一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料及其制備方法
【專利摘要】一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料及其制備方法。本發(fā)明涉及構(gòu)建醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型技術(shù)領(lǐng)域，其制備方法是：按比例稱取大豆油及可可脂加熱融化呈半流態(tài)脂料；再稱取原材料：酪蛋白、玉米淀粉、麥芽糊精、蔗糖、纖維素、L?胱氨酸、復(fù)合礦物質(zhì)、無水磷酸氫鈣、碳酸鈣、一水合檸檬酸鉀、復(fù)合維生素和氯化膽堿；將所稱取的原材料混合，通過環(huán)模制粒機(jī)制成直徑為10mm，長度為10～20mm的飼料顆粒；再通過除濕機(jī)再進(jìn)行除濕干燥24～48h，最終得干燥后飼料顆粒；將產(chǎn)品包裝，用鈷60進(jìn)行輻照滅菌，得到成品。本發(fā)明產(chǎn)品營養(yǎng)成分穩(wěn)定，符合嚙齒動(dòng)物進(jìn)食習(xí)慣的硬度和口感；本發(fā)明中的模型成功率高，過程簡單，成模效果好。
【專利說明】
一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及構(gòu)建醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]肝豆?fàn)詈俗冃?hepatolenticulardegenerat1n,HLD)，又稱Wilson病，是一種常染色體隱性遺傳性疾病，是先天性銅代謝障礙性疾病。臨床上以肝臟損害、腎臟損害、錐體外系癥狀與角膜色素環(huán)等為主要表現(xiàn)。
[0003]銅是人體必需的微量元素，作為輔基參與多種重要生物酶合成。正常成人每日從飲食攝取銅2?5mg，約30 %在胃、十二指腸及空腸上端吸收入血，大部分與白蛋白疏松結(jié)合進(jìn)入肝細(xì)胞，在肝細(xì)胞中銅與α2球蛋白牢固結(jié)合成銅藍(lán)蛋白(ceruloplasmin，CP)，CP有氧化酶活性，呈深藍(lán)色，剩余銅被結(jié)合到其他特殊銅蛋白中。正常人每日膽汁排銅量約1200μg。約70 %的CP存在于血漿，其余存在于血管外，血液循環(huán)中90 %?95 %的銅結(jié)合在CP上。CP有重要生理功能，可作為銅的供體參與細(xì)胞色素C及其他銅蛋白合成，具有亞鐵氧化酶作用，將亞鐵氧化為高鐵狀態(tài)，使氧還原成水。剩余的銅通過膽汁、尿液和汗液排出體外。肝豆?fàn)詈俗冃曰颊咩~藍(lán)蛋白合成障礙，90 %以上患者血清CP量明顯減少，但肝內(nèi)前銅藍(lán)蛋白(Apo-CP)含量及結(jié)構(gòu)正常，提示生化障礙發(fā)生在肝內(nèi)Apo-CP與銅結(jié)合環(huán)節(jié)，CP合成障礙是本病基本的遺傳缺陷。肝內(nèi)銅代謝紊亂引起血清CP合成障礙，導(dǎo)致CP降低，尿銅排泄增多，膽道排銅減少，過量銅在肝臟、腦、腎臟及角膜等組織沉積致病。
[0004]正常肝銅含量為50yg/g干重，肝豆?fàn)詈俗冃曰颊吒毋~含量多為250yg以上/g干重。肝臟功能主要指標(biāo)谷丙轉(zhuǎn)氨酶的正常參考值為O?40U/L。肝豆?fàn)詈俗冃曰颊咄ǔＤ蜚~量〉200yg/24h(正常<50yg/24h)。
[0005]肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型可以較好地模擬肝銅沉積誘導(dǎo)肝損傷的病理過程，且具有簡單實(shí)用、重復(fù)性好等特點(diǎn)，是研究銅代謝障礙性疾病較為理想的動(dòng)物模型。
[0006]目前，國內(nèi)常用高劑量硫酸銅溶液對(duì)嚙齒類動(dòng)物進(jìn)行灌胃制作肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型;灌胃法的缺點(diǎn)是:1、在使用過程中灌胃法雖然使用的劑量準(zhǔn)確，但是在操作過程中會(huì)給動(dòng)物的身體造成一定的刺激，特別是容易傷及消化道及容易將藥物誤入氣管，從而造成由于呼吸窒息導(dǎo)致動(dòng)物的非正常性死亡，而且使用灌胃法也不符合嚙齒類動(dòng)物自由采食的進(jìn)食習(xí)慣;2、工作人員在操作過程中不僅操作的工作量大，增加工作人員的工作負(fù)擔(dān)，長時(shí)間的操作容易出現(xiàn)差錯(cuò)，從而導(dǎo)致動(dòng)物的死亡率增加以及增加了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定性;3、灌胃法容易導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，并且還容易導(dǎo)致表型不穩(wěn)定、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有偏差及成模率低;本發(fā)明通過使用強(qiáng)化碳酸銅的高銅飼料喂養(yǎng)嚙齒類動(dòng)物，制備過程中采用單一、穩(wěn)定營養(yǎng)素構(gòu)成的營養(yǎng)成分穩(wěn)定的飼料，這樣的飼料顆粒具有成型效果好、硬度強(qiáng)、不易破碎的特點(diǎn)，不僅保證了動(dòng)物的攝食量，并且更好的保證嚙齒類動(dòng)物本身的磨牙過程;符合嚙齒動(dòng)物進(jìn)食習(xí)慣的硬度和口感，本發(fā)明誘導(dǎo)的肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型成功率高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供了一種由單一穩(wěn)定的營養(yǎng)素構(gòu)成同時(shí)強(qiáng)化碳酸銅(是正常飼料的25?30倍)的造模飼料，該飼料構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的成功率高、成模效果好、可重復(fù)性強(qiáng)。
[0008]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料，由以下重量比的組份組成:酪蛋白15 %?30 %、玉米淀粉30 %?50 %、麥芽糊精10%?25%、蔗糖15%?30%、纖維素4%?10%、大豆油I %?8%、可可脂0.5%?7%、L-胱氨酸0.1 %?I %、復(fù)合礦物質(zhì)0.5 %?4 %、無水磷酸氫鈣I %?3 %、碳酸鈣0.2 %?I %、一水合檸檬酸鉀0.5 %?3 %、復(fù)合維生素0.5 %?3 %和氯化膽堿0.2 %?I %。
[0009]所述復(fù)合礦物質(zhì)由下述組分按重量比組成:氯化鈉0.1 %?I %、氧化鎂0.01 %?0.2%、硫酸鎂0.I %?I %、四水合鉬酸銨0.0001 %?0.008%、硫酸鉻鉀0.004%?0.01 %、碳酸銅0.02 %?0.1 %、檸檬酸鐵0.05 %?0.5 %、碳酸錳水合物0.01 %?0.1 %、碘酸鉀0.00005% ?0.0005%、氟化鈉 0.0008% ?0.001 %、亞砸酸鈉0.00005% ?0.0005%、碳酸鋅0.005%?0.08%和玉米淀粉0.2%?I %。
[0010]所述復(fù)合維生素由下述組分按重量比組成:維生素A醋酸酯0.0005%?0.005%、維生素D3 0.005 %?0.05 %、維生素E醋酸酯0.08 %?0.3 %、維生素K1.0001 %?0.001 %、生物素0.001% ?0.05%、維生素 Bi20.001% ?0.01%、葉酸0.0001% ?0.001 %、煙酸0.007% ?0.07%、泛酸鈣0.005% ?0.01 %、維生素B60.0001 % ?0.001 %、維生素B20.0001 %?0.001 %、維生素B1.0001 %?0.001 %和玉米淀粉0.4%?2.5%。
[0011]其制備方法包括以下步驟:
[0012]I)、原材料預(yù)處理，
[0013]首先，稱取大豆油1%?8%，可可脂0.5%?7%，將大豆油和可可脂加熱至80?900C融化，加入原材料總重量5 %?12 %的水，攪拌均勻，呈半流態(tài)脂料;擱置待用；
[0014]按照比例稱取原材料:酪蛋白、玉米淀粉、麥芽糊精、蔗糖、纖維素、L-胱氨酸、復(fù)合礦物質(zhì)、無水磷酸氫鈣、碳酸鈣、一水合檸檬酸鉀、復(fù)合維生素和氯化膽堿；
[0015]2)、制備混合料，
[0016]將所稱取的原材料混合，攪拌均勻，加入上述半流態(tài)脂料，繼續(xù)混合2?4分鐘；
[0017]3)、制備產(chǎn)品，
[0018]在20?30 0C下，通過環(huán)模制粒機(jī)制成直徑為1mm，長度為10?20mm的飼料顆粒;在18?25 °C下，將飼料顆粒通過除濕機(jī)再進(jìn)行除濕干燥24?48h，最終得干燥后飼料顆粒，飼料顆粒中水分的含量為5%?10% ;
[0019]4)、得到成品，
[0020]將上述產(chǎn)品包裝，用鈷60進(jìn)行輻照滅菌，得到成品。
[0021]鈷60輻射源產(chǎn)生γ射線，作用于微生物，可以直接或者間接破壞微生物的細(xì)胞核，從而殺死微生物，起到消毒殺菌的作用。
[0022]其中:酪蛋白:具有pH敏感性，在腸胃的酸性環(huán)境下可以凝固變成凝膠狀因此酪蛋白消化率較緩慢;消化慢有很多好處，可以長時(shí)間保護(hù)，修復(fù)和滋養(yǎng)身體。
[0023]玉米淀粉:含有豐富的營養(yǎng)素，玉米中含有大量的卵磷脂、亞油酸、谷物醇、維生素E、纖維素等，具有降血壓、降血脂、抗動(dòng)脈硬化、預(yù)防腸癌、美容養(yǎng)顏、延緩衰老等多種保健功效。
[0024]麥芽糊精:具有增稠性強(qiáng)，載體性好，發(fā)酵性小，填充效果好，不吸潮、無異味、易消化、低熱、低甜度等特點(diǎn)。麥芽糊精含有大量的多糖類，另外還含有鈣、鐵等對(duì)人體有益的微量元素及礦物質(zhì)，并能促進(jìn)人體正常的物質(zhì)代謝。
[0025]蔗糖:是光合作用的主要產(chǎn)物，是植物儲(chǔ)藏、積累和運(yùn)輸糖分的主要形式，由一分子葡萄糖和一分子果糖脫水縮合形成，易溶于水較難溶于乙醇。
[0026]纖維素:能保持腸道通暢，排毒通便，維護(hù)肌膚健康。
[0027]大豆油:含棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、油酸、亞油酸、亞麻油酸以及多量的維生素E、維生素D、維生素A、胡蘿卜素、鈣、磷、鐵和豐富的卵磷脂，消化吸收率高達(dá)98%。可促進(jìn)膽固醇分解排泄，減少血液中膽固醇在血管壁的沉積，降低心血管病發(fā)病率，保護(hù)機(jī)體，促進(jìn)大腦、神經(jīng)的生長發(fā)育。
[0028]可可脂:是從可可液塊中取出的乳黃色硬性天然植物油脂，是一種非常獨(dú)特的油月旨。是一種既有硬度，溶解得又快的油脂。可可脂是已知最穩(wěn)定的食用油，含有能防止變質(zhì)的天然抗氧化劑。
[0029]L-胱氨酸:有促進(jìn)機(jī)體細(xì)胞氧化和還原機(jī)能，增加白血球和阻止病原菌發(fā)育等作用。
[0030]氯化膽堿:氯化膽堿屬B族維生素之一，它是生物組織中乙酰膽堿、卵磷酯和神經(jīng)磷酯的組成部分，在動(dòng)物體內(nèi)可以調(diào)節(jié)脂肪的代謝與轉(zhuǎn)化，可以預(yù)防肝臟中沉積及其組織變性作為一種甲基的供體，可促進(jìn)氨基酸的再形成，提高氨基酸的利用率。
[0031]碳酸銅:提供銅元素，銅是人體必需的微量元素，作為輔基參與多種重要生物酶合成。
[0032]無水磷酸氫鈣:主要提供磷、鈣等礦物質(zhì)營養(yǎng)，動(dòng)物極易消化吸收?？杉铀賱?dòng)物生長發(fā)育，縮短育肥期，快速增重;能提高動(dòng)物的配種率及成活率，同時(shí)具有增強(qiáng)動(dòng)物抗病耐寒能力，對(duì)畜禽的軟骨癥、白痢癥、癱疾癥有防治作用。
[0033]碳酸鈣:可作補(bǔ)鈣劑吸收率可達(dá)39%，僅次于果酸鈣可溶于胃酸，已成為劑型最多、應(yīng)用最多的補(bǔ)鈣劑。
[0034]一水合檸檬酸鉀:又稱枸櫞酸鉀，用作緩沖劑、螯合劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、乳化劑、
調(diào)味劑等。
[0035]維生素D3:提高肌體對(duì)鈣、磷的吸收，使血漿鈣和血漿磷的水平達(dá)到飽和程度;促進(jìn)生長和骨骼鈣化，促進(jìn)牙齒健全;通過腸壁增加磷的吸收，并通過腎小管增加磷的再吸收;維持血液中檸檬酸鹽的正常水平;維生素D3是活性的7-脫氫膽固醇。
[0036]維生素K1:可促使肝臟合成凝血酶原，用于低凝血酶原血癥;還具有鎮(zhèn)痛、緩解支氣管痙攣的作用，對(duì)內(nèi)臟平滑肌絞痛、膽管痙攣、腸痙攣引起的絞痛有明顯的效果;還可以用于多維食品和禽畜飼料的添加劑。
[0037]生物素:是脂肪和蛋白質(zhì)正常代謝不可或缺的物質(zhì)，維持上皮組織結(jié)構(gòu)的完整和健全;增強(qiáng)機(jī)體免疫反應(yīng)和抵抗力;維持正常生長發(fā)育。
[0038]煙酸:在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為煙酸胺，煙酸胺是輔酶的組成部分，參與體內(nèi)脂質(zhì)代謝，組織呼吸的氧化工程和糖類無氧分解的過程。
[0039]泛酸鈣:用于醫(yī)藥、食品及飼料添加劑。是輔酶A的成分，參與碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝作用。
[0040]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明造模飼料中，強(qiáng)化碳酸銅含量(是正常飼料的25?30倍，正常飼料中銅含量為10mg/kg)，通過高銅飼料飼喂嚙齒類動(dòng)物，誘導(dǎo)肝豆?fàn)詈俗冃阅Ｐ?，較好地模擬肝銅沉積誘導(dǎo)肝損傷的病理過程。產(chǎn)品采用單一穩(wěn)定的營養(yǎng)素構(gòu)成，營養(yǎng)成分穩(wěn)定，符合嚙齒動(dòng)物進(jìn)食習(xí)慣的硬度和口感。本發(fā)明構(gòu)建模型成功率高，過程簡單，成模效果好。
【附圖說明】
[0041 ]圖1是本發(fā)明的制備流程示意圖；
[0042]圖2是Wistar大鼠血清銅(Cu)含量曲線圖；
[0043]圖3是Wistar大鼠肝組織銅(Cu)含量曲線圖；
[0044]圖4是Wistar大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平曲線圖。
【具體實(shí)施方式】
[0045]下面就【具體實(shí)施方式】，進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解這些實(shí)施方式僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的各種等價(jià)形式的修改均落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求所限定的范圍。
[0046]為了理解本發(fā)明，下面對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0047]—種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料，由以下重量比的組份組成:酪蛋白15%?30%、玉米淀粉30%?50%、麥芽糊精10%?25%、蔗糖15%?30%、纖維素4%?10%、大豆油I %?8%、可可脂0.5%?7%、L-胱氨酸0.1%?I %、復(fù)合礦物質(zhì)0.5%?4%、無水磷酸氫鈣I %?3 %、碳酸鈣0.2 %?1 %、一水合檸檬酸鉀0.5 %?3 %、復(fù)合維生素0.5%?3%和氯化膽喊0.2%?I %。
[0048]所述復(fù)合礦物質(zhì)由下述組分按重量比組成:氯化鈉0.1 %?I %、氧化鎂0.01 %?0.2%、硫酸鎂0.I %?I %、四水合鉬酸銨0.0001 %?0.008%、硫酸鉻鉀0.004%?0.01 %、碳酸銅0.02 %?0.1 %、檸檬酸鐵0.05 %?0.5 %、碳酸錳水合物0.01 %?0.1 %、碘酸鉀0.00005% ?0.0005%、氟化鈉 0.0008% ?0.001 %、亞砸酸鈉0.00005% ?0.0005%、碳酸鋅0.005%?0.08%和玉米淀粉0.2%?I %。
[0049]所述復(fù)合維生素由下述組分按重量比組成:維生素A醋酸酯0.0005%?0.005%、維生素D3 0.005 %?0.05 %、維生素E醋酸酯0.08 %?0.3 %、維生素K1.0001 %?0.001 %、生物素0.001% ?0.05%、維生素 Bi20.001% ?0.01%、葉酸0.0001% ?0.001 %、煙酸0.007% ?0.07%、泛酸鈣0.005% ?0.01 %、維生素B60.0001 % ?0.001 %、維生素B20.0001 %?0.001 %、維生素B1.0001 %?0.001 %和玉米淀粉0.4%?2.5%。
[0050]其制備方法包括以下步驟:
[°°511 I)、原材料預(yù)處理，
[0052]首先，稱取大豆油1%?8%，可可脂0.5%?7%，將大豆油和可可脂加熱至80?900C融化，加入原材料總重量5 %?12 %的水，攪拌均勻，呈半流態(tài)脂料;擱置待用；
[0053]按照比例稱取原材料:酪蛋白、玉米淀粉、麥芽糊精、蔗糖、纖維素、L-胱氨酸、復(fù)合礦物質(zhì)、無水磷酸氫鈣、碳酸鈣、一水合檸檬酸鉀、復(fù)合維生素和氯化膽堿；
[0054]2)、制備混合料，
[0055]將所稱取的原材料混合，攪拌均勻，加入上述半流態(tài)脂料，繼續(xù)混合2?4分鐘；
[0056]3)、制備產(chǎn)品，
[0057]在20?30 °C下，通過環(huán)模制粒機(jī)制成直徑為10mm，長度為10?20mm的飼料顆粒;在18?25 °C下，將飼料顆粒通過除濕機(jī)再進(jìn)行除濕干燥24?48h，最終得干燥后飼料顆粒，飼料顆粒中水分的含量為5%?10% ;
[0058]4)、得到成品，
[0059]將上述產(chǎn)品包裝，用鈷60進(jìn)行輻照滅菌，得到成品。
[0060]具體實(shí)施例一
[0061]I)、原材料預(yù)處理，
[0062]首先，稱取原材料中的材料:大豆油I%，可可脂0.5%,將大豆油和可可脂加熱至80°C融化，往加熱融化后的大豆油和可可脂混合物中加入原材料總重量5%的水，攪拌均勻，呈半流態(tài)脂料;擱置待用；
[0063]按照比例稱取原材料中其他的材料:酪蛋白15%、玉米淀粉30%、麥芽糊精10%、蔗糖15 %、纖維素4 %、L-胱氨酸0.1 %、復(fù)合礦物質(zhì)0.5%,無水磷酸氫鈣I %、碳酸鈣0.2%,一水合檸檬酸鉀0.5%,復(fù)合維生素0.5 %和氯化膽堿0.2%；
[0064]2)、制備混合料，
[0065]將上述所稱取的原材料混合，攪拌均勻，加入上述半流態(tài)脂料，繼續(xù)混合2?4分鐘；
[0066]3)、制備產(chǎn)品，
[0067]在20?30 °C下，通過環(huán)模制粒機(jī)制成直徑為10mm，長度為10?20mm的飼料顆粒;在18?25 °C下，將飼料顆粒通過除濕機(jī)再進(jìn)行除濕干燥24?48h，最終得干燥后飼料顆粒，飼料顆粒中水分的含量為5%?10% ;
[0068]4)、得到成品，
[0069]將上述產(chǎn)品包裝，用鈷60進(jìn)行輻照滅菌，得到成品。
[0070]具體實(shí)施例二:
[0071]I)、原材料預(yù)處理，
[0072]首先，稱取原材料中的材料:大豆油8%，可可脂7%，將大豆油和可可脂加熱至900C融化，往加熱融化后的大豆油和可可脂混合物中加入原材料總重量12 %的水，攪拌均勻，呈半流態(tài)脂料;擱置待用；
[0073]按照比例稱取原材料中其他的材料:酪蛋白30%、玉米淀粉50%、麥芽糊精25%、蔗糖30%、纖維素10%、L-胱氨酸I %、復(fù)合礦物質(zhì)4%、無水磷酸氫鈣3%、碳酸鈣I %、一水合檸檬酸鉀3%、復(fù)合維生素3%和氯化膽堿I % ；
[0074]2)、制備混合料，
[0075]將所稱取的原材料混合，攪拌均勻，加入上述半流態(tài)脂料，繼續(xù)混合2?4分鐘；
[0076]3)、制備產(chǎn)品，
[0077]在20?30 °C下，通過環(huán)模制粒機(jī)制成直徑為10mm，長度為10?20mm的飼料顆粒;在18?25 °C下，將飼料顆粒通過除濕機(jī)再進(jìn)行除濕干燥24?48h，最終得干燥后飼料顆粒，飼料顆粒中水分的含量為5%?10% ;
[0078]4)、得到成品，
[0079]將上述產(chǎn)品包裝，用鈷60進(jìn)行輻照滅菌，得到成品。
[0080]具體實(shí)施例三:
[0081]I)、原材料預(yù)處理，
[0082]首先，稱取原材料中的材料:大豆油4.5 %，可可脂3.8%,將大豆油和可可脂加熱至85°C融化，往加熱融化后的大豆油和可可脂混合物中加入原材料總重量9%的水，攪拌均勻，呈半流態(tài)脂料;擱置待用；
[0083]按照比例稱取原材料中其他的材料:酪蛋白23%、玉米淀粉40%、麥芽糊精18%、蔗糖23 %、纖維素7 %、L-胱氨酸0.6%,復(fù)合礦物質(zhì)2.3 %、無水磷酸氫鈣2 %、碳酸鈣0.6%,一水合檸檬酸鉀1.8%,復(fù)合維生素1.8 %和氯化膽堿0.6 %。
[0084]2)、制備混合料，
[0085]將所稱取的原材料混合，攪拌均勻，加入上述半流態(tài)脂料，繼續(xù)混合2?4分鐘；
[0086]3)、制備產(chǎn)品，
[0087]在20?30 °C下，通過環(huán)模制粒機(jī)制成直徑為10mm，長度為10?20mm的飼料顆粒;在18?25 °C下，將飼料顆粒通過除濕機(jī)再進(jìn)行除濕干燥24?48h，最終得干燥后飼料顆粒，飼料顆粒中水分的含量為5%?10% ;
[0088]4)、得到成品，
[0089]將上述產(chǎn)品包裝，用鈷60進(jìn)行輻照滅菌，得到成品。
[0090]經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)表明，本發(fā)明采用由單一穩(wěn)定的營養(yǎng)素構(gòu)成同時(shí)強(qiáng)化碳酸銅的高銅飼料;構(gòu)建模型成功率高，模型制作過程簡單，成模效果好;可重復(fù)，穩(wěn)定性好等并為動(dòng)物試驗(yàn)資料所證明，本發(fā)明的有關(guān)動(dòng)物試驗(yàn)資料:
[0091]1.動(dòng)物模型制備
[0092]健康雄性Wistar大鼠，40只，3月齡，體重210 ± 25g，隨機(jī)將大鼠分為模型組和對(duì)照組。模型組大鼠喂養(yǎng)本發(fā)明高銅飼料，對(duì)照組大鼠喂養(yǎng)普通飼料，各組均自由進(jìn)食、飲水。喂養(yǎng)12周;檢測血清和肝組織銅含量，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。
[0093]2.血清和肝組織銅(Cu)以及血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的測定方法
[0094]血清銅檢測以待測血清用去離子水1:10稀釋后混勻，采用原子吸收分光光度計(jì)測量。肝組織300?500mg，先用0.9%NaCl反復(fù)洗凈，再用干凈濾紙吸干，用濃硝酸(分析純)1mL低溫加熱進(jìn)行消化，等組織完全溶解至黃色澄清透明后，用原子吸收法測銅含量。血清標(biāo)本上自動(dòng)生化儀測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。
[0095]3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0096]I)、大鼠肝組織的變化
[0097]對(duì)照組大鼠肝小葉正常，中央靜脈、肝血竇結(jié)構(gòu)清晰，模型組大鼠肝臟可見線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，溶酶體顆粒明顯增多。Wistar大鼠喂養(yǎng)高銅飼料12周，肝組織的大量銅離子沉積，最高達(dá)到對(duì)照組的數(shù)十倍，銅離子在肝臟的過量沉積可以導(dǎo)致肝細(xì)胞的破壞。
[0098]2)、血清和肝組織銅(Cu)含量以及血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的變化
[0099]模型組大鼠的血清銅含量為(4.68±0.37mg/mL)，顯著高于對(duì)照組(1.99土0.311^/1^);模型組大鼠的肝組織銅含量為(15.93±3.221^/1^)，顯著高于對(duì)照組(0.41±0.23mg/kg)，說明隨著高銅飼料喂養(yǎng)時(shí)間的延長，肝組織和血清銅含量增加，但肝組織的銅含量增加幅度更大。模型組大鼠的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平為(198.27 ± 15.42U/L)，明顯高于對(duì)照組(37.06±1.13U/L)。模型組大鼠的谷丙轉(zhuǎn)氨酶大量升高，肝細(xì)胞損害嚴(yán)重。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料，其特征在于，由以下重量比的組份組成:酪蛋白15%?30%、玉米淀粉30%?50%、麥芽糊精10%?25%、蔗糖15%?30%、纖維素4%?10%、大豆油I %?8%、可可脂0.5%?7%、L-胱氨酸0.1%?I %、復(fù)合礦物質(zhì)0.5 %?4%、無水磷酸氫鈣I %?3 %、碳酸鈣0.2%?I %、一水合檸檬酸鉀0.5%?3 %、復(fù)合維生素0.5 %?3 %和氯化膽堿0.2 %?I %。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料，其特征在于，所述復(fù)合礦物質(zhì)由下述組分按重量比組成:氯化鈉0.1 %?I %、氧化鎂0.01 %?0.2%、硫酸鎂0.1%?I %、四水合鉬酸銨0.0001%?0.008%、硫酸鉻鉀0.004%?0.01 %、碳酸銅0.02%?0.I %、檸檬酸鐵0.05%?0.5%、碳酸錳水合物0.01 %?0.I %、碘酸鉀0.00005%?0.0005 %、氟化鈉0.0008 % ?0.001 %、亞砸酸鈉0.00005 % ?0.0005 %、碳酸鋅0.005 %?0.08 %和玉米淀粉0.2 %?I %。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料，其特征在于，所述復(fù)合維生素由下述組分按重量比組成:維生素A醋酸酯0.0005 %?0.005 %、維生素D30.005%?0.05 %、維生素E醋酸酯0.08%?0.3 %、維生素K1.0001 %?0.001 %、生物素0.001 % ?0.05%、維生素B120.001 % ?0.01 %、葉酸0.0001 % ?0.001 %、煙酸0.007% —0.07%、泛酸鈣0.005% ?0.01%、維生素 B60.0001% ?0.001 %、維生素 B20.0001% ?0.001 %、維生素 B1.0001% ?0.001% 和玉米淀粉 0.4% ?2.5%。4.一種權(quán)利要求1所述的一種構(gòu)建肝豆?fàn)詈俗冃詣?dòng)物模型的高銅飼料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)、原材料預(yù)處理， 首先，稱取大豆油1%?8%，可可脂0.5%?7%，將大豆油和可可脂加熱至80?90°C融化，加入原材料總重量5 %?12 %的水，攪拌均勻，呈半流態(tài)脂料;擱置待用； 按照比例稱取原材料:酪蛋白、玉米淀粉、麥芽糊精、蔗糖、纖維素、L-胱氨酸、復(fù)合礦物質(zhì)、無水磷酸氫鈣、碳酸鈣、一水合檸檬酸鉀、復(fù)合維生素和氯化膽堿； 2)、制備混合料， 將所稱取的原材料混合，攪拌均勻，加入上述半流態(tài)脂料，繼續(xù)混合2?4分鐘； 3)、制備廣品， 在20?30 °C下，通過環(huán)模制粒機(jī)制成直徑為10mm，長度為10?20mm的飼料顆粒;在18?.25 °C下，將飼料顆粒通過除濕機(jī)再進(jìn)行除濕干燥24?48h，最終得干燥后飼料顆粒，飼料顆粒中水分的含量為5%?10% ; 4)、得到成品， 將上述產(chǎn)品包裝，用鈷60進(jìn)行輻照滅菌，得到成品。
【文檔編號(hào)】A23K50/50GK105995119SQ201610461123
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月23日
【發(fā)明人】阮雄中, 馬劍, 鄭麗蓉
【申請(qǐng)人】揚(yáng)州百利吉生物醫(yī)藥有限公司