專利名稱：黃芪多糖在治療或預(yù)防胰島素抵抗的藥中應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)用醫(yī)藥，更具體涉及一種預(yù)防和治療胰島素抵抗的藥中的用途，適用于糖尿病及其血管病變、糖尿病肝病、腎病以及冠狀動(dòng)脈病變等的治療或預(yù)防。
背景技術(shù)：
胰島素抵抗是糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化和高血壓等疾病的共同土壤，是嚴(yán)重危害人類健康的常見、多發(fā)病。胰島素抵抗若不能盡早治療和預(yù)防，將發(fā)展為2型糖尿病、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓等疾病。尤為引人注目的是2型糖尿病，約占糖尿病患者總數(shù)的90％-95％。由于老年人口增加、肥胖和缺乏鍛煉等不良生活方式的普遍化，2型糖尿病正成為一種非常普遍的慢性病，還因其高發(fā)病率和死亡率已成為繼癌癥和心腦血管病之后人類健康的第三大“殺手”。因此，加強(qiáng)胰島素抵抗的防治對預(yù)防糖尿病的發(fā)生尤為迫切。目前，尚無一種有效而無害的防治胰島素抵抗的藥物面世。
首先介紹目前國內(nèi)外治療糖尿病藥物的現(xiàn)狀及研發(fā)情況第一類胰島素增敏劑目前國內(nèi)外主要使用的是TZD類藥物即噻唑烷二酮類(太羅)。代表藥物有羅格列酮(史克比)和吡格列酮(武田)，作用這類藥物作用于過氧化酶增殖劑激活受體-γ，簡稱PPAR-γ，能增加周圍組織(肌肉和脂肪組織)對葡萄糖的利用率及降低肝臟對葡萄糖的輸出率。因此又叫胰島素增敏劑。通過調(diào)動(dòng)周圍組織的“積極性”，提高周圍組織對胰島素的敏感性、發(fā)揮胰島素的降糖效率，保護(hù)受損的胰島細(xì)胞，使得殘存胰島功能得到恢復(fù)。
應(yīng)用前景及缺點(diǎn)這類藥物是臨床上所有2型糖尿病人的首選藥物，與其他口服藥物相比較為安全有效。其缺點(diǎn)是可引起體重增加，水腫及貧血，而體重增加是糖尿病患者的大忌。
此外還有一些同類衍生物問世，其作用機(jī)制與羅格列酮類似，均為小分子化合物①M(fèi)CC2555(isaglitazone)MCC2555是三菱制藥公司開發(fā)的口服降糖藥。本品為TZD類衍生物，作用于過氧化物酶增殖活化受體(peroxisome pro2liferationactivated receptor-γ，PPAR γ)，能降低IR，同時(shí)還能治療脂肪沉滯性動(dòng)脈硬化癥。目前已在美國和歐洲進(jìn)入二期臨床試驗(yàn)階段。②KRP-297KRP-297是杏林制藥公司開發(fā)的治療II型糖尿病的口服藥物。它有激動(dòng)PPAR γ/α受體的雙重作用，可以提高胰島素敏感性，改善脂質(zhì)和脂蛋白的特性。目前已在日本和美國進(jìn)入三期臨床試驗(yàn)階段。缺點(diǎn)頭痛、腹瀉和疲勞乏力。③FK2614FK-614是藤澤制藥公司開發(fā)的口服降糖藥?，F(xiàn)已在美國和日本進(jìn)入二期臨床試驗(yàn)階段。相關(guān)臨床數(shù)據(jù)未見報(bào)道。④BMS-298585(muraglitazar)BMS2298585是Bristol2MyersSquibb開發(fā)的治療2型糖尿病、肥胖和其他代謝失調(diào)癥的藥物。本品為氨基乙酸類似物，具有PPARα/γ雙重激動(dòng)作用。二期臨床已經(jīng)完成，計(jì)劃進(jìn)入三期臨床試驗(yàn)。⑤GW2409544GW2409544是GlaxoSmithKline公司開發(fā)的PPARα/γ雙重激動(dòng)劑，用于治療2型糖尿病和混合血脂異常。目前已在美國和英國進(jìn)入三期臨床試驗(yàn)階段。相關(guān)臨床數(shù)據(jù)未見報(bào)道。
上述藥物大多尚未上市，而且，因其為小分子化合物，其副作用也不容忽視。
目前進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的胰島素抵抗改善藥還有一部分為非TZD結(jié)構(gòu)。研究發(fā)現(xiàn)，替代TZD結(jié)構(gòu)而得到的化合物仍然具有藥理活性，因此非TZD類胰島素抵抗改善藥正成為新的研究方向。
第二類雙胍類此類藥物包括苯乙雙胍(降糖靈)和二甲雙胍(降糖片)作用是增加周圍組織對葡萄糖的利用和抑制腸道對葡萄糖的吸收，抑制肝糖異生和肝糖輸出。
應(yīng)用前景及缺點(diǎn)與磺脲類相比，二甲雙胍降糖作用相對緩和，低血糖發(fā)生少。因此二甲雙胍已成為臨床應(yīng)用最廣泛的雙胍類藥物，主要用于聯(lián)合用藥，治療肥胖型糖尿病患者。苯乙雙胍有嚴(yán)重的乳酸酸中毒副作用，在許多國家已被禁止使用，國內(nèi)臨床也在減少用量。而二甲雙胍可完全避免乳酸酸中毒。
第三類α-葡萄糖苷酶抑制劑代表藥物有阿卡波糖(acarbose，德國拜耳)和伏格列波糖(日本武田)。
作用是是通過抑制α-葡萄糖苷酶，減慢水解及產(chǎn)生葡萄糖的速度并延緩葡萄糖的吸收，從而降低餐后血糖。它還有一定的降血脂作用，能防治糖尿病的慢性并發(fā)癥。
應(yīng)用前景與缺點(diǎn)抑制α-葡萄糖苷酶的作用是可逆的，所以向葡萄糖的轉(zhuǎn)化僅僅是推遲，而不是完全阻斷。其嚴(yán)重的胃腸道反應(yīng)和昂貴的價(jià)格使之應(yīng)用受限。
第四類胰島素分泌促進(jìn)劑分為磺脲類藥物及格列萘藥物，以及非磺酰脲類胰島素分泌促進(jìn)劑。
前者的發(fā)展經(jīng)歷了三代第一代主要是甲苯磺丁脲和氯磺丙脲；第二代有格列本脲(優(yōu)降糖)、格列齊特(達(dá)美康)、格列吡嗪(美吡達(dá))和格列喹酮(糖適平)等；第三代有格列美脲等。目前我國臨床上所用的主要是第二代，第一代仍有少量使用，第三代尚未見臨床應(yīng)用報(bào)道。
作用是刺激胰島素的分泌。
應(yīng)用前景及缺點(diǎn)早期產(chǎn)品因僅能夠刺激胰島素分泌付出的代價(jià)是胰島β細(xì)胞“勞累過度”，最終將導(dǎo)致胰島細(xì)胞衰竭！這種拔苗助長的治療理念忽視了長期刺激帶病工作的胰島細(xì)胞會產(chǎn)生負(fù)面效應(yīng)，會導(dǎo)致胰島細(xì)胞功能的過早衰竭，并發(fā)癥提前出現(xiàn)，那將造成難以挽回的生命代價(jià)。目前第三代產(chǎn)品格列美脲能增強(qiáng)胰島素的敏感性，依然具有一定的促進(jìn)胰臟β-細(xì)胞胰島素的分泌作用。
后者即非磺酰脲類胰島素分泌促進(jìn)劑此類藥物和SU類藥物結(jié)構(gòu)雖然不同，但作用機(jī)制卻有相同之處，均為促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素，不同之處在于它們與β細(xì)胞結(jié)合的部位不同。已上市的藥物有瑞格列奈(repaglinide，德國Boehringer Ingelheim)和那格列奈(nateglinide，HMR公司和日本山之內(nèi))。處于三期臨床試驗(yàn)階段的藥物有Kissei公司的mitiglinide。
應(yīng)用前景與缺點(diǎn)因?yàn)樽饔脵C(jī)制與前一種有相同之處，均為促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素，因此也具有前述副作用。
第五類 口服胰島素作用近年來研制的口服胰島素，可模仿生理性胰島素分泌，有效地降低血糖。
應(yīng)用前景及缺點(diǎn)這類藥物引起低血糖和體重增加。一般不作為2型糖尿病患者首選或常規(guī)給予主要用于1型糖尿病患者。目前研究的劑型有膠囊、膠丸、微囊，也有用凝膠、片劑及油水合成的復(fù)合包裹性乳液。
根據(jù)臨床應(yīng)用情況，以上治療胰島素抵抗/2型糖尿病的藥物可以簡要匯總?cè)缦?

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是在于提供一種黃芪多糖在治療或預(yù)防胰島素抵抗中的應(yīng)用，還可作為含2型糖尿病及其他胰島素抵抗相關(guān)代謝疾病(特別是肥胖癥)的藥物和保健品原料。該黃芪多糖具有減輕體重、降低血糖、降低血脂、改善糖耐量異常，減少腹部脂肪，增加胰島素敏感性，其療效顯著、標(biāo)本并治、作用確鑿，是安全無毒的中藥制劑，可作為胰島素增敏劑。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療四氧嘧啶誘導(dǎo)的1型糖尿病的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療2型糖尿病的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療預(yù)防胰島素抵抗的高糖連續(xù)輸注的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療糖尿病的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療糖尿病引起心臟病的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療糖尿病脂肪性肝病的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療糖尿病引起腎病的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療肥胖癥的藥中的應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療或預(yù)防胰鈧素抵抗引起的肝臟病理損傷的藥中應(yīng)用。
本發(fā)明涉及黃芪多糖作為制備治療心血管病變的藥中應(yīng)用。
研究開發(fā)具有預(yù)防和治療胰島素抵抗包括2型糖尿病及其他胰島素抵抗相關(guān)代謝疾病，同時(shí)具有減輕肥胖的藥物是目前國內(nèi)外關(guān)注的熱點(diǎn)方向。開發(fā)的黃芪多糖通過大量實(shí)驗(yàn)顯示出確鑿而明顯的降糖降脂減輕體重的多重功效，相應(yīng)在胰島素抵抗，2型糖尿病及其他胰島素抵抗相關(guān)疾病(特別是肥胖癥)的應(yīng)用領(lǐng)域具有以上所用藥物不可替代的優(yōu)勢，而且大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果從各個(gè)層面對其藥理作用機(jī)理的解釋是目前大多數(shù)中草藥所望塵莫及的。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案黃芪多糖的制備1.提取采用優(yōu)化水煎提取工藝并略作改進(jìn)提取黃芪多糖。取黃芪藥材，切成約0.5cm厚的飲片，80℃烘干，粉碎。加8倍水，煮2h，過濾；殘?jiān)?倍量水，煮沸1h，過濾；殘?jiān)偌?倍量水，煮沸0.5h，過濾，合并三次濾液，濃縮到1∶1。Sevag法去蛋白，即在濾液中加入氯仿-戊醇5∶1混和物劇烈振搖10min，反復(fù)10次。蒸餾水透析24h。加3倍量無水乙醇，攪拌，放置12h，離心，將沉淀蒸干。再加水溶解，加入3倍量乙醇，沉淀離心，蒸干，即得黃褐色粗多糖，稱重，與取藥材量相比，即得收率。
2.純化Sephadex G-150柱層析稱取15克Sephadex G-150，用200ml蒸餾水室溫處理8小時(shí)，使之充分溶脹。濕法裝于72×2.7cm層析柱中。將1克黃芪多糖粗品溶于0.1mol/L NaCl溶液中，加到層析柱上，用0.1mol/L NaCl溶液洗脫，流速0.5ml/min。每管2ml，硫酸-苯酚法隔管檢測，合并單一峰，冷凍干燥，得黃芪多糖精品。
3.多糖含量測定(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液配制取干燥至恒重的葡萄糖100mg，定容到100ml；(2)苯酚液的配制取苯酚100克，加鋁片100mg與碳酸氫鈉50mg，蒸餾收集182℃餾分，稱取此餾分10克，加水150ml，置于棕色瓶中。
(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作精密吸取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖0、10、20、40、60、80、100微升，分置于具塞試管，各加蒸餾水至2ml，再各加苯酚溶液1ml，搖勻，迅速滴加濃硫酸5ml，搖勻放置5分鐘，置沸水浴加熱15分鐘，取出冷卻到室溫，于490nm處測定吸收度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4)樣品測定取50mg多糖樣品，定容到100ml，取50μl按標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定方法測定吸收度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出多糖的含量。
APS的收率為2.0％，總多糖含量為38.5％。提取的APS為淡褐色可溶于水的粉末。使用前用蒸餾水新鮮配置成20g/L的溶液。
另外提純的黃芪多糖可作為改善胰島素抵抗的口服液、膠囊、片劑、散劑和丸劑的原料藥。
一種治療及預(yù)防胰島素抵抗及其相關(guān)疾病包括糖尿病、肥胖癥、糖尿病血管病變、糖尿病肝病、糖尿病腎病以及冠狀動(dòng)脈病變等的黃芪多糖片劑重量配比為(單位克)黃芪多糖粉末30、十二烷基硫酸鈉(沖成漿狀)45～50每10萬片、12％羧甲基淀粉(沖成漿狀)、硬酯酸鎂3000每10萬片制備方法將黃芪多糖粉末與十二烷基硫酸鈉和羧甲基淀粉混合攪拌均勻制成軟材，濕潤劑亦可用50％的乙醇，過篩，干燥(溫度90℃左右)，最后加入硬酯酸鎂混勻，壓片，片重約0.6克?？诟?，一次1～2片，一日2～3次，小兒可酌情減量。
一種治療及預(yù)防胰島素抵抗及其相關(guān)疾病包括糖尿病、肥胖癥、糖尿病血管病變、糖尿病肝病、糖尿病腎病以及冠狀動(dòng)脈病變等的黃芪多糖散劑重量配比為(單位克)黃芪多糖紛末1.0、木糖0.1、羧甲基淀粉0.8、阿拉伯膠0.2、蛋白Q.S.、3.5％單硬酯酸甘油酯Q.S.
制備方法黃芪多糖粉末與木糖、羧甲基淀粉、阿拉伯膠、蛋白混合并通過二號篩制成顆粒并于60℃以下干燥后經(jīng)3.5％單硬酯酸甘油酯處理后制成散劑并稱定重量，從原黃芪多糖的含量計(jì)算應(yīng)服的劑量，成人每天服用安全劑量在3.3～5.1克/天，一天一次，成人體重按60公斤計(jì)算，小兒可酌情減量。
一種治療及預(yù)防胰島素抵抗及其相關(guān)疾病包括糖尿病、肥胖癥、糖尿病血管病變、糖尿病肝病、糖尿病腎病以及冠狀動(dòng)脈病變等的黃芪多糖蠟丸劑重量配比為(單位克)黃芪多糖紛末120～160、米蠟15～20制備方法取黃芪多糖藥粉120～160克，另取米蠟15～20克加熱熔化后與黃芪多糖藥粉研勻，制丸，每丸3克，用蠟皮封固?？诟?，一次一丸，一日1～2次，小兒可酌情減量。
一種治療及預(yù)防胰島素抵抗及其相關(guān)疾病包括糖尿病、肥胖癥、糖尿病血管病變、糖尿病肝病、糖尿病腎病以及冠狀動(dòng)脈病變等的黃芪多糖膠囊制備方法取黃芪多糖藥粉0.3～0.6克(每粒填充量)，1號軟膠殼按以下配比制備明膠∶阿拉伯膠∶甘油∶整餾水＝10∶1∶10.4∶16.7，裝入黃芪多糖藥粉包裝成形。口腹，一次2粒片，一日2～3次，小兒可酌情減量。
本發(fā)明將APS應(yīng)用于治療五種不同的動(dòng)物模型包括四氧嘧啶(alloxan)誘導(dǎo)的1型糖尿病(大鼠)模型、高糖高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素復(fù)制的胰島素抵抗和2型糖尿病大鼠模型、高糖連續(xù)輸注的胰島素抵抗大鼠模型、遺傳性肥胖型2型糖尿病小鼠(KKAy)模型、高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)的胰島素抵抗小鼠動(dòng)物模型中均顯示出良好的減輕肥胖程度，降低體重，降低血糖，降低胰島素抵抗指數(shù)，改善糖耐量異常，改善高胰島素血癥，提高胰島素敏感性的作用?？勺鳛橐葝u素增敏劑使用。
通過提取和制備的黃芪多糖在下述疾病中的應(yīng)用1.黃芪多糖作為制備治療四氧嘧啶(alloxan)誘導(dǎo)的1型糖尿病(大鼠)的藥中的應(yīng)用選取SD大鼠30只，雌雄不限，體重221.4±16.98g，隨機(jī)分為三組，每組10只(1)正常對照組(control)(2)糖尿病組(DM)，alloxan 200mg/kg腹腔注射，注射后72h，預(yù)測血糖在11.1mmoll以上者為造模成功。每日腹腔注射生理鹽水。(3)黃芪多糖治療組(APS)，經(jīng)alloxan造模成功后，每日腹腔注射APS注射液400mg/kg，連續(xù)五周。以上三組每日均給予高糖高脂飲食。觀測大鼠的精神、毛發(fā)、活動(dòng)、體重、飲食等。分別于治療2周后、5周取尾靜脈血，用one touch II血糖分析儀測定血糖。糖尿病大鼠出現(xiàn)毛發(fā)干枯、雜亂、脫落、倦臥活動(dòng)減少，食量減少，大便稀溏等。給予APS治療后，大鼠精神好轉(zhuǎn)，毛發(fā)光整、有色澤，活動(dòng)增多，食量增加。APS+DM組血糖明顯低于DM組，2.黃芪多糖作為制備治療2型糖尿病及減輕肥胖的藥中(大鼠)的應(yīng)用高糖高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素處理10周齡SD大鼠復(fù)制胰島素抵抗和II型糖尿病模型；給予高脂飲食(high-fat diet，HFD)(41％脂肪，41％碳水化合物和18％蛋白質(zhì))。鏈脲佐菌素(STZ)(30mg/kg，溶于0.1mol/L檸檬酸緩沖鹽溶液，pH4.5)或等體積的檸檬酸緩沖鹽溶液。注射后動(dòng)物自由進(jìn)食、進(jìn)水并維持高脂飲食。STZ注射72小時(shí)后，測動(dòng)物空腹血糖，大于6.7mmol/L者可診斷為糖尿病。APS治療能顯著降低HFD/STZ糖尿病鼠體重(P＜0.01)，而對正常大鼠無影響。APS(400mg/kg/d po)治療5周后，TIIDM大鼠的空腹和餐后血糖明顯下降(P＜0.05)，并不影響TIIDM和正常對照鼠的血胰島素水平?？擅黠@提高TIIDM大鼠減弱的胰島素敏感性。而且模型組空腹和餐后血糖以及體重都明顯高于兩個(gè)對照組，當(dāng)用黃芪多糖治療組血糖明顯降低而且體重恢復(fù)正常，兩對照組各項(xiàng)指標(biāo)無明顯差異。
3.黃芪多糖作為制備預(yù)防胰島素抵抗的高糖連續(xù)輸注(大鼠)的藥中應(yīng)用采用葡萄糖輸注大鼠模型動(dòng)態(tài)地觀察胰島素狀態(tài)向糖尿病狀態(tài)的轉(zhuǎn)變。在本模型中，持續(xù)的全身葡萄糖超負(fù)荷導(dǎo)致胰島素抵抗(正常血糖/高胰島素血癥，normoglycemia/hyperinsulinemia)，然后導(dǎo)致TIIDM狀態(tài)(高血糖/正常胰島素，hyperglycemia/normoinsulinemia)。本模型模擬了營養(yǎng)超負(fù)荷患者的病理生化情況和隨后的由于脂肪和骨骼肌組織脂質(zhì)蓄積增加而導(dǎo)致的胰島素抵抗。持續(xù)輸注葡萄糖(GI)10天導(dǎo)致一過性高血糖和持續(xù)的高胰島素血癥。在第10天，GI鼠血糖濃度較對照組稍高，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GI到第15天，增加的血胰島素濃度恢復(fù)到正常，而血糖濃度增加。因此在本模型中，大鼠在第10天前發(fā)展為胰島素抵抗，到第15天時(shí)為II型糖尿病。
4.黃芪多糖作為制備治療糖尿病及由其引起的心臟病、脂肪性肝病、腎病和治療肥胖的藥中的應(yīng)用雌性KKay小鼠和C57BL/6J小鼠各22只均購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心，鼠齡8周，飼養(yǎng)于武漢大學(xué)P3動(dòng)物中心標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)房(設(shè)施環(huán)境合格證號No.SCXK 2003-0003)，室溫20℃，相對濕度50％～80％，每日光照12h，自由攝食、飲水，每周監(jiān)測體重。KKAy鼠投予標(biāo)準(zhǔn)高脂顆粒飼料(由中科院提供)，C57BL/6J鼠投予普通小鼠飼料。于第12周末測定尾靜脈血糖，隨機(jī)血糖大于13.9mmol/L者診斷為糖尿病。給予APS灌胃(700mg/kg/day)治療8周后，結(jié)果顯示黃芪多糖可降低糖尿病小鼠血糖水平，改善其糖耐量，提高其胰島素敏感性，降低其胰島素抵抗指數(shù)，減少其內(nèi)臟脂肪含量，減輕糖尿病小鼠肝臟脂肪變性及纖維增生，KKAy組肝脂肪變性、膠原沉積、胞漿疏松、可見部分血管病變；KKAy+APS組各種病變均較輕，而對正常對照組小鼠無影響。腎臟病理損傷改變KKAy組腎小球纖維化，腎小球基底膜增厚系膜基質(zhì)增生，腎小管中可見蛋白管型，腎小球出球和入球小動(dòng)脈壁玻璃樣變性，KKAy+APS組各種病變均較輕，而對正常對照組小鼠無影響。
對遺傳性糖尿病小鼠(KKAy)，APS治療能減輕心肌超微結(jié)構(gòu)損傷，使線粒體結(jié)構(gòu)恢復(fù)正常肌纖維排列整齊。
5.黃芪多糖作為制備治療或預(yù)防胰島素抵抗引起的肝臟病理損傷藥中的應(yīng)用選取C57BL/6J小鼠40只，隨機(jī)分為4組。證實(shí)APS的胰島素增敏作用和降糖的效果。
上述動(dòng)物經(jīng)分別設(shè)正常對照組、APS正常對照組、胰島素抵抗組(IR)和黃芪多糖(APS)治療組，APS口服或腹腔注射治療5～8周后采血檢測血糖、血脂、血胰島素、糖耐量以及胰島素抵抗指數(shù)。并檢測肌肉和肝臟變化。本實(shí)驗(yàn)成功的建立了高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)的胰島素抵抗動(dòng)物模型，具有肥胖，高胰島素，低胰島素敏感性特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)性胰島素抵抗小鼠，其空腹血糖處于正常范圍。在給予高脂飲食同時(shí)，給予APS治療，12周后，顯示APS具有較好的降低肥胖程度，改善高胰島素血癥，提高胰島素敏感性的作用。同時(shí)我們觀察APS對肝臟及腎臟病理改變的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗組肝脂肪變性、胞漿疏松；胰島素抵抗黃芪多糖預(yù)處理組各種病變均明顯減輕。
6.黃芪多糖作為制備治療糖尿病引起的心血管病變藥中的應(yīng)用30只SD大鼠隨機(jī)分成正常對照組、四氧嘧啶糖尿病組與糖尿病黃芪多糖(APS)治療組(黃芪多糖400mg/kg/d腹腔注射)，5周后應(yīng)用形態(tài)定量的方法比較各組的心肌病理檢查結(jié)果。
心肌取自左心室前壁中部，福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包理，切片作HE及PASM染色，并作Luminin及膠原IV染色，備測心肌毛細(xì)血管基底膜厚度。應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析儀，在200倍光鏡下計(jì)數(shù)毛細(xì)血管斷面，計(jì)算平均毛細(xì)血管密度，毛細(xì)血管基底膜厚度，毛細(xì)血管與肌纖維數(shù)計(jì)數(shù)比率。本研究結(jié)果證實(shí)，APS能減輕alloxan導(dǎo)致的糖尿病大鼠內(nèi)皮細(xì)胞損傷。
本發(fā)明與現(xiàn)有的口服降糖藥相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果1、采用了優(yōu)化水煎提取工藝，同時(shí)略作改進(jìn)從膜莢黃芪藥材中提取了所需的具有藥理作用的黃芪多糖有效成分。一方面提高藥物純度使藥物更易吸收，另外減少雜質(zhì)對藥理作用發(fā)揮的干擾，增進(jìn)了藥物的療效。
2、本發(fā)明提取工藝簡單，成熟，成本適中、藥物療效保證、易于吸收、易于工業(yè)生產(chǎn)。
3、本發(fā)明取材為傳統(tǒng)中草藥，藥材分布廣泛，資源豐富極有開發(fā)價(jià)值。
4、本發(fā)明采用黃芪多糖治療五種不同的胰島素抵抗動(dòng)物模型，均顯示出良好的減輕肥胖程度，降低體重，降低血糖，降低胰島素抵抗指數(shù)，改善糖耐量異常，改善高胰島素血癥，提高胰島素敏感性的作用。尤其是對胰島素抵抗階段的作用更為顯著。其療效顯著，機(jī)理確鑿、重復(fù)性好，無毒、副作用，可作為胰島素增敏劑使用。
5、藥理研究表明，本發(fā)明對胰島素抵抗，糖尿病的慢性并發(fā)癥(含糖尿病心臟病變、肝臟病變、腎臟病變以及糖尿病視網(wǎng)膜病變)均有良好的預(yù)防和治療作用，標(biāo)本兼治，防患于未然。
6、通過大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示本發(fā)明安全、天然無毒。這一點(diǎn)是目前臨床上各類胰島素增敏劑所望塵莫及的，因此大有研究及市場開發(fā)前景。


圖1.APS對T2DM大鼠胰島素敏感性的影響.T2DM大叔的胰島素敏感性顯著低于正常組，APS治療可明顯改善T2DM大鼠減弱的胰島素敏感性。bP＜0.05vs control；eP＜0.05vs TIIDM group圖2A遺傳性糖尿病小鼠治療前后體型比較(左治療后KKAY+APS，右未治療KKAY)KKAy組小鼠毛發(fā)枯黃、雜亂、倦臥、活動(dòng)減少、大便稀清、體重明顯高于其它各組(p＜0.01)。與KKAy相比，KKAy+APS組小鼠精神較好，毛發(fā)光潔，愛活動(dòng)，多飲、多食、多尿癥狀明顯改善，體重及內(nèi)臟脂肪及肝指數(shù)明顯降低(p＜0.01)。圖2B飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗C57BL/6小鼠給藥前后體形的比較(左治療后C57BL/6J+APS，右未治療C57BL/6J)，同樣是高熱量飲食，APS預(yù)處理小鼠后，給藥組體形未出現(xiàn)肥胖，且與正常對照組相比體重?zé)o明顯增加(P＞0.05)，而未治療組與正常組和APS治療組相比體重都有明顯增加(P＜0.05)，動(dòng)物出現(xiàn)肥胖體態(tài)。
圖3APS對GLUT4轉(zhuǎn)位的影響圖中顯示糖尿病黃芪多糖治療組(KKAY+APS)，兩個(gè)正常對照組(control)和(control+APS)在胰島素刺激以后胞膜中GLUT4明顯多于無胰島素刺激時(shí)即基礎(chǔ)狀態(tài)下胞膜中該蛋白的表達(dá)，但是糖尿病組(KKAY)胰島素刺激前后胞模中GLUT4表達(dá)無無明顯改變。，*P＜0.05vs Basic statement of each group圖4Western Blotting檢測肝糖原合成酶活性(x±s)用磷酸化糖原合成酶pser641-GS表達(dá)量來間接反映酶活性的改變，即各組P-GS/GAPDH的表達(dá)量的差異，并以C57BL/6J組作為100％。由圖5可見p-GS(無活性形式)KK組、K+A組均較C組表達(dá)增強(qiáng)(p＜0.01)C+A組與C組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，而KK組蛋白又較K+A組表達(dá)強(qiáng)(p＜0.01)。★p＜0.01 vs C57BL/6J gloup；★p＜0.01 vs KKAy gloup)圖5各組骨骼肌PTP1B活性正常對照組(Control)，黃芪多糖對照組(Control+APS)以及KKAY黃芪多糖(KKAY+APS)治療組在給予胰島素刺激后胞膜GLUT4的含量明顯高于基礎(chǔ)狀態(tài)(P＜0.01)，而KKAY組則無明顯改變。cP＜0.05 vs control；eP＜0.05 vs TIIDM group。
圖6肝臟Masson染色組織切片藍(lán)色示膠原纖維，核染成暗藍(lán)色，胞漿為紅色(200×)左圖示KKAy組肝脂肪變性、膠原沉積、胞漿疏松、可見部分血管病變；右圖示KKAy+APS組各種病變均較輕圖7肝臟HE染色組織切片(200×)左圖示胰島素抵抗組肝脂肪變性、胞漿疏松；右圖示胰島素抵抗黃芪多糖預(yù)處理組各種病變均明顯較輕。
具體實(shí)施例方式
(-)按下述方法提取黃芪多糖粉末1.提取采用優(yōu)化水煎提取工藝并略作改進(jìn)提取黃芪多糖。取黃芪藥材，切成約0.5cm厚的飲片，80℃烘干，粉碎。加8倍水，煮2h，過濾；殘?jiān)?倍量水，煮沸1h，過濾；殘?jiān)偌?倍量水，煮沸0.5h，過濾，合并三次濾液，濃縮到1∶1。Sevag法去蛋白，即在濾液中加入氯仿-戊醇5∶1混和物劇烈振搖10min，反復(fù)10次。蒸餾水透析24h。加3倍量無水乙醇，攪拌，放置12h，離心，將沉淀蒸干。再加水溶解，加入3倍量乙醇，沉淀離心，蒸干，即得黃褐色粗多糖，稱重，與取藥材量相比，即得收率。
2.純化Sephadex G-150柱層析稱取15克Sephadex G-150，用200ml蒸餾水室溫處理8小時(shí)，使之充分溶脹。濕法裝于72×2.7cm層析柱中。將1克黃芪多糖粗品溶于0.1mol/L NaCl溶液中，加到層析柱上，用0.1mol/L NaCl溶液洗脫，流速0.5ml/min。每管2ml，硫酸-苯酚法隔管檢測，合并單一峰，冷凍干燥，得黃芪多糖精品。
3.多糖含量測定(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液配制取干燥至恒重的葡萄糖100mg，定容到100ml；
(2)苯酚液的配制取苯酚100克，加鋁片100mg與碳酸氫鈉50mg，蒸餾收集182℃餾分，稱取此餾分10克，加水150ml，置于棕色瓶中。
(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作精密吸取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖0、10、20、40、60、80、100微升，分置于具塞試管，各加蒸餾水至2ml，再各加苯酚溶液1ml，搖勻，迅速滴加濃硫酸5ml，搖勻放置5分鐘，置沸水浴加熱15分鐘，取出冷卻到室溫，于490nm處測定吸收度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4)樣品測定取50mg多糖樣品，定容到100ml，取50μl按標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定方法測定吸收度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出多糖的含量。
APS的收率為2.0％，總多糖含量為38.5％。提取的APS為淡褐色可溶于水的粉末。使用前用蒸餾水新鮮配置成20g/L的溶液。
(二)按下述方法制備成不同劑型黃芪多糖片劑的制備按重量配比為(單位克)分別稱取黃芪多糖粉末30、十二烷基硫酸鈉(沖成漿狀)45～50每10萬片、12％羧甲基淀粉(沖成漿狀)、硬酯酸鎂3000每10萬片具體制備方法將黃芪多糖粉末與十二烷基硫酸鈉和羧甲基淀粉混合攪拌均勻制成軟材，濕潤劑亦可用50％的乙醇，過篩，干燥(溫度90℃左右)，最后加入硬酯酸鎂混勻，壓片，片重約0.6克。
黃芪多糖散劑的制備按重量配比(單位克)稱取黃芪多糖紛末1.0、木糖0.1、羧甲基淀粉0.8、阿拉伯膠0.2、蛋白Q.S.、3.5％單硬酯酸甘油酯Q.S.
具體制備方法黃芪多糖粉末與木糖、羧甲基淀粉、阿拉伯膠、蛋白混合并通過二號篩制成顆粒并于60℃以下干燥后經(jīng)3.5％單硬酯酸甘油酯處理后制成散劑并稱定重量。
黃芪多糖蠟丸劑的制備按重量配比為(單位克)稱取黃芪多糖紛末120～160、米蠟15～20具體制備方法取黃芪多糖藥粉120～160克，另取米蠟15～20克加熱熔化后與黃芪多糖藥粉研勻，制丸，每丸3克，用蠟皮封固。
黃芪多糖膠囊制備方法取黃芪多糖藥粉0.3～0.6克(每粒填充量)，1號軟膠殼按以下配比制備明膠∶阿拉伯膠∶甘油∶整餾水＝10∶1∶10.4∶16.7，裝入黃芪多糖藥粉包裝成形。
(三)黃芪多糖在五種胰島素抵抗動(dòng)物模型中治療或預(yù)防胰島素抵抗及其相關(guān)疾病包括糖尿病、肥胖癥、糖尿病血管病變、糖尿病肝病、糖尿病腎病以及冠狀動(dòng)脈病變等中的應(yīng)用實(shí)施例1黃芪多糖作為制備治療APS對四氧嘧啶(alloxan)誘導(dǎo)的1型糖尿病大鼠藥中的應(yīng)用SD大鼠30只，雌雄不限，體重221.4±16.98g，隨機(jī)分為三組，每組10只(1)正常對照組(control)(2)糖尿病組(DM)，alloxan 200mg/kg腹腔注射，注射后72h，預(yù)測血糖在11.1mmoll以上者為造模成功。每日腹腔注射生理鹽水。(3)黃芪多糖治療組(APS)，經(jīng)alloxan造模成功后，每日腹腔注射APS注射液400mg/kg，連續(xù)五周。以上三組每日均給予高糖高脂飲食。
觀測大鼠的精神、毛發(fā)、活動(dòng)、體重、飲食等。分別于治療2周后、5周取尾靜脈血，用one touch II血糖分析儀測定血糖，糖尿病大鼠出現(xiàn)毛發(fā)干枯、雜亂、脫落、倦臥活動(dòng)減少，食量減少，大便稀溏等。給予APS治療后，大鼠精神好轉(zhuǎn)，毛發(fā)光整、有色澤，活動(dòng)增多，食量增加。APS+DM組血糖明顯低于DM組，結(jié)果見表1。
表1 各組血糖水平的比較(mmol/L)(x±s)

*P＜0.01 vs Control group；#P＜0.01 vs DM group實(shí)施例2黃芪多糖作為制備治療APS對高糖高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)誘導(dǎo)胰島素抵抗和2型糖尿病藥中(模型)及作為減肥的藥物的應(yīng)用高糖高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素處理10周齡SD大鼠復(fù)制胰島素抵抗和II型糖尿病模型；給予高脂飲食(high-fat diet，HFD)(41％脂肪，41％碳水化合物和18％蛋白質(zhì))。鏈脲佐菌素(STZ)(30mg/kg，溶于0.1mol/L檸檬酸緩沖鹽溶液，pH4.5)或等體積的檸檬酸緩沖鹽溶液。注射后動(dòng)物自由進(jìn)食、進(jìn)水并維持高脂飲食。STZ注射72小時(shí)后，測動(dòng)物空腹血糖，大于6.7mmol/L者可診斷為糖尿病。APS治療能顯著降低HFD/STZ糖尿病鼠體重(P＜0.01)，而對正常大鼠無影響。APS(400mg/kg/d po)治療5周后，T2DM大鼠的空腹和餐后血糖明顯下降(P＜0.05)，并不影響T2DM和正常對照鼠的血胰島素水平?？擅黠@提高T2DM大鼠減弱的胰島素敏感性。而且模型組空腹和餐后血糖以及體重都明顯高于兩個(gè)對照組，當(dāng)用黃芪多糖治療組血糖明顯降低而且體重恢復(fù)正常，兩對照組各項(xiàng)指標(biāo)無明顯差異。結(jié)果見表2和圖1。
表2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血糖、血胰島素、體重

*P＜0.05 vs control group，eP＜0.05 vs TIIDM group實(shí)施例3黃芪多糖作為制備治療APS對高糖連續(xù)輸注大鼠模型藥中的應(yīng)用采用葡萄糖輸注大鼠模型]動(dòng)態(tài)地觀察胰島素狀態(tài)向糖尿病狀態(tài)的轉(zhuǎn)變。在本模型中，持續(xù)的全身葡萄糖超負(fù)荷導(dǎo)致胰島素抵抗(正常血糖/高胰島素血癥，normoglycemia/hyperinsulinemia)，然后導(dǎo)致T II DM狀態(tài)(高血糖/正常胰島素，hyperglycemia/normoinsulinemia)。本模型模擬了營養(yǎng)超負(fù)荷患者的病理生化情況和隨后的由于脂肪和骨骼肌組織脂質(zhì)蓄積增加而導(dǎo)致的胰島素抵抗。
持續(xù)輸注葡萄糖(GI)10天導(dǎo)致一過性高血糖和持續(xù)的高胰島素血癥。在第10天，GI鼠血糖濃度較對照組稍高，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GI到第15天，增加的血胰島素濃度恢復(fù)到正常，而血糖濃度增加。因此在本模型中，大鼠在第10天前發(fā)展為胰島素抵抗，到第15天時(shí)為II型糖尿病。結(jié)果見表3。
表3 APS對高糖連續(xù)輸注大鼠模型不同時(shí)間點(diǎn)血糖水平的影響


C，control rats；GR，rats with glucose infusion；IRI，immunoreactiye insulin.Datarepresenting results of six independent experiments are expressed asmeans±SEM.*p＜0.05；**p＜0.01GRvscorrespionding control rats；#p＜0.05vscorresponding un-treated groups.
實(shí)施例4黃芪多糖作為制備治療APS對遺傳性糖尿病小鼠(KKAY)模型胰島素抵抗的改善及糖尿病肝病藥中的應(yīng)用雌性KKay小鼠和C57BL/6J小鼠各22只均購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心，鼠齡8周，飼養(yǎng)于武漢大學(xué)P3動(dòng)物中心標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)房(設(shè)施環(huán)境合格證號No.SCXK 2003-0003)，室溫20℃，相對濕度50％～80％，每日光照12h，自由攝食、飲水，每周監(jiān)測體重。KKAy鼠投予標(biāo)準(zhǔn)高脂顆粒飼料(由中科院提供)，C57BL/6J鼠投予普通小鼠飼料。
于第12周末測定尾靜脈血糖，隨機(jī)血糖大于13.9mmol/L者診斷為糖尿病。
給予APS灌胃(700mg/kg/day)治療8周后，結(jié)果顯示黃芪多糖可降低糖尿病小鼠血糖水平，改善其糖耐量，提高其胰島素敏感性，降低其胰島素抵抗指數(shù)，減少其內(nèi)臟脂肪含量，減輕糖尿病小鼠肝臟脂肪變性及纖維增生，而對正常對照組小鼠無影響。見表4、5、6，圖2和圖6。
表4各組動(dòng)物體重，肝重，內(nèi)臟脂肪含量，肝指數(shù)，肝糖元含量(x±s，n＝8～10)

*P＜0.01 vs C57BL/6J組#P＜0.01 VS KKAy組表5各組動(dòng)物隨機(jī)血糖、空腹胰島素、HomaIR分?jǐn)?shù)(x±s，n＝8-10)

*P＜0.01 vs C57BL/6J組；#P＜0.01 vs KKAy+APS組表6不同周齡的KKAy與C57BL/6J小鼠口服糖耐量試驗(yàn)的比較(單位mmol/L)

#P＜0.01 compared with group C57BL/6J and group C57BL/6J+APS at the sameage，*P＜0.01 compared with group KKAy at the same age實(shí)施例5黃芪多糖作為制備治療APS胰島素抵抗小鼠模型(C57BL/6J小鼠)藥中的應(yīng)用選取C57BL/6J小鼠40只，隨機(jī)分為4組。證實(shí)APS的胰島素增敏作用和降糖的效果。
上述動(dòng)物經(jīng)分別設(shè)正常對照組、APS正常對照組、胰島素抵抗組(IR)和黃芪多糖(APS)治療組，APS口服灌胃(700mg/kg/day)治療12周后采血檢測血糖、血脂、血胰島素、糖耐量以及胰島素抵抗指數(shù)。并檢測肌肉和肝臟變化。本實(shí)驗(yàn)成功的建立了高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)的胰島素抵抗動(dòng)物模型，具有肥胖，高胰島素，低胰島素敏感性特點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)性胰島素抵抗小鼠，其空腹血糖處于正常范圍。在給予高脂飲食同時(shí)，給予APS治療，12周后，顯示APS具有較好的降低肥胖程度，改善高胰島素血癥，提高胰島素敏感性的作用。結(jié)果見表7，圖7。
表7各組小鼠體重、空腹血糖和空腹胰島素水平及KITT結(jié)果

Data are exvressed as the mean±S.E.M.，n indicates the number of animals studied.APSastragalus polysaccharide.*Significantly different from control group(P＜0.05)；

Signficantlydifferent from IR group (P＜0.0v5)本發(fā)明將APS應(yīng)用于五種不同的胰島素抵抗動(dòng)物模型，均顯示出良好的減輕肥胖程度，降低體重，降低血糖，降低胰島素抵抗指數(shù)，改善糖耐量異常，改善高胰島素血癥，提高胰島素敏感性的作用?？勺鳛橐葝u素增敏劑使用。
實(shí)施例6黃芪多糖作為制備治療對糖尿病心血管病變藥中的應(yīng)用30只SD大鼠隨機(jī)分成正常對照組、四氧嘧啶糖尿病組與糖尿病黃芪多糖(APS)治療組(黃芪多糖400mg/kg/d腹腔注射)，5周后應(yīng)用形態(tài)定量的方法比較各組的心肌病理檢查結(jié)果。
心肌取自左心室前壁中部，福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包理，切片作HE及PASM染色，并作Luminin及膠原IV染色，備測心肌毛細(xì)血管基底膜厚度。應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析儀，在200倍光鏡下計(jì)數(shù)毛細(xì)血管斷面，計(jì)算平均毛細(xì)血管密度，毛細(xì)血管基底膜厚度，毛細(xì)血管與肌纖維數(shù)計(jì)數(shù)比率。
表3 各組心肌病理改變的比較(x±s)

*P＜0.01與control組比較；#P＜0.01與DM組比較。
本研究結(jié)果證實(shí)，APS能減輕alloxan導(dǎo)致的糖尿病大鼠內(nèi)皮細(xì)胞損傷。
對遺傳性糖尿病小鼠(KKAy)，APS治療能減輕心肌超微結(jié)構(gòu)損傷，使線粒體結(jié)構(gòu)恢復(fù)正常肌纖維排列整齊。
(四)APS治療作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究(潛在的分子靶點(diǎn))實(shí)施例7APS增加遺傳性糖尿病小鼠骨骼肌細(xì)胞GLUT4蛋白表達(dá)和轉(zhuǎn)位雌性KKay小鼠和C57BL/6J小鼠各22只均購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心，鼠齡8周，飼養(yǎng)于武漢大學(xué)P3動(dòng)物中心標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)房(設(shè)施環(huán)境合格證號No.SCXK 2003-0003)，室溫20℃，相對濕度50％～80％，每日光照12h，自由攝食、飲水，每周監(jiān)測體重。KKAy鼠投予標(biāo)準(zhǔn)高脂顆粒飼料(由中科院提供)，C57BL/6J鼠投予普通小鼠飼料。于第12周末測定尾靜脈血糖，隨機(jī)血糖大于13.9mmol/L者診斷為糖尿病。給予APS灌胃(700mg/kg/day)治療8周后，結(jié)果顯示黃芪多糖可降低糖尿病小鼠血糖水平，改善其糖耐量，提高其胰島素敏感性，降低其胰島素抵抗指數(shù)，其分子機(jī)理與顯著增加胰島素刺激后GLUT 4由胞漿向質(zhì)膜轉(zhuǎn)位有關(guān)，結(jié)果見圖3。
實(shí)施例8APS增加遺傳性糖尿病小鼠肝糖原酶活性，增加肝糖原合成雌性KKay小鼠和C57BL/6J小鼠各22只均購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物中心，鼠齡8周，飼養(yǎng)于武漢大學(xué)P3動(dòng)物中心標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)房(設(shè)施環(huán)境合格證號No.SCXK 2003-0003)，室溫20℃，相對濕度50％～80％，每日光照12h，自由攝食、飲水，每周監(jiān)測體重。KKAy鼠投予標(biāo)準(zhǔn)高脂顆粒飼料(由中科院提供)，C57BL/6J鼠投予普通小鼠飼料。于第12周末測定尾靜脈血糖，隨機(jī)血糖大于13.9mmol/L者診斷為糖尿病。給予APS灌胃(700mg/kg/day)治療8周后，結(jié)果顯示黃芪多糖可降低糖尿病小鼠血糖水平，改善其糖耐量，提高其胰島素敏感性，降低其胰島素抵抗指數(shù)，，增加KKAy小鼠肝糖原的合成，其機(jī)理與明顯增加肝糖原酶活性有關(guān)。結(jié)果見圖4。
實(shí)施例9APS抑制高糖高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)誘導(dǎo)胰島素抵抗和2型糖尿病模型骨骼肌PTP1B活性高糖高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素處理10周齡SD大鼠復(fù)制胰島素抵抗和2型糖尿病模型；給予高脂飲食(high-fat diet，HFD)(41％脂肪，41％碳水化合物和18％蛋白質(zhì))。鏈脲佐菌素(STZ)(30mg/kg，溶于0.1mol/L檸檬酸緩沖鹽溶液，pH4.5)或等體積的檸檬酸緩沖鹽溶液。注射后動(dòng)物自由進(jìn)食、進(jìn)水并維持高脂飲食。STZ注射72小時(shí)后，測動(dòng)物空腹血糖，大于6.7mmol/L者可診斷為糖尿病。APS治療能顯著降低HFD/STZ糖尿病鼠體重(P＜0.01)，而對正常大鼠無影響。APS(400mg/kg/d po)治療5周后，T2DM大鼠的空腹和餐后血糖明顯下降(P＜0.05)，并不影響T2DM和正常對照鼠的血胰島素水平?？擅黠@提高T2DM大鼠減弱的胰島素敏感性。而且模型組空腹和餐后血糖以及體重都明顯高于兩個(gè)對照組，當(dāng)用黃芪多糖治療組血糖明顯降低而且體重恢復(fù)正常，兩對照組各項(xiàng)指標(biāo)無明顯差異。在胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)T2DM大叔骨骼肌PTP1B的蛋白表達(dá)水平顯著高于(1.6倍，P＜0.05)正常對照組。APS治療后，T2DM大鼠骨骼肌PTP1B的蛋白表達(dá)水平下降30％(P＜0.05)結(jié)果見圖5。
權(quán)利要求
1.一種黃芪多糖在治療或預(yù)防胰島素抵抗的藥中應(yīng)用。
2.黃芪多糖在制備治療1型四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病的藥中應(yīng)用。
3.黃芪多糖在制備治療2型糖尿病的藥中應(yīng)用。
4.黃芪多糖在制備治療或預(yù)防胰島素抵抗的高糖連續(xù)輸注的藥中應(yīng)用。
5.黃芪多糖在制備治療糖尿病的藥中應(yīng)用。
6.黃芪多糖在制備治療糖尿病引起心臟病的藥中應(yīng)用。
7.黃芪多糖在制備治療糖尿病脂肪性肝病的藥中應(yīng)用。
8.黃芪多糖在制備治療糖尿病引起腎病的藥中應(yīng)用。
9.黃芪多糖在制備治療肥胖癥的藥中的應(yīng)用。
10.黃芪多糖在制備治療或預(yù)防胰鈧素抵抗引起的肝臟病理損傷的藥中應(yīng)用。
11.黃芪多糖在制備治療心血管病變的藥中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種黃芪多糖在治療或預(yù)防胰島素抵抗的藥物中應(yīng)用。該研究表明，黃芪多糖具有減輕體重、降低血糖、改善糖耐量異常，減少腹部脂肪，增加胰島素敏感性等作用，且不影響胰島素分泌。能夠有效的預(yù)防和治療胰島素抵抗，對與胰島素抵抗相關(guān)疾病，如糖尿病、肥胖癥、糖尿病血管病變、糖尿病肝病、糖尿病腎病以及冠狀動(dòng)脈病變等的預(yù)防和治療也有良好作用。
文檔編號A61P1/00GK1751693SQ20051001943
公開日2006年3月29日 申請日期2005年9月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月14日
發(fā)明者歐陽靜萍, 吳勇, 王保華, 吳珂, 李柯, 毛先晴 申請人:武漢大學(xué)