專利名稱：含有丁苯酞的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及丁苯酞、丹參和降香的組合物，具體的說是丁苯酞、丹參和降香提取物用于預(yù)防和治療腦缺血疾病的復(fù)方制劑。
背景技術(shù)：
經(jīng)在整體動物、細胞和分子生物學(xué)等水平深入研究，證明丁苯酞具有以下藥理活性縮小局部腦缺血大鼠腦梗塞面積和改善神經(jīng)功能缺失；改善局部腦血流量，改善腦微循環(huán)；抗血栓的形成和抗血小板的凝聚作用；減輕局部腦缺血大鼠腦水腫；對損傷的神經(jīng)細胞有保護作用；改善小鼠全腦缺血能量代謝耗竭；改善局部腦缺血大鼠的記憶障礙等，臨床上用于治療急性缺血性腦卒中。
丹參中主要含有脂溶性成分二萜醌類化合物(丹參酮I、丹參酮IIA、丹參酮IIB、隱丹參酮等)及水溶性成分丹參素等酚酸類化合物(丹參素、丹參酚、丹參酸、原兒茶醛等)。這些有效成分能夠行氣開竅、活血化瘀、疏通阻塞血管，又有較強的鈣通道阻滯及β受體拮抗的作用，能促進神經(jīng)細胞突起再生，可使血管擴張、紅細胞變形性增強。降香主要化學(xué)成份為揮發(fā)油類和黃酮體化合物。降香揮發(fā)油灌胃可明顯抑制大鼠實驗性血栓形成；明顯提高孵育兔血小板cAMP的水平，對兔血漿纖溶酶活性有顯著促進作用，提示有抗血栓作用。臨床上二者常合用于冠心病、心絞痛、心肌梗塞，高血壓性腦出血及缺血性心腦血管疾病。
腦血管疾病是目前嚴重危害人類健康的主要疾病之一，缺血性腦血管病占腦血管病的大多數(shù)。隨著我國老齡化人口增加，缺血性腦血管病發(fā)病率也在不斷提高，因此對腦缺血疾病的防治為全社會所關(guān)注。近年來，國內(nèi)外市場對腦缺血疾病的用藥雖然各有特點，起到一定作用，但是這些藥物治療腦缺血疾病不夠理想。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種含有丁苯酞的組合物，用丹參或降香與之配伍，以及該組合物的合適劑型。
本發(fā)明的另一目的是該藥物組合物用于預(yù)防和治療腦缺血疾病。
本發(fā)明由丁苯酞、丹參提取物組成，所述的丁苯酞、丹參提取物的重量比為1∶1～3。
丹參提取物的制備丹參加水煎煮三次，第一次加8倍量水，煎煮2小時；第二、三次各加6倍量、5倍量水，每次煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮；加入乙醇使含醇量達75％，靜置40小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮；再加入乙醇使含醇量達85％，靜置40小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮；加入水，靜置16小時，濾過，濾液濃縮；加乙醇使含醇量達80％，靜置24小時，濾過，濾液濃縮至浸膏。
將丁苯酞、丹參提取物加入可藥用的賦形劑，制得相應(yīng)劑型。
將丹參浸膏在攪拌下加入油溶性稀釋劑，與丁苯酞相混合，得內(nèi)容物。
考慮囊重因素，每粒囊重一般以小于500mg為宜，含活性成分丁苯酞50mg，丹參提取物80～120mg，用常規(guī)方法制備囊材，加工成軟膠囊。
本發(fā)明還可以在含有丁苯酞、丹參提取物提取物的基礎(chǔ)上，添加降香提取物，丁苯酞、丹參提取物、降香提取物的重量比為1∶1～3∶1～3。
其中丁苯酞選自其消旋體、左旋體或右旋體。
丹參提取物的制備同上。
降香提取物的制備降香加水浸潤，進行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液，冷藏24小時，分取油層備用，水溶液濃縮至浸膏。
將丁苯酞、丹參提取物、降香提取物加入可藥用的賦形劑，制得相應(yīng)劑型。
將上述降香浸膏和丹參浸膏在攪拌下加入油溶性稀釋劑，與丁苯酞相混合，得內(nèi)容物。
油溶性稀釋劑選自植物油。
考慮囊重因素，每粒囊重一般以500mg為宜，含活性成分丁苯酞50mg，丹參提取物80～120mg，降香提取物80～120mg，用常規(guī)方法制備囊材，加工成軟膠囊。
經(jīng)過發(fā)明人反復(fù)研究，并通過動物實驗證實，丹參、降香提取物和丁苯酞合用能改善腦缺血大鼠的神經(jīng)功能評分和減少腦梗死范圍，推斷丹參和降香提取物與丁苯酞合用具有相加或者協(xié)同作用。
具體實施例方式
實施例1、分別制備丹參、降香提取物降香1000g加水浸潤，進行水蒸氣蒸餾，收集蒸餾液約500ml，冷藏24小時，分取油層備用，水溶液濃縮至浸膏，得降香提取物。
丹參1000g加水煎煮三次，第一次加8倍量水，煎煮2小時；第二、三次各加6倍量、5倍量水，每次煎煮1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至至670～760ml；加入乙醇使含醇量達75％，靜置40小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至330ml，再加入乙醇使含醇量達85％，靜置40小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮至200～300ml，阿加入注射用水1000～1650ml，靜置16小時，濾過，濾液濃縮至330ml，加乙醇使含醇量達80％，靜置24小時，濾過，濾液濃縮至浸膏，得丹參提取物。
實施例2、制備含有丁苯酞、丹參提取物、降香提取物的軟膠囊分別取實施例1中的降香提取物浸膏200g、丹參提取物浸膏200g，攪拌下加入大豆油500g，混勻，加入丁苯酞100g，繼續(xù)攪拌至全部混勻得內(nèi)容物；配制囊殼液，壓制軟膠囊。
實施例3制備含有丁苯酞、丹參提取物的軟膠囊取實施例1中的丹參提取物浸膏400g，攪拌下加入大豆油600g，混勻，加入丁苯酞200g，繼續(xù)攪拌至全部混勻得內(nèi)容物；配制囊殼液，壓制軟膠囊。
實施例4本發(fā)明對永久性腦缺血大鼠的神經(jīng)功能和腦梗塞范圍的影響實驗藥物同實施例2實驗動物雄性wistar大鼠實驗方法Wistar大鼠，腹腔注射12％水合氯醛350mg/kg麻醉，側(cè)臥位固定。于外耳道與眼眥連線中點切開皮膚，逐層分離肌肉，暴露顴弓和顳骨鱗部，鉸斷顴弓，在手術(shù)顯微鏡下，于顴弓和顳骨鱗部前連接處的前下方約2mm處，用牙科鉆開2mm直徑小顱窗，暴露大腦中動脈，將一小塊濾紙敷于中動脈處，將10μl的50％FeCl3滴于濾紙片上，30min后將濾紙片取出，并用生理鹽水清洗干凈，局部滴加2～3滴青霉素液(1.6×105U/mL)，以防傷口感染，逐層縫合。
實驗分組術(shù)后2h進行行為障礙程度評分，依據(jù)分值高低均勻分組，造型動物設(shè)6組，每組10只，評分結(jié)束后口服給藥，模型對照組給予生理鹽水，丁苯酞(50mg/kg)(簡稱A組)，丁苯酞(50mg/kg)和丹參、降香提取物(100mg)(簡稱B組)，丁苯酞(50mg/kg)和丹參、降香提取物(200mg/kg)(簡稱C組)，丁苯酞(50mg/kg)和丹參、降香提取物(300mg)(簡稱D組)分別按所寫劑量給藥，另設(shè)假手術(shù)組，手術(shù)操作與其它組相同，但中動脈未進行阻斷。
實驗結(jié)果(1)對神經(jīng)功能的影響假手術(shù)組動物行為無明顯改變，模型對照組動物與假手術(shù)組動物的評分比較有明顯差異(P＜0.01)。大鼠給予分別按照A、B、C、D各組所示劑量給藥后，神經(jīng)功能障礙評分有不同程度改善，與模型對照組比較，給藥后24h，A組、B組、C組、D組評分分別減少了19.5％、25.7％、32.9％、28.1％。
(2)對腦梗死范圍的影響模型組動物與假手術(shù)組動物比較梗塞范圍明顯增加(P＜0.01)。A組有減小腦梗死范圍的趨勢，但無顯著性差異。與模型對照組相比，B組、C組、D組腦梗死范圍分別縮小了32.9％、46.2％、40.1％。
從以上結(jié)果可知，丁苯酞和復(fù)方制劑對永久性缺血大鼠的神經(jīng)功能評分和腦梗死范圍方面確有作用，推斷丹參、降香提取物與丁苯酞合用具有協(xié)同或者相加作用，從以上數(shù)據(jù)可以說明丁苯酞(50mg/kg)和丹參、降香提取物(200mg/kg)的配合最優(yōu)，效果最為理想。
實施例5、本發(fā)明對腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能和腦梗死范圍的影響實驗動物同實施例2實驗儀器同實施例4實驗方法大鼠麻醉，側(cè)臥位固定，在手術(shù)顯微鏡下，沿頸正中線切開皮膚，暴露左側(cè)頸總動脈，小心去除頸總動脈分叉至顱底部的血管周圍的神經(jīng)及筋膜，依次分離頸外動脈分支枕動脈、甲狀腺上動脈、舌動脈和上顎上頜動脈，結(jié)扎，剪斷；分離頸內(nèi)動脈，并小心與迷走神經(jīng)分離，從根部結(jié)扎翼顎動脈。從頸外動脈游離端刺入帶有3#尼龍線(直徑0.285mm)的6#注射針頭，將尼龍線導(dǎo)入血管，并小心抽出針頭，從頸外動脈遠心端將尼龍線導(dǎo)入到頸內(nèi)動脈，插至Willis環(huán)處，以有效阻斷大腦中動脈，根據(jù)動物體重，所插入的尼龍線長度距頸總動脈分叉處18～20mm。然后將頸外動脈游離端連同腔內(nèi)尼龍線一并結(jié)扎，以防出血。逐層縫合肌肉和皮膚，局部滴加青霉素防止感染。為更有效阻斷大腦中動脈，尼龍絲線在使用前，其尖端在火焰邊燒圓鈍，并用0.1％多聚L-賴氨酸包裹，在60℃烤箱中烘烤1h，由于多聚L-賴氨酸能促使細胞和蛋白粘附到塑料表面，并能使帶負電荷的尼龍線表面變成帶正電荷，從而吸引內(nèi)皮細胞的陰離子部位，使尼龍線與內(nèi)皮表面緊密粘附，以防血流從絲線周圍漏流。假手術(shù)組動物僅分離出頸內(nèi)動脈。MCAO1h后，右側(cè)上肢未見明顯偏癱的大鼠以及隨后死亡者均從試驗中剔除。MCAO開始后1.5h，小心抽出頸內(nèi)動脈血管腔內(nèi)的尼龍線，使頸內(nèi)動脈再灌注。動物回籠飼養(yǎng)。
實驗分組丁苯酞(50mg/kg)為A組、丁苯酞(50mg/kg)和丹參(50mg/kg)為B組、丁苯酞(50mg/kg)和丹參(100mg/kg)為C組、丁苯酞(50mg/kg)和丹參(150mg/kg)為D組，分別予以所寫劑量給藥。
實驗結(jié)果1.對神經(jīng)功能的影響假手術(shù)組動物行為無明顯改變，模型對照組動物與假手術(shù)組動物的評分比較有明顯差異(P＜0.01)。大鼠口服給予四個劑量后，受損的神經(jīng)功能障礙評分有不同程度改善，丁苯酞的作用強度無明顯差別。B組、C組、D組作用較明顯(P＜0.05)。
2.對腦梗死范圍的影響模型組動物與假手術(shù)組動物比較梗塞范圍明顯增加。口服給予A組、B組、C組、D組苯酞均可明顯縮小腦缺血再灌注大鼠腦梗死范圍(P＜0.05)。與模型對照組相比，A組、B組、C組、D組四個劑量組的腦梗死范圍分別縮小了22.9％、30.1％、43.2％、35.5％。
從以上結(jié)果可知，丁苯酞和丹參提取物對缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能評分和腦梗死范圍方面確有作用，推斷丹參提取物與丁苯酞合用具有協(xié)同或者相加作用。綜合以上數(shù)據(jù)可以說明丁苯酞(50mg/kg)和丹參、降香提取物(100mg/kg)的配合最優(yōu)，效果較為理想。
權(quán)利要求
1.一種含有丁苯酞的組合物，由丁苯酞和丹參提取物組成，丁苯酞、丹參提取物的重量比為1∶1～3。
2.一種含有丁苯酞的組合物，由丁苯酞、丹參和降香提取物組成，丁苯酞、丹參和降香提取物的重量比為1∶1～3∶1～3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述含有丁苯酞的組合物，其特征是丁苯酞選自其消旋體、左旋體或右旋體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述含有丁苯酞的組合物，其特征是加入可藥用賦形劑，制得相應(yīng)劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述含有丁苯酞的組合物，其特征是軟膠囊劑型。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述含有丁苯酞的組合物，其特征是軟膠囊內(nèi)容物含有稀釋劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述含有丁苯酞的組合物，其特征是稀釋劑選自植物油。
全文摘要
本發(fā)明涉及丁苯酞、丹參和降香的組合物，具體的說是丁苯酞、丹參提取物或者是丁苯酞、丹參提取物、降香提取物的復(fù)方制劑，在預(yù)防和治療腦缺血疾病中的應(yīng)用。該組合物的藥效實驗顯示具有協(xié)同或者相加作用。
文檔編號A61P9/00GK1853672SQ20051007054
公開日2006年11月1日 申請日期2005年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月28日
發(fā)明者劉振濤, 楊麗英, 郭文敏, 申東民, 李清娟 申請人:石藥集團中奇制藥技術(shù)(石家莊)有限公司