H，m)，3.07(1H，dd，J＝13.5和8.5Hz)，2.94(1H，br d，J＝13Hz)，2.86(1H，dd，J＝13.5和6Hz)，2.73-2.68(2H，m)，2.58(1H，m)，2.24(1H，br d，J＝13Hz)，2.08(1H，br d，J＝14Hz)，1.88(1H，m)，1.67(1H，m)，1.55(1H，m)，1.42-1.36(2H，m)，1.21(1H，m)，1.19(3H，d，J＝7Hz)，1.09(1H，m)，0.76(3H，d，J＝6.5Hz)，0.75(3H，d，J＝6.5Hz)；
c)13C核磁共振譜
(125MHz，DMSO-d6)δ173.8(s)，171.7(s)，170.4(s)，169.8(s)，169.1(s)，167.6(s)，137.2(s)，129.2(d)x2，128.0(d)x2，126.3(d)，60.2(d)，53.2(t)，51.1(d)，50.8(d)，49.6(d)，47.4(d)，47.0(t)，44.7(d)，41.2(t)，36.4(t)，35.4(t)，33.2(t)，23.6(d)，23.5(t)，23.1(q)，21.7(q)，21.0(t)，15.8(q)。
2.一種屬于假諾卡氏菌屬(Pseudonocardia)的放線菌株，該菌株的保藏編號(hào)為FERM BP-7570。
3.一種具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物，其是通過(guò)在培養(yǎng)基中培養(yǎng)權(quán)利要求2所述的放線菌株，然后從所述菌株的發(fā)酵液中回收該化合物而得到的。
4.一種權(quán)利要求1所述化合物WS727713的制備方法，該方法包括在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于假諾卡氏菌屬的WS727713產(chǎn)生菌，然后從所述菌株的發(fā)酵液中回收所述化合物。
5.權(quán)利要求4所述的制備方法，其中所述的屬于假諾卡氏菌屬的WS727713產(chǎn)生菌是權(quán)利要求2所述的放線菌株。
6.一種藥物組合物，該組合物含有權(quán)利要求1所述的化合物WS727713或其鹽，以及可藥用的、基本無(wú)毒的載體或賦形劑。
7.一種用作藥物或化妝品的權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽。
8.一種制備具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物的方法，該方法包括在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于假諾卡氏菌屬的、能產(chǎn)生具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物的放線菌株，并回收所述化合物。
9.一種具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物，其是通過(guò)在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于假諾卡氏菌屬的、能產(chǎn)生具有黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑活性的化合物的放線菌株，并從所述菌株的發(fā)酵液中回收該化合物而得到的。
10.一種包括權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽的黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑。
11.一種用于調(diào)節(jié)黑皮質(zhì)素受體的方法，該方法包括將權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽對(duì)人或動(dòng)物進(jìn)行給藥。
12.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽在制備用于調(diào)節(jié)黑皮質(zhì)素受體的藥物或化妝品中的應(yīng)用。
13.一種用于治療或預(yù)防疾病的藥物組合物，該藥物組合物包括權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽，以及一種可藥用的、基本無(wú)毒的載體或賦形劑；所述疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部和腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是Behcet氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲或厭食。
14.一種用于治療或預(yù)防疾病的方法，該方法包括將權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽對(duì)人或動(dòng)物進(jìn)行給藥；所述疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部和腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是Behcet氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲或厭食。
15.權(quán)利要求1所述的化合物或其鹽在制備用于治療或預(yù)防疾病的藥物中的應(yīng)用，所述疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部和腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是Behcet氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲或厭食。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用作黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)劑的新化合物。本發(fā)明特別涉及以下方面化合物WS727713；通過(guò)在培養(yǎng)基中培養(yǎng)屬于假諾卡氏菌屬(Pseudonocardia)的WS727713產(chǎn)生菌，并從培養(yǎng)物發(fā)酵液中回收所述化合物以便制備所述化合物的方法；含有所述化合物的藥物組合物；所述化合物在制備用于黑皮質(zhì)素受體調(diào)節(jié)的藥物和化妝品中的應(yīng)用；以及所述化合物在制備用于治療和預(yù)防下列疾病的藥物和化妝品中的應(yīng)用，所述疾病包括缺血/再灌注損傷、腦部和腎臟炎性疾病、肝炎、膿毒血癥/敗血病性休克、缺氧性休克、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、主動(dòng)脈反流(AR)、青少年慢性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、腎炎、誘導(dǎo)耐受、接觸性過(guò)敏反應(yīng)、腸炎(IBD)、性功能障礙、移植、疼痛、艾滋病、炎癥后色素減退、花斑癬、特發(fā)性滴狀色素減少癥、發(fā)熱、功能性腸疾病、肥胖、厭膩、糖尿病、皮膚外分泌腺調(diào)節(jié)、灰發(fā)(局限性灰發(fā))、白發(fā)、胰腺炎、纖維變性疾病(肥厚性瘢痕、瘢痕瘤、局限性硬皮病、系統(tǒng)性硬化、硬皮病性皮膚移植物抗宿主病、肝硬化、原發(fā)性和博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺纖維化以及環(huán)孢菌素誘導(dǎo)的腎病)、眼色素層炎(特別是Behcet氏綜合征和結(jié)節(jié)病)、脈管炎、微生物感染、腹部疾病、外陰前庭炎綜合征、黑素瘤侵襲、厭食等。
文檔編號(hào)A61K35/74GK1977040SQ20058001215
公開(kāi)日2007年6月6日 申請(qǐng)日期2005年3月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月8日
發(fā)明者大塚隆尚, 上田博嗣, 藤江敬子, 村松秀行, 橋本道真, 高瀨茂弘 申請(qǐng)人:安斯泰來(lái)制藥株式會(huì)社