專利名稱：用酚類凈化被朊病毒污染的表面的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及生物凈化領(lǐng)域。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)特別的應(yīng)用，其關(guān)系到從醫(yī)療，牙齒，及制藥設(shè)備去除和/或破壞有害的生物原料，如朊病毒(蛋白質(zhì)感染性因子)，在此將用特別的參考來描述。然而，令人欣慰的是，本發(fā)明的方法和系統(tǒng)可以應(yīng)用于大多數(shù)設(shè)備、儀器和被朊病毒感染材料污染的其它表面的生物凈化，如藥物制劑設(shè)施，食品加工設(shè)施，試驗動物研究設(shè)施，其包括地板、操作表面、設(shè)備、外殼、發(fā)酵罐、流水線等等。
術(shù)語“朊病毒”用于描述蛋白感染性因子，其在人和/或動物中引起相對相似的腦病，該疾病常常是致命的。這些疾病通常指的是傳染的海綿狀腦病(TSEs)。TSEs包括人類的痙攣性假性硬化(CJD)和變異性CJD(vCJD)，家畜的牛海綿樣腦病(BSE)，也是已知的“瘋牛病”，綿羊瘋癢病，駝鹿消耗病。所有這些疾病攻擊容易感染這些特定疾病動物的神經(jīng)器官。它們的特征在于初始為長時間的潛伏期，然后為短期的神經(jīng)癥狀，包括癡呆和協(xié)調(diào)障礙，及最終死亡。
導(dǎo)致這些疾病的傳染性因子被認(rèn)為是簡單蛋白質(zhì)，沒有伴隨核酸。這種朊病毒病的致病機(jī)制被認(rèn)為涉及一種初始正常宿主編碼蛋白。蛋白質(zhì)經(jīng)歷構(gòu)象變化為不正常的形式(朊病毒)，其有自我增殖能力。這種改變確切的原因目前并不清楚。蛋白質(zhì)的不正常形式在身體內(nèi)不被有效破壞，它蓄積在某種組織中(特別是神經(jīng)組織)，最后導(dǎo)致組織的損壞，如細(xì)胞壞死。一旦發(fā)生顯著的神經(jīng)組織損壞，可觀察到臨床體征。
朊病毒病可以因此被分類為蛋白質(zhì)聚集體疾病，其也包括若干其它的不治之癥，如阿耳茨海默(氏)病和淀粉樣變性病。至于CJD，是在人類中最流行的朊病毒病(大致發(fā)生的人口數(shù)為1∶1,000,000)，大約85％病例被認(rèn)為是偶發(fā)的，大約10％被認(rèn)為是遺傳的，而大約5％是出現(xiàn)于醫(yī)源性的。
雖然不認(rèn)為是高度傳染性的，朊病毒病會被某種高危險性組織傳播，包括腦、脊髓、腦髓液和眼。在若干操作中，醫(yī)源性的傳播已經(jīng)被報道，包括硬腦膜移植、角膜移植、心包同種移植和通過人促性激素和人生長激素污染。通過醫(yī)療用具傳播也曾被報道過，包括從神經(jīng)外科儀器、深部電極和用于密切接觸中樞神經(jīng)系統(tǒng)手術(shù)操作的其它設(shè)備。關(guān)注得到提高，以前認(rèn)為朊病毒感染是“低風(fēng)險”的那些操作，例如扁桃體切除術(shù)和牙科的操作，可能提出不能接受的感染風(fēng)險，特別是，如果朊病毒涉及的疾病發(fā)生率增長。
對朊病毒感染病人手術(shù)操作后，含有朊病毒的殘余物可能遺留在手術(shù)器械上，特別是神經(jīng)外科和眼科器械。由于長時間潛伏期，它非常難于確定手術(shù)候選人是否為朊病毒攜帶者。
在本領(lǐng)域中，微生物凈化的不同等級被認(rèn)可。例如，消毒意味著通過洗滌去除污物或病菌。求助于清潔的消毒是為了破壞有害的微生物。滅菌，微生物污染控制的最高等級，意味著破壞所有活的微生物。
眾所周知，在傳統(tǒng)的意義不是活的或再生的某種生物材料，例如朊病毒，卻有復(fù)制和/或轉(zhuǎn)化成有害實體的能力。我們在此處使用術(shù)語“滅活”來包括這種有害生物材料的破壞，例如朊病毒和/或有能力復(fù)制或經(jīng)歷構(gòu)象變化成為有害的種類。
朊病毒是眾所周知非常頑固，證明能抵抗凈化和滅菌的常規(guī)方法。不像微生物，朊病毒沒有DNA或RNA破壞或破裂。朊病毒由于它們的疏水性，趨向于聚集在一起成不溶的團(tuán)。在許多導(dǎo)致微生物成功滅菌的條件下，朊病毒形成更緊密的團(tuán)，這樣保護(hù)它們和下面的朊病毒免于滅菌處理。
世界衛(wèi)生組織(1997)對朊病毒滅活的方案要求在濃的氫氧化鈉或次氯酸鹽浸泡儀器2小時，然后高壓滅菌1小時。這種強(qiáng)力的處理經(jīng)常與醫(yī)療用具不相容，特別是撓性內(nèi)窺鏡或帶有塑料、黃銅或鋁部分的其它設(shè)備。許多設(shè)備暴露在高溫下遭到損壞?；瘜W(xué)處理，如強(qiáng)堿，一般會損壞醫(yī)療用具的材料或表面。戊二醛、甲醛、環(huán)氧乙烷、液態(tài)過氧化氫、大多數(shù)的酚類化合物、乙醇和諸如干熱、煮沸、冷凍、UV、電離、微波輻射等方法已廣泛報道是無效的。顯然需要能有效對抗朊病毒而與表面相容的產(chǎn)品和方法。
Ernst和Race(J.Virol.Methods 41193-202(1993))描述了一種研究，其中酚基去污劑產(chǎn)品(LpHTM，購自STERIS Corp.Mentor，Ohio)據(jù)說含有對-叔-戊基苯酚、鄰-苯甲基-對-氯酚和2-苯基苯酚已發(fā)現(xiàn)為有效對抗綿羊瘋癢病。該研究調(diào)查濃度(0.9-90％)和接觸時間(0.5-16小時)對注射有大田鼠腦組織勻漿的綿羊瘋癢病微妙的大田鼠模型去除感染水平的影響。相對高濃度的LpHTM或延長周期發(fā)現(xiàn)有效減少朊病毒的存在。在其它的研究，發(fā)現(xiàn)酚類一般不能有效對抗朊病毒。
本發(fā)明提供了一種新的和改良的方法，用于處理被朊病毒感染材料污染的表面，該方法可克服上述涉及的問題及其它。
發(fā)明概述根據(jù)本發(fā)明的一方面，一種處理被朊病毒污染的物體的方法。該方法包括用含有酚的組合物接觸物體以滅活物體上的朊病毒。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種測定酚基去污組合物對污染有朊病毒材料的作用的方法。該方法包括將酚基去污劑溶液結(jié)合蛋白材料，確定被所述材料吸收的苯酚量，并基于吸收酚量測定組合物的作用。
本發(fā)明的一項優(yōu)點在于它對儀器是溫和的。
本發(fā)明的另一項優(yōu)點是它迅速而有效地滅活朊病毒。
本發(fā)明的又一項優(yōu)點是它與各種材料和設(shè)備是相容的。
本發(fā)明還有進(jìn)一步的優(yōu)點，對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員，在閱讀和理解下列的優(yōu)選實施例的詳細(xì)說明后將變得顯而易見。
自始至終使用下面的縮寫B(tài)SA＝牛血清白蛋白OBPCP＝鄰-苯甲基-對-氯酚OPP＝鄰苯基苯酚PCMX＝對-氯-間-二甲酚(p-chloro-m-xylanol)PTAP＝對-叔-戊基苯酚3，4DiOH benoic＝3，4二羥基苯甲酸3，5DiMeOphenol＝3，5二甲氧基酚2，6DiMeOphenol＝2，6二甲氧基酚2，3DiMe-phenol＝2，3二甲氧基酚附圖簡要說明本發(fā)明可以采取不同成分和成分安排，及不同的步驟和步驟安排。附圖僅舉例說明優(yōu)選實施方案，而不解釋為對發(fā)明的限制。


圖1是顯示朊病毒的對數(shù)減少比各種酚的分配系數(shù)的圖表；圖2是顯示由不同方法獲得的分配系數(shù)之間關(guān)系的圖表；圖3是顯示溫度對由酚所致的朊病毒減少的影響的圖表；圖4是顯示各種酚與BSA相互影響的圖表；圖5是初始濃度吸收的百分?jǐn)?shù)比各種酚的HPLC滯留時間的圖表；
和圖6是酚當(dāng)量吸收比各種酚的對數(shù)Pc的圖表。
優(yōu)選實施方案的詳細(xì)說明一種去污組合物，包含一種酚或酚類的組合，其對大多數(shù)的物體有效，包括表面和液體物體，用于減少或消除危險的朊病毒。對于組合物有效去除或?qū)嵸|(zhì)地減少朊病毒污染的表面，包括應(yīng)用于醫(yī)療、牙齒和藥物程序的表面，用于食品和飲料加工工業(yè)的設(shè)備表面，及操作面、墻、地板、天花板、發(fā)酵罐、流水供應(yīng)線和其它在醫(yī)院、工業(yè)設(shè)施、研究實驗室等潛在的受污染表面。詳細(xì)的例子包括處理醫(yī)療廢品，如血、組織和其它物體廢料，前處置，收拾屋子、籠子等等，用于圈養(yǎng)已知或疑似感染有朊病毒的動物，BSE感染區(qū)的消毒，包括屠宰場、食品加工設(shè)施等等，醫(yī)學(xué)裝置再處理、消毒或滅菌系統(tǒng)的凈化，具有抗真菌、病毒、抗結(jié)核和抗細(xì)菌功效以及朊病毒功效的藥物制劑、藥品和清洗劑。
組合物包括一種或多種酚。適合的酚包括烷基、氯和硝基取代的酚類和雙酚，及其羧酸。典型的酚類包括，但不限于苯酚、2，3-二甲基苯酚；3，5-二甲氧基苯酚(3，5DiMeOphenol)；2，6-二甲氧基苯酚(2，6DiMeOphenol)；鄰-苯基苯酚(OPP)；對-叔-戊基苯酚(PTAP)；鄰-芐基-對-氯酚(OBPCP)；對-氯，間-甲酚(PCMC)；鄰甲酚；對甲酚；2，2-亞甲基雙(對-氯酚)；3，4-二羥基苯甲酸(3，4DiOH benzoic)；對羥基苯甲酸；咖啡酸；原兒茶酸；對-硝基苯酚；3-酚基苯酚；2，3-二甲氧基苯酚(2，3DiMe-phenol)；百里酚；4-氯，3-對甲氧酚；五氯酚；六氯酚；對-氯-間-二甲酚(PCMX)；三氯森；2，2-甲氧基-雙(4-氯-酚)；對-苯基苯酚。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在組合物中具有相對高疏水性的酚類趨向于更有效。Pc定義為可計算的辛醇-水分配系數(shù)。對數(shù)Pc值越高表明物質(zhì)越疏水。用于確定Pc值的軟件是來自Advanced Chemistry Development Software的例子。優(yōu)選的在組合物中至少有一種酚類的對數(shù)Pc值當(dāng)用ACD軟件方法測定時至少為2.5，更優(yōu)選至少大約3，直到大約6.0。已發(fā)現(xiàn)Log P值越高(越疏水)，越多的酚被吸收。因此，當(dāng)酚是疏水時為了取得期望的朊病毒破壞，可以使用較低濃度的酚。一種特別優(yōu)選的酚是PCMX，具有Log Pc值3.35。
組合物優(yōu)選酸性的，即，具有中性的pH(pH 7)，或更優(yōu)選低于pH大約6，或最優(yōu)選高于pH大約2.5。例如，組合物可以包括有機(jī)的或無機(jī)的酸，加入其調(diào)節(jié)pH，如鹽酸、乙醇酸、磷酸等等。同樣考慮組合物可以是堿性的，例如，加入堿調(diào)節(jié)pH，如氫氧化鈉、氫氧化鉀等等。優(yōu)選堿性使得不超過50％的酚被離子化。
組合物包括水和其它適合的溶劑。組合物優(yōu)選作為濃縮液來提供，其在水里稀釋成適合濃度的去污溶液用于凈化。優(yōu)選的，濃縮液稀釋到大約占溶液重量的1％。為了要更嚴(yán)格的凈化作用，濃縮液可以使用更高的濃度，例如，大約占溶液重量的5％或更高。除非另有說明，所有的濃度由濃縮液提供。
優(yōu)選的，濃縮液的總酚摩爾濃度大約為0.1M-1.0M或更大，更優(yōu)選的，大約0.2M或更大，而最優(yōu)選的，大約0.5M或更大。破壞至少99％的有害蛋白質(zhì)(如朊病毒)的有效組合物已配制成總酚濃度大約0.2M-0.5M，或更大。
依據(jù)特別的應(yīng)用，組合物也可以包括其它的成分。適合的成分包括用于除去水中硬度鹽的多價螯合劑、助溶劑、表面活性劑、腐蝕抑制劑、緩沖劑等等。
多價螯合劑優(yōu)選有機(jī)酸、無機(jī)酸或其混合物。適合的有機(jī)酸包括單和雙脂肪羧酸、含有羥基的有機(jī)酸及其混合物。典型的多價螯合劑包括乙醇酸、水楊酸、琥珀酸、乳酸、酒石酸、山梨酸、氨基磺酸、乙酸、苯甲酸、癸酸、己酸、氰尿酸、二氫醋酸、二甲氨基磺酸、丙酸、聚丙烯酸、2-乙基-己酸、甲酸、富馬酸、1-谷氨酸、異丙基氨基磺酸、環(huán)烷酸、草酸、戊酸、苯磺酸、二甲苯磺酸、檸檬酸、甲苯酚、十二烷基苯磺酸、磷酸、硼酸、磷酸及其組合，乙醇酸是優(yōu)選的。對于堿性組合物，酸螯合劑可以省略。
酸的優(yōu)選濃度占濃組合物的大約2-25％，更優(yōu)選的，大約5-20％，更優(yōu)選的，大約15-20％。
適合的助溶劑包括僅含有碳、氫和氧原子的多元醇。典型的多元醇是C2到C6多元醇，例如，1，2-丙二醇、1，2-丁二醇、己二醇、丙三醇、山梨醇、甘露醇和葡萄糖。高級乙二醇、聚乙二醇、多氧化物和乙二醇酯均可以考慮作為助溶劑。這些例子包括烷基醚醇，諸如甲氧乙醇、甲氧乙醇醋酸酯、丁氧乙醇(丁基乙二醇一乙醚)、丙二醇、聚乙二醇、聚丙二醇、二乙二醇單乙醚、二乙二醇單丙醚、二乙二醇單丁醚、三丙二醇甲醚、丙二醇甲醚、二丙二醇甲醚、丙二醇甲醚醋酸酯、二丙二醇甲醚醋酸酯、乙二醇正丁醚、1，2-二甲氧基乙烷、2-乙氧基乙醇、2-醋酸乙氧乙酯、苯氧基乙醇和乙二醇正丙醚。可以使用助溶劑的組合。多元醇優(yōu)選濃度為至少10％，更優(yōu)選，至少20％，可以高達(dá)40％。
適合的表面活性劑包括陰離子、陽離子、非離子、兩性離子表面活性劑。陰離子表面活性劑，如烷芳基陰離子表面活性劑是特別優(yōu)選的。典型的表面活性劑包括十二烷苯磺酸和1-辛烷磺酸鈉，及其組合。
同樣有用的陰離子表面活性劑是硫酸鹽、磺酸鹽，特別是C14-C18磺酸鹽、磺酸、乙氧基化物、肌氨酸鹽和磺基丁二酸鹽如月桂基醚硫酸鈉、月桂基硫酸三乙醇胺、月桂基硫酸鎂、磺基丁二酸酯、月桂基硫酸銨、烷基磺酸鹽、月桂基硫酸鈉、α烯烴磺酸鈉、烷基硫酸、硫酸化乙醇乙氧基化物、硫酸化烷基酚乙氧化物、二甲苯磺酸鈉、烷基苯磺酸鹽、十二烷苯磺酸三乙醇胺、十二烷基苯磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈣、二甲苯磺酸、十二烷基苯磺酸、N-烷酰基肌氨酸鹽、月桂?；“彼徕c、雙烷基磺基丁二酸鹽、N-烷?；“彼?、月桂酰基肌氨酸及其組合。
組合物同樣也包括一種或多種可溶的無機(jī)鹽，如氯化鈉。已發(fā)現(xiàn)氯化鈉可以增加某些酚的效力，特別是沒有鹵化的，如OPP，然而對鹵化酚如PCMX的影響，較不明顯。
以下是一種典型的濃縮組合物成分占組合物重量的％水 適量，通常大約35％多價螯合劑，例如乙醇酸 0-25％，優(yōu)選大約18.0表面活性劑，例如十二烷基苯磺酸 2-10％，優(yōu)選大約7％C14-C16磺酸鈉 3-10％，優(yōu)選大約6％助溶劑，例如己二醇 10-40％，優(yōu)選大約24.0％酚類，例如OBPCOP 2-15％，優(yōu)選大約9.0％OBPCOP 0.2-5％，優(yōu)選大約1.0％在一個實施方案中，至少部分OBPCOP或OBPCOP被一種酚替代，其比任一的這些酚更有效，例如PCMX。
當(dāng)在水中稀釋到占濃縮液重量1％的濃度時，這種組合物已顯示出有效對抗朊病毒污染的表面。雖然滅活朊病毒的機(jī)理并沒有完全了解，但考慮到酚可以與朊病毒蛋白質(zhì)形成復(fù)合物，從而表現(xiàn)出無害。朊病毒不能復(fù)制產(chǎn)生更多的朊病毒。經(jīng)發(fā)明者研究，提出酚一般不破壞朊病毒。朊病毒蛋白質(zhì)在三維結(jié)構(gòu)上變化起因于與酚的相互作用，滅活了朊病毒。
進(jìn)一步，與傳統(tǒng)的朊病毒處理，如高溫或高濃度次氯酸鈉或氫氧化鈉相比，組合物與大多數(shù)的表面是相容的。
組合物可以許多途徑應(yīng)用，包括噴霧、包衣、浸漬等等。在一個實施方案中，組合物以凝膠的形式應(yīng)用。在該實施方案中，增稠劑，如天然或改性的纖維素加入到制劑中以提高粘度。
其它合成的聚合物均可以作為增稠劑，包括聚乙酸酯、天然寶石、無機(jī)聚合體如人造粘土、表面活性劑如嵌段聚合物和陰離子表面活性劑。
組合物可以在室溫下使用，雖然優(yōu)選較高的溫度。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)將組合物加熱到至少30℃，更優(yōu)選的，40℃左右或更高，達(dá)到在朊病毒滅活要求的時間上實質(zhì)縮短。
組合物各種配方的功效可以通過人或其它動物的朊病毒來研究?；蛘?，朊病毒模型，例如，一種蛋白質(zhì)如牛血清白蛋白(BSA)可以用于評估配方。優(yōu)選的朊病毒模型是一種回腸液從屬機(jī)體(IFDO)。IFDO經(jīng)Burdon等(Burdon，J.Med.Micro.，29145-157(1989))鑒定，并描述為與朊病毒在許多方面相類似，如，在抵抗殺菌和滅菌方法方面。由于能在實驗室中人工培養(yǎng)IFOD和檢測它們，他們提供了優(yōu)良的模型系統(tǒng)用于研究凈化方法對朊病毒滅活的作用。在典型的實施方案中，IFDOs是在改良的支原體基礎(chǔ)肉湯(Oxoid)中人工培養(yǎng)的，并通過系列稀釋和在類似的瓊脂上鋪板而定量。凈化配方的功效優(yōu)選通過下列步驟研究室溫下經(jīng)混懸液測試，濃縮組合物在水中大約1％稀釋液，模擬組合物的使用。接著適當(dāng)?shù)慕佑|時間，等份試樣取樣并通過系列稀釋和在改良的支原體瓊脂上鋪板而定量。平板優(yōu)選在大約37℃下培養(yǎng)幾個小時，優(yōu)選大約48小時。檢查平板，然后計數(shù)可以看見的菌落的數(shù)量。確定對數(shù)減少(對數(shù)減少是一種對去除生物體數(shù)量的量，表示成生物體初始數(shù)量的Log10減經(jīng)處理后生物體數(shù)量的Log10之差。例如，6的對數(shù)減少意味著每一百萬的初始生物體，經(jīng)處理后最多殘留1個)。
用SDS-PAGE技術(shù)以牛血清白蛋白(BSA)的破壞研究表明，BAS沒有被去污劑LpHTM破壞到顯著的程度。因此，LpHTM和其它酚基組合物對蛋白的二級或三級結(jié)構(gòu)具有微妙的作用，從而表現(xiàn)不再有害。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，酚在組合物中的溶解性對蛋白質(zhì)復(fù)合程度有影響。一般來說，配方中的酚溶解性越低，復(fù)合程度越大，即，在朊病毒滅活中酚配方越有效。溶解性受所選擇的酚和類型和在配方中其它成分的濃度的影響，例如，使用的溶劑和助溶劑。
沒有意圖限制本發(fā)明的范圍，以下的實施例顯示各種去污組合物對模擬的朊病毒模型的作用。
實施例實施例1研究酚濃度對組合物效果的影響為了測試不同配方對不同組合物的殺朊病毒(priocida)活性影響的貢獻(xiàn)，使用了IFDO對數(shù)減少作為響應(yīng)進(jìn)行實驗。組合物I-VII的成分列于表1。組合物I是一種商品配方，LpHTM。
IFDOs是在改良的支原體肉湯人工培養(yǎng)的，并且通過系列稀釋，及在類似的瓊脂上鋪板而定量。組合物I-VII的有效性通過室溫下混懸測試組合物在水中1％的稀釋液而研究。接著適合的接觸時間，例如，10分鐘，等份試樣取樣并通過系列稀釋和鋪板在改良的支原體瓊脂上而定量。接著在37℃下孵化48小時，計數(shù)可以看見菌落和確定對數(shù)減少。組合物與現(xiàn)有酚產(chǎn)品比較的結(jié)果顯示在表1。
表1
*初始計數(shù)log106.7/mL。
經(jīng)處理后，以LpHTM的對照研究給出對數(shù)減少為4.0IFDO。基于獲得的對數(shù)減少，實施例VII是最好的，因為得到了6.7的對數(shù)減少(即，沒有可見的菌落)。
實施例2近似等摩爾濃度酚的作用用實施例1的方法來研究近似等摩爾濃度的各種酚(在溶解度允許的情形下)。表2顯示配方IX-XX的成分重量和獲得的結(jié)果。
表2
表2，續(xù)
基于獲得的對數(shù)值，含有2，4，5-三氯酚的配方XIV獲得最大的對數(shù)減少(4.9)，好于含有LpH達(dá)到的對數(shù)減少(4.0)。
實施例3結(jié)果與分配系數(shù)(Pc)的關(guān)系Pc被定義為可計算的辛醇-水分配系數(shù)。用兩種方法計算Pc對數(shù)值。第一種方法是使用Alchemy 2000分子模型軟件(Tripos)以及由STERIS公司開發(fā)的數(shù)據(jù)集。第二種方法是使用Advanced ChemicalDevelopmont(ACD)軟件網(wǎng)絡(luò)操作系統(tǒng)v4.76(1994-2002ACD)。對每個酚計算的Pc對數(shù)值顯示在表3這些值與在實施例2獲得的菌落對數(shù)減少比較。
表3
圖1顯示Log IFDO還原比Log Pc(Alchemy 2000)和Log Pc(ACD)的值。Log Pc(Alchemy 2000)和Log Pc(ACD)值之間的關(guān)系顯示在圖2。
除了三氯森和百里酚，酚的活性表現(xiàn)出與酚關(guān)聯(lián)的Log Pc相關(guān)。
由于明顯不合適，百里酚和三氯森不包括在該圖和后面的圖中。計算Log Pc的這兩種方法互相非常吻合。
一般來說，如同以上兩種任意方法測定的一樣，Pc值在2-6.5之間的酚顯示出增強(qiáng)的活性。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在LpHTM產(chǎn)品中的酚類對功效是最重要的條件，額定為OBPCP＞＞OPP＞PTAP。當(dāng)用不確定濃度的這些酚測定時，最佳的組合物顯示為含有OPBCP或OPP的配方，含有PTAP的配方功效較小。
酚類對抗朊病毒的作用不表現(xiàn)為涉及破壞蛋白質(zhì)。這表現(xiàn)在通過SDS-PAGE進(jìn)行的BSA蛋白質(zhì)破壞研究中。與酚類配方接觸后的蛋白質(zhì)顯示為完整的?？梢酝茢喾宇悓﹄貌《镜鞍踪|(zhì)的二級或三級結(jié)構(gòu)具有意想不到的微妙作用，或者以某種方法使它們?yōu)榉莻魅拘缘摹?br> 實施例4溫度對酚配方活性的作用IFDO是在改良的支原體肉湯中人工培養(yǎng)的，由系列稀釋和鋪板在類似的瓊脂上而定量。溫度對酚配方活性的作用是通過在各種溫度(20和40℃)下組合物在水中1％的稀釋液的混懸測試法來研究。接著是5、10、15和20分鐘的接觸時間，等份試樣取樣并通過系列稀釋并鋪板在改良的支原體瓊脂中而定量。經(jīng)過在37℃下孵化48小時，平皿通過計數(shù)可以看見的菌落進(jìn)行評估，然后確定對數(shù)減少。酚組合物(LpHTM)在20和40℃下的比較結(jié)果顯示在附圖3。
如圖3所示，在40℃下5分鐘，IFDO水平減少到低于可以檢測的水平(即，大于1對數(shù))，與20℃下5分鐘相當(dāng)。
實施例5酚配方與BSA蛋白質(zhì)的相互作用準(zhǔn)備下列含有不同酚類的酚溶液大約1.38克的酚與助溶劑，如，表面活性劑、有機(jī)酸、異丙醇、乙醇和胺的組合物溶解于99ml的水中形成總酚濃度為4mM的溶液。大約1gBSA加入到酚溶液中，以達(dá)到濃度為大約0.15mM BSA(BSA的分子量推測為大約66,000道爾頓)。溶液攪拌15分鐘，然后以1800轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。等份試樣在高效液相色譜(HPLC)下分析。圖4以被BSA吸收的初始酚百分比的方式顯示4輪次結(jié)果。吸收的百分比顯示出與形成沉淀數(shù)量良好的相關(guān)性?；谶@些結(jié)果，吸收的％是測定酚對抗朊病毒有效性的良好途徑。
實施例6比對酚HPLC滯留時間，繪制實施例5的初始濃度吸收的百分比。圖5顯示這些值之間的相關(guān)性。獲得0.81的相關(guān)系數(shù)，暗示HPLC滯留時間是蛋白質(zhì)吸收酚相當(dāng)良好預(yù)報器。
實施例7比對吸收當(dāng)量，繪制幾種酚的Log Pc(計算機(jī)計算)值，如附圖6顯示。結(jié)果顯示，Log P值越高(越疏水)，酚吸收越多。因此，當(dāng)酚疏水到期望的朊病毒破壞時，可以使用較低的酚濃度。
實施例8用含有不同數(shù)量鹽水和酚的100mL水來研究酚的吸收。結(jié)果顯示在表4。賦形劑包括表面活性劑的混合物。
表4
結(jié)果顯示，當(dāng)在2.5重量％或5重量％時，在溶液中鹽水的存在對酚的吸收具有明顯的影響。
權(quán)利要求
1.一種處理被朊病毒污染的物體的方法，該方法的特征在于用含有酚的組合物接觸物體，以滅活在物體上朊病毒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，進(jìn)一步的特征在于酚含有的至少一個成員選自對氯間二甲酚、百里酚、三氯森、4-氯，3-甲酚、五氯酚、六氯酚、2，2-亞甲基-雙(4-氯酚)和對苯基苯酚。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，進(jìn)一步的特征在于組合物進(jìn)一步含有鄰-苯基苯酚和鄰-苯甲基-對-氯酚中的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，進(jìn)一步的特征在于酚存在的濃度至少為0.005M。
5.根據(jù)上述權(quán)利要求1-4任一的方法，進(jìn)一步的特征在于酚存在的濃度高達(dá)大約0.2M。
6.根據(jù)上述權(quán)利要求1-5任一的方法，進(jìn)一步的特征在于酚的Pc對數(shù)值為2-6.5。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，進(jìn)一步的特征在于酚的Pc對數(shù)值為2-5。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的方法，進(jìn)一步的特征在于酚的Pc對數(shù)值至少為4。
9.根據(jù)上述權(quán)利要求1-8任一的方法，進(jìn)一步的特征在于組合物含有的酚濃度至少大約10％。
10.根據(jù)上述權(quán)利要求1-9任一的方法，進(jìn)一步的特征在于組合物含有一種可溶的無機(jī)鹽。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，進(jìn)一步的特征在于可溶的鹽包括鈉鹽。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，進(jìn)一步的特征在于鈉鹽存在的的濃度至少為2％重量。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12的方法，進(jìn)一步的特征在于酚包括鄰-苯基苯酚。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，進(jìn)一步的特征在于鹽包括氯化鈉。
15.根據(jù)上述權(quán)利要求1-14任一的方法，進(jìn)一步的特征在于酚包括對氯間二甲酚(PCMX)。
16.根據(jù)上述權(quán)利要求1-15任一的方法，進(jìn)一步的特征在于酚與朊病毒復(fù)合并形成沉淀。
17.根據(jù)上述權(quán)利要求1-16任一的方法，進(jìn)一步的特征在于物體含有表面，和方法包括用含有酚的組合物接觸該表面以滅活在該表面上的朊病毒。
18.根據(jù)上述權(quán)利要求1-17任一的方法，進(jìn)一步的特征在于物體包括的一個成員選自醫(yī)療、牙科和制藥儀器。
19.一種檢測酚基去污組合物對污染有朊病毒的材料的效果的方法，其特征在于用蛋白質(zhì)材料組合酚基去污劑的溶液；檢測被蛋白質(zhì)材料吸收的酚量；和基于被吸收的酚量確定組合物的效果。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，進(jìn)一步的特征在于蛋白質(zhì)材料包括含朊病毒材料和牛血清白蛋白中的至少一種。
全文摘要
一種凈化被朊病毒污染的表面或液體的方法，其包括用一種或多種酚的組合物處理表面。特別有效的酚類包括對－氯－間－二甲酚，百里酚，三氯森，4－氯，3－甲酚，五氯酚，六氯酚，2，2－甲基－雙(4－氯酚)和對－苯基苯酚。
文檔編號A61L2/18GK1832764SQ200480022738
公開日2006年9月13日 申請日期2004年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月8日
發(fā)明者杰拉爾德·E·麥克唐奈, 赫伯特·J·凱撒, 凱瑟琳·M·安特洛加, 沙辛·凱勒 申請人:斯特里斯公司