專利名稱：利用白腐菌酶液提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于卷煙再造煙葉技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及再造煙葉生產(chǎn)過程中使用白腐菌酶液處理煙梗漿料以提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法。
背景技術(shù)：
再造煙葉是利用煙末、煙梗、碎煙片等煙草物質(zhì)為原料，經(jīng)過萃取、濃縮、制漿、抄造、干燥工藝制備而得，是一種具有高附加值的煙草資源再生利用產(chǎn)品，將再造煙葉按照一定比例摻配于卷煙產(chǎn)品中可大幅降低單箱生產(chǎn)消耗、改善煙支結(jié)構(gòu)與燃燒狀態(tài)、降低卷煙焦油及有害成分的釋放量。目前，國內(nèi)再造煙葉在產(chǎn)品質(zhì)量方面與國外產(chǎn)品存在一定差距。在物理性質(zhì)方面，國內(nèi)再造煙葉較厚，厚薄不均，均不如進口再造煙葉，尤其在柔軟性方面，與國外差距較大。在再造煙葉內(nèi)在品質(zhì)方面，國產(chǎn)再造煙葉存在木質(zhì)氣比較重，刺激性大，煙氣不協(xié)調(diào)，紙質(zhì) 氣明顯，煙氣柔和程度差等缺點。公開號為CN101103839的中國發(fā)明專利申請報道了一種造紙法生產(chǎn)重組煙葉的方法，公開號為CN1739409的中國發(fā)明專利申請報道了一種用于造紙法生產(chǎn)煙草薄片的煙梗的制漿方法，公開號為CN102240065A的中國發(fā)明專利申請報道了一種改善造紙法薄片抄造基片濕強度和柔軟性的方法，公開號為CN102068034A的中國發(fā)明專利申請報道了一種造紙法再造煙葉降焦減害的方法，公開號為CN101637298的中國發(fā)明專利申請報道了一種煙草薄片的制備方法及其應(yīng)用。上述介紹的專利都是采用萃取后涂布抄造的造紙法制備再造煙葉，只是萃取工藝與制漿抄造工藝不同。這些制備技術(shù)與工藝存在共同的不足之處，就是沒有對萃取后的煙草纖維原料進行處理。整個生產(chǎn)過程基本不涉及煙草原料的任何化學(xué)變化。公開號為CN 101427846的中國發(fā)明專利申請報道了一種用復(fù)合酶提高薄片原料萃取效率和薄片煙氣質(zhì)量的方法，公開號為CN 102058154A的中國發(fā)明專利申請報道了一種酶法降解煙草中木質(zhì)素的方法，美國專利申請?zhí)枮閁S20050527286的Process forreducing nitrogen containing compounds and lignin in tobacco公開了從煙草中減少含有尼古丁的復(fù)合物和木質(zhì)素的過程。以上專利公開的工藝只是涉及煙草萃取液或煙梗原料煙葉表面的生物發(fā)酵處理，沒有涉及煙草漿料的處理，應(yīng)用的局限性較大。木質(zhì)素是一種高度復(fù)雜的、不定形的芳香環(huán)聚合物，是木質(zhì)植物的主要組成成分之一。其結(jié)構(gòu)的基本單元是類苯基丙燒(Phenyl Propanoid),靠多種共價鍵連接形成一種不溶性的、異質(zhì)的、無光學(xué)活性的、不規(guī)則的、高度分枝的三維網(wǎng)絡(luò)大分子。對于煙草原料，煙梗中木質(zhì)素本身熱解會產(chǎn)生兒茶酚、烷基兒茶酚等引起澀口，有促癌活性。目前已知的木質(zhì)素氧化酶系有三種類型1、Lip-Mnp-Lac組，如CoriolusVersicolor> Phlebiavadiate 和 Phanerochaete Chrysosporium,對后者一般認(rèn)為不含漆酶，但有人認(rèn)為是因培養(yǎng)基不適宜產(chǎn)漆酶引起；2、Mnp-Lac組，如Lentinulaedodes、Panustigrinus,能修飾木質(zhì)素增加水溶性，但CO2釋放量不很高；2、Lip-Lac組，如Phlebiaochraceofulva> Junghuhunia Separabalima,該組菌降解木質(zhì)素非常慢。雖然并非所有白腐菌都具有全部三種主要酶，但漆酶與Lip、Mnp 一起協(xié)同作用，完成大量白腐菌特有、高效的生理過程。白腐菌對木質(zhì)素的降解，依賴一個主要由細(xì)胞產(chǎn)生分泌的酶系統(tǒng)組成的細(xì)胞外降解體系，需氧并靠自身形成的H2O2激活，由酶觸發(fā)啟動一系列自由基鏈反應(yīng)，實現(xiàn)對底物無特異性的氧化降解，主要包括單電子氧化、酯質(zhì)氧化、共代謝等過程。這一系列自由基鏈反應(yīng)導(dǎo)致各種連接鍵斷裂，使木質(zhì)素解聚成各種低分子量片段，再經(jīng)進一步氧化降解為C02，實現(xiàn)對多變的木質(zhì)素底物非特異性和無立體選擇性的氧化降解。故菌與降解對象并非一一對應(yīng)，而是與一類乃至于多類底物的廣譜關(guān)系。白腐菌是一類絲狀真菌，因腐生在樹木或木材上引起木質(zhì)的白色腐爛而得名。白腐菌菌絲體為多核，少有隔膜，無鎖狀聯(lián)合，多核的分生孢子常為異核，擔(dān)孢子卻是同核體，存在同宗配合和異宗配合兩類交配系統(tǒng)。白腐菌通過分泌非專一性的木素降解酶系以單電子氧化、共代謝及脂肪過氧化等途徑進行降解活動，它的特點是1)低成本、高效率，它的生長對營養(yǎng)要求不高，可以利用廢棄物中的木質(zhì)纖維素等廉價的營養(yǎng)源，將其轉(zhuǎn)化為腐殖質(zhì)；2)它產(chǎn)生氧化能力極強的羥基自由基，對其他微生物具有很大殺傷力，從而在競爭中 保持一定的優(yōu)勢；3)降解對象不需進入細(xì)胞內(nèi)代謝，因而它不易受到有害物質(zhì)的傷害；4)降解底物的非專一性機制，使其能降解煙梗木質(zhì)素而具有更大的實用性。在分類學(xué)上白腐菌屬擔(dān)子菌綱，是目前已知的唯一能在純系培養(yǎng)中有效地將木質(zhì)素降解為CO2和H2O的一類微生物，是自然界中木質(zhì)素最有效降解者，能分泌出非專一性的木質(zhì)素降解酶，以氧化還原反應(yīng)形式對木質(zhì)纖維素及多環(huán)芳烴衍生物進行鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，從而能夠有效的將這類物質(zhì)降解，轉(zhuǎn)化成無毒、無害的物質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法。將白腐菌(Coriolus versicolor T42)酶液處理煙梗漿料應(yīng)用于再造煙葉的生產(chǎn)，能有效的提高再造煙葉的柔軟度，同時也提高再造煙葉的感官質(zhì)量。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所設(shè)計的一種利用白腐菌酶液提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法，按照現(xiàn)有工藝技術(shù)方法完成煙梗原料磨漿階段前后的工序。在再造煙葉生產(chǎn)過程的煙梗原料磨漿階段，按照煙梗原料物質(zhì)干量的I. (Tio. 0%的比例加入白腐菌T42酶液，在煙梗漿料溫度為3(T80°C，pH值為2. 0^6. 0，處理時間為2(T90min的條件下降解煙梗衆(zhòng)料中木質(zhì)素，其中所述的白腐菌T42菌株名為Coriolus versicolor T42,保藏號為 CCTCC NO: M 2012252。作為優(yōu)選方案，所述白腐菌T42酶液制備步驟I) PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基的制備按重量百分比進行稱量配合馬鈴薯提取液 I. 0 4. 0%、葡萄糖 20. 0 40. 0%、KH2PO4 I. 0 6. 0%、MgSO4 7H20 I. 0 5. 0%、維生素 B1
0.OOfO. 006%、瓊脂 10. (T30. 0%、酒石酸氨 0. 05^2. 5%,用 I. OmoI/L 的鹽酸調(diào)節(jié) pH 至
3.0 6. 5備用;2)產(chǎn)酶培養(yǎng)基按重量百分比進行稱量配合無水CaCl2 0. 05、. 30%、KH2PO4
0.02 0. 10%、無水MgSO4 0. 05 0. 20%、葡萄糖0. I 0. 5%、酒石酸氨0. 10 0. 80%、硝酸氨
0.10^0. 90%、維生素B1 0. 00r0. 008%、微量元素混合液0. 001 0. 005%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)pH至3. 5 6. 5備用；3)白腐菌T42菌株的培養(yǎng)將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基上，在溫度2(T50°C，轉(zhuǎn)速15(T600r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)5 7d，然后將菌懸液2 7%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)8 15d后得到發(fā)酵液；在700(Tl5000r/min下離心5 15min，上清液即為白腐菌T42酶液。作為優(yōu)選方案，微量元素混合液為MnS04、NaCl、ZnSO4, FeSO4 7H20、CuSO4 5H20、AlK (SO4) 2 12H20、HB03、CoCl2 6H20和NaMoO4 2H20任選一種或幾種復(fù)配而成，微量元素混合液濃度為0. 1%。本發(fā)明的優(yōu)點是I、本發(fā)明的方法合理，操作方便，效果顯著，能顯著提高再造煙葉的柔軟度，同時使再造煙葉的感官質(zhì)量得到提升，木質(zhì)氣減少，刺激性降低。
2、本發(fā)明進行了大量的試驗驗證，根據(jù)白腐菌的結(jié)構(gòu)特點和對煙梗木質(zhì)素的降解特性，優(yōu)化改性白腐菌，開發(fā)了新型的菌株白腐菌T42，該白腐菌T42菌株名為Coriolusversicolor T42，于2012年6月27日保藏于武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號為CCTCC NO: M 2012252，該白腐菌T42應(yīng)用于煙梗漿料木質(zhì)素的降解，證明白腐菌T42能提高再造煙葉的柔軟度和感官質(zhì)量，并且該生物酶價格低廉、處理效果良好。3、本發(fā)明的白腐菌T42降解木質(zhì)素有三個特點。第一，能徹底降解木質(zhì)素生成CO2，而細(xì)菌至多將20%木質(zhì)素碳轉(zhuǎn)化成CO2;第二，木質(zhì)素降解主要是氧化反應(yīng)，產(chǎn)物中不出現(xiàn)木質(zhì)素單體；第三，木質(zhì)素降解本身不提供菌生長和維持所需的碳源和能源，需要提供另外的碳源和能源供菌降解木質(zhì)素。
具體實施例方式下面列舉一部分實施例對本發(fā)明的有關(guān)技術(shù)問題作進一步詳細(xì)的描述，有必要在此指出以下具體實施例只是對本發(fā)明的進一步說明，不代表對本發(fā)明保護范圍的限制。其他人根據(jù)本發(fā)明做出的一些非本質(zhì)的修改和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護范圍。實施例II、白腐菌T42酶液的制備所述白腐菌T42酶液按以下方法制備(I)培養(yǎng)基的制備將下述物質(zhì)按所述重量百分比進行稱量配合。①PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯提取液2. 0%、葡萄糖20. 0%、KH2PO4 3. 0%、MgSO4 7H202. 0%、維生素B1 0. 002%、瓊脂15. 0%、酒石酸氨0. 07%，用I. OmoI/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至5. 0備用；②產(chǎn)酶培養(yǎng)基無水CaCl2 0. 08%、KH2PO4 0. 06%、無水 MgSO4 0. 10%、葡萄糖 0. 1%、酒石酸氨0. 50%、硝酸氨0. 20%、維生素B1O. 002%、微量元素混合液0. 001%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)PH至4. 5備用；③微量元素混合液由MnS04、NaCl、ZnS04、FeSO4 7H20 和 CuSO4 5H20 復(fù)配而成，濃度為0. 1%。(2)、白腐菌T42菌株的培養(yǎng)
將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基上，在溫度40°C，轉(zhuǎn)速300r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)5d，然后將菌懸液2%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)IOd后得到發(fā)酵液；在4°C，9000r/min下離心5min，上清液即為白腐菌T42酶液。2、白腐菌T42酶液處理煙梗漿料在煙梗磨漿階段，加入2%的白腐菌T42酶液，所述酶液的用量以煙梗絕干質(zhì)量計，調(diào)節(jié)煙梗漿料的PH值為5. 0，煙梗漿料的溫度為50°C，保持上述溫度的時間為60min。經(jīng)檢測，白腐菌T42酶液降解煙梗漿料中木質(zhì)素后，制備的再造煙葉柔軟度提高了 10. 2%，感官質(zhì)量評價提高了 I. I分。實施例2I、白腐菌T42酶液的制備所述白腐菌T42酶液按以下方法制備(I)培養(yǎng)基的制備將下述物質(zhì)按所述重量百分比進行稱量配合。①PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯提取液3. 0%、葡萄糖30. 0%、KH2P042. 0%、MgSO4 *7H203. 0%、維生素B1O. 003%、瓊脂20. 0%、酒石酸氨0. 3%，用I. OmoI/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至5. 5備用；②產(chǎn)酶培養(yǎng)基無水CaCl2 0. 10%、KH2PO4 0. 05%、無水 MgSO4 0. 12%、葡萄糖 0. 2%、酒石酸氨0. 30%、硝酸氨0. 40%、維生素B1O. 003%、微量元素混合液0. 002%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)PH至5. 5備用；③微量元素混合液由ZnS04、FeSO4 7H20、CuSO4 5H20、HBO3 和 NaMoO4 2H20 復(fù)配而成，濃度為0. 1%。(2)白腐菌T42菌株的培養(yǎng)將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基上，在溫度50°C，轉(zhuǎn)速400r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)6d，然后將菌懸液3%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)9d后得到發(fā)酵液； 在8000r/min下離心lOmin，上清液即為白腐菌T42酶液。2、白腐菌T42酶液處理煙梗漿料在煙梗磨漿階段，加入3%的白腐菌T42酶液，所述酶液的用量以煙梗絕干質(zhì)量計，調(diào)節(jié)煙梗漿料的PH值為5. 5，煙梗漿料的溫度為45°C，保持上述溫度的時間為70min ；經(jīng)檢測，白腐菌T42酶液降解煙梗漿料中木質(zhì)素后，制備的再造煙葉柔軟度提高了 13. 4%，感官質(zhì)量評價提高了 I. 3分。實施例3I、白腐菌T42酶液的制備所述白腐菌T42酶液按以下方法制備(I)培養(yǎng)基的制備將下述物質(zhì)按所述重量百分比進行稱量配合。①PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯提取液I. 0%、葡萄糖20. 0%、KH2PO4 3. 0%、MgSO4 *7H20 3. 0%、維生素B1O. 003%、瓊脂10. 0%、酒石酸氨I. 0%，用I. OmoI/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH
至4. 5備用；②產(chǎn)酶培養(yǎng)基無水CaCl2 0. 10%、KH2PO4 0. 04%、無水 MgSO4 0. 10%、葡萄糖 0. 1%、酒石酸氨0. 20%、硝酸氨0. 70%、維生素B1O. 003%、微量元素混合液0. 004%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)PH至6. 0備用；③微量元素混合液由MnSO4' NaCU ZnSO4' FeSO4 7H20、CuSO4 5H20、AlK (SO4)2 12H20、HBO3> CoCl2 6H20 和 NaMoO4 2H20 復(fù)配而成，濃度為 0. 1%。(2)白腐菌T42菌株的培養(yǎng)將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基上，在溫度40°C，轉(zhuǎn)速250r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)5d,然后將菌懸液4%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)8d后得到發(fā)酵液；在7000r/min下離心7min，上清液即為白腐菌T42酶液。2、白腐菌T42酶液處理煙梗漿料在煙梗磨漿階段，加入2%的白腐菌T42酶液，所述酶液的用量以煙梗絕干質(zhì)量計，調(diào)節(jié)煙梗漿料的PH值為3. 0，煙梗漿料的溫度為40°C，保持上述溫度的時間為30min。 經(jīng)檢測，白腐菌T42酶液降解煙梗漿料中木質(zhì)素后，制備的重組煙葉柔軟度提高了 15. 6%，感官質(zhì)量評價提高了 I. 8分。實施例4I、白腐菌T42酶液的制備所述白腐菌T42酶液按以下方法制備(I)培養(yǎng)基的制備將下述物質(zhì)按所述重量百分比進行稱量配合。①PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯提取液3. 0%、葡萄糖25. 0%、KH2PO4 4. 0%、MgSO4 *7H20 4. 0%、維生素B1O. 004%、瓊脂25. 0%、酒石酸氨2. 0%，用I. OmoI/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至5. 5備用；②產(chǎn)酶培養(yǎng)基無水CaCl2 0. 05%、KH2PO4 0. 08%、無水 MgSO4 0. 20%、葡萄糖 0. 2%、酒石酸氨0. 10%、硝酸氨0. 50%、維生素B1O. 004%、微量元素混合液0. 005%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)PH至5. 5備用；③微量元素混合液由MnSO4' NaCU CuSO4 5H20、AlK (SO4) 2 12H20、HBO3 和CoCl2 6H20復(fù)配而成，濃度為0. 1%。(2)白腐菌T42菌株的培養(yǎng)將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基上，在溫度50°C，轉(zhuǎn)速350r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)7d，然后將菌懸液5%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)IOd后得到發(fā)酵液；在9000r/min下離心8min，上清液即為白腐菌T42酶液。2、白腐菌T42酶液處理煙梗漿料在煙梗磨漿階段，加入3%的白腐菌T42酶液，所述酶液的用量以煙梗絕干質(zhì)量計，調(diào)節(jié)煙梗漿料的PH值為4. 0，煙梗漿料的溫度為60°C，保持上述溫度的時間為40min。經(jīng)檢測，白腐菌T42酶液降解煙梗漿料中木質(zhì)素后，制備的再造煙葉柔軟度提高了 8. 9%，感官質(zhì)量評價提高了 0. 9分。實施例5I、白腐菌T42酶液的制備所述白腐菌T42酶液按以下方法制備(I)培養(yǎng)基的制備
將下述物質(zhì)按所述重量百分比進行稱量配合。①PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯提取液2. 0%、葡萄糖30. 0%、KH2PO4 2. 0%、MgSO4 7H20 I. 0%、維生素B1O. 005%、瓊脂15. 0%、酒石酸氨0. 08%，用I. OmoI/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6. 0備用;②產(chǎn)酶培養(yǎng)基無水CaC l2 0. 20%、KH2PO4 0. 06%、無水 MgSO4 0. 15%、葡萄糖 0. 3%、酒石酸氨0. 40%、硝酸氨0. 10%、維生素B1O. 007%、微量元素混合液0. 003%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)PH至4. 0備用；③微量元素混合液由ZnS04、FeSO4 7H20、A1K (SO4) 2 12H20、HB03、CoCl2 6H20和NaMoO4 2H20復(fù)配而成，濃度為0. 1%。(2)白腐菌T42菌株的培養(yǎng)將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基上，在溫度30°C，轉(zhuǎn)速200r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)6d,然后將菌懸液5%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)IOd后得到發(fā)酵液；在10000r/min下離心IOmin,上清液即為白腐菌T42酶液。2、白腐菌T42酶液處理煙梗漿料在煙梗磨漿階段,加入5%的白腐菌T42酶液，所述酶液的用量以煙梗絕干質(zhì)量計，調(diào)節(jié)煙梗漿料的PH值為6. 0，煙梗漿料的溫度為70°C，保持上述溫度的時間為60min ；經(jīng)檢測，白腐菌T42酶液降解煙梗漿料中木質(zhì)素后，制備的再造煙葉柔軟度提高了 8. 7%，感官質(zhì)量評價提高了 0. 8分。實施例6I、白腐菌T42酶液的制備所述白腐菌T42酶液按以下方法制備(I)培養(yǎng)基的制備將下述物質(zhì)按所述重量百分比進行稱量配合。①PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯提取液4. 0%、葡萄糖35. 0%、KH2PO4 5. 0%、MgSO4 7H20 2. 0%、維生素B1O. 002%、瓊脂20. 0%、酒石酸氨I. 50%，用I. OmoI/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6. 5備用;②產(chǎn)酶培養(yǎng)基無水CaCl2 0. 30%,KH2PO4 0. 10%、無水 MgSO4 0. 05%、葡萄糖 0. 40%、酒石酸氨0. 60%、硝酸氨0. 30%、維生素B1O. 008%、微量元素混合液0. 003%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)PH至4. 5備用；③微量元素混合液由MnS04、NaCl、ZnS04、FeSO4 7H20、HB03、CoCl2 6H20、NaMoO4 2H20復(fù)配而成，濃度為0. 1%。(2)白腐菌T42菌株的培養(yǎng)將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基，在溫度50°C，轉(zhuǎn)速500r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)7d，然后將菌懸液5%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)13d后得到發(fā)酵液；在8000r/min下離心12min，上清液即為白腐菌T42酶液。2、白腐菌T42酶液處理煙梗漿料在煙梗磨漿階段，加入10%的白腐菌T42酶液，所述酶液的用量以煙梗絕干質(zhì)量計，調(diào)節(jié)煙梗漿料的PH值為5. 0，煙梗漿料的溫度為50°C，保持上述溫度的時間為70min ；經(jīng)檢測，白腐菌T42酶液降解煙梗漿料中木質(zhì)素后，制備的再造煙葉柔軟度提高了 16. 5%，感官質(zhì) 量評價提高了 2. I分。
權(quán)利要求
1.一種利用白腐菌酶液提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法，按照現(xiàn)有工藝技術(shù)方法完成煙梗原料磨漿階段前后的工序，其特征在于在再造煙葉生產(chǎn)過程的煙梗原料磨漿階段，按照煙梗原料物質(zhì)干量的I. (Γιο. 0%的比例加入白腐菌Τ42酶液，在煙梗漿料溫度為30^80°C, pH值為2. (Γ6. 0，處理時間為2(T90min的條件下降解煙梗漿料中木質(zhì)素，其中所述的白腐菌 T42 菌株名為 Coriolus versicolor T42，保藏號為 CCTCC NO: M 2012252。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的利用白腐菌酶液提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法，其特征在于其中，所述白腐菌T42酶液制備步驟 DPDA綜合瓊脂培養(yǎng)基的制備按重量百分比進行稱量配合馬鈴薯提取液I. (Γ4. 0%、葡萄糖 20. 0 40· 0%、KH2PO4 I. 0 6· 0%、MgSO4 · 7H20 I. 0 5· 0%、維生素 B1 O. 001 O. 006%、瓊脂10. 0 30· 0%、酒石酸氨O(jiān). 05 2. 5%，用I. OmoI/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH至3. 0 6· 5備用; 2)產(chǎn)酶培養(yǎng)基按重量百分比進行稱量配合無水CaCl2O. 05^0. 30%、KH2PO4O. 02 O. 10%、無水MgSO4 O. 05 O. 20%、葡萄糖O. I O. 5%、酒石酸氨O(jiān). 10 0· 80%、硝酸氨O(jiān). 10^0. 90%、維生素B1 O. ΟΟΓΟ. 008%、微量元素混合液0. 00Γ0. 005%，用醋酸-醋酸鈉緩沖液調(diào)節(jié)PH至3. 5 6. 5備用； 3)白腐菌T42菌株的培養(yǎng)將白腐菌T42菌株接種在PDA綜合瓊脂培養(yǎng)基上，在溫度20^500C，轉(zhuǎn)速15(T600r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)5 7d，然后將菌懸液2 7%接種于產(chǎn)酶培養(yǎng)基到發(fā)酵罐中，培養(yǎng)8 15d后得到發(fā)酵液；在7000 150001·/!^!!下離心5 15min，上清液即為白腐菌T42酶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用白腐菌酶液提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法，其特征在于所述步驟2)中，微量元素混合液由MnS04、NaCl、ZnS04、FeS04 ·7Η20,CuSO4 ·5Η20、AlK (SO4) 2 · 12H20、HB03、CoCl2 · 6Η20和NaMoO4 · 2Η20任選一種或幾種復(fù)配而成，微量元素混合液濃度為0. 1%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用白腐菌酶液提高再造煙葉柔軟度和感官質(zhì)量的方法，按照現(xiàn)有工藝技術(shù)方法完成煙梗原料磨漿階段前后的工序，在再造煙葉生產(chǎn)過程的煙梗原料磨漿階段，按照煙梗原料物質(zhì)干量的1.0~10.0%的比例加入白腐菌T42酶液，在煙梗漿料溫度為30~80℃，pH值為2.0~6.0，處理時間為20~90min的條件下降解煙梗漿料中木質(zhì)素，其中所述的白腐菌T42菌株名為Coriolus versicolor T42，保藏號為CCTCC NO: M 2012252。本發(fā)明的方法合理，操作方便，效果顯著，能顯著提高再造煙葉的柔軟度，同時使再造煙葉的感官質(zhì)量得到提升，木質(zhì)氣減少，刺激性降低。
文檔編號A24B15/20GK102823938SQ20121029592
公開日2012年12月19日 申請日期2012年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月17日
發(fā)明者毛耀, 劉志昌, 姚元軍, 王鳳蘭, 王亮 申請人:湖北中煙工業(yè)有限責(zé)任公司, 武漢淡雅香科技發(fā)展股份有限公司