一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法,它屬于飼用酵母制備領域。本發(fā)明解決了現(xiàn)有飼用酵母制劑不耐高溫、不耐機械損傷、活力損失較大的技術問題。方法如下：向鮮飼用酵母加入脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯水溶液，攪勻；加入海藻酸鈣溶液，攪勻；加入殼聚糖和無水CaCl2混合液攪拌，靜置包埋；然后無菌抽濾或者冷凍離心后干燥。產(chǎn)品耐高溫，可耐受40~60℃；活力高，活細胞數(shù)可達400億個/g；耐機械損傷，細胞經(jīng)多層包埋，可耐受包埋、造粒、包裝、儲運等加工和儲運過程中的機械損傷，損傷后活細胞數(shù)可保留50%~80%以上；儲存時間長，室溫下能存儲12個月以上，室溫下存儲1年活細胞數(shù)能保留初始的90%以上。
【專利說明】一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于飼用酵母【技術領域】；具體涉及一種可用于生物飼料的耐高溫耐損傷的 飼用酵母制備方法。

【背景技術】
[0002] 現(xiàn)有的飼用酵母制劑只能采用真空包裝的活性干酵母產(chǎn)品形式提供給養(yǎng)殖戶，自 行配伍使用。這種真空包裝的活性干酵母不耐高溫和機械損傷，不能耐受飼料企業(yè)直接將 其配入配合飼料時，必須進行的攪拌加工、造粒、干燥工藝過程中的高溫和機械損傷，所引 起的酵母活力損失較大。由此影響了酵母生物飼料的實際保健效果的確定性和穩(wěn)定性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決現(xiàn)有飼用酵母制劑不耐高溫、不耐機械損傷、活力損失較大的技術 問題；而提供了一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法。
[0004] 為解決上述技術問題，本發(fā)明中耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法是按下述步驟 進行的： 步驟一、按脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯質量是鮮飼用酵母質量19Γ6%的配比向鮮飼用 酵母加入質量分數(shù)為19Γ15%的脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯（SMS)無菌水溶液，攪拌均勻， 得到溶液A ; 步驟二：按體積比為1:1向溶液A加入質量百分比濃度為29Γ4%海藻酸鈣無菌溶液，攪 拌均勻，得到溶液B ; 步驟三、按體積比為1:1向溶液B加入混合液充分攪拌f3h，其中所述的混合液由殼聚 糖、無水CaCl2及水配制并經(jīng)121°C高溫滅菌20min處理的，混合液中殼聚糖的質量百分比 濃度為29Γ4%，無水CaCl 2質量百分比濃度29Γ4%，靜置包埋； 步驟四、然后無菌抽濾或者冷凍離心后干燥，得到耐高溫耐損傷的飼用酵母。
[0005] 步驟一所述的鮮飼用酵母是通過下述步驟獲得的：將飼用酵母置于麥芽汁液體種 子培養(yǎng)基中28°C活化培養(yǎng)24h，按19Γ10%接種量接入液體馬鈴薯培養(yǎng)基中45°C培養(yǎng)24h， OD值> 1. 6,得到發(fā)酵培養(yǎng)液；再將發(fā)酵培養(yǎng)液置于冷凍離心機中300(T5000r/min離心 15~30min，用無菌蒸餾水洗滌2次后，得到鮮酵母，存于4°C冰箱備用。所述液體馬鈴薯培養(yǎng) 基馬鈴薯汁100ml，葡萄糖1?3%，無水CaCO 3O. 5%?1%，花生酸0· 059Γ0. 24%，pH值自然；所述 麥芽汁液體種子培養(yǎng)基：氯霉素〇. 〇1%?〇. 02%，麥芽膏粉109Γ13%，pH值為6. (Γ6. 4。
[0006] 步驟一所述的鮮酵母為鮮斜面菌種釀酒酵母或者鮮產(chǎn)朊假絲酵母等。
[0007] 步驟一脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯（SMS)水溶液配制方法：稱取1~15克的脫水山 梨醇單硬脂酸甘油酯（SMS)，加入l(T20mL蒸餾水中，加熱溶解，定容至IOOmL,配成質量分 數(shù)為19Γ15%的溶液，121°C高溫滅菌20min，冷卻至室溫備用。
[0008] 步驟三靜置包埋時間為6?12h。
[0009] 步驟四所述的無菌抽濾的真空壓力0. 01~0. 02Mpa。步驟四所述冷凍離心的轉速為 300(T5000r/min，時間為 15?30min，溫度(TlO°C。
[0010] 步驟四所述干燥是2(T50°C鼓風干燥機2~24h。步驟四干燥采用流化床干燥機干 燥，進風溫度7(Tl40°C，出風溫度4(T70°C，干燥時間30?130S。
[0011] 本發(fā)明的耐高溫耐損傷的飼用酵母的水分< 8%，白色粉末顆粒，粒徑： 0· 5?I. 5mm。包埋率在90%以上。
[0012] 本發(fā)明產(chǎn)品采用無菌鋁箔袋(或無菌真空袋）包裝，成品。本發(fā)明產(chǎn)品可直接用于 養(yǎng)殖禽畜的日常保健型飲水用添加劑；也可制成濃縮飼料料按照0. 19Γ5%配比配合飼料現(xiàn) 配現(xiàn)用飼喂；也可按〇. 1%~5%配比進行造粒來生產(chǎn)全價型生物飼料。
[0013] 本發(fā)明的優(yōu)點： 1) 耐高溫，可耐受4(T60°C的儲存及造粒溫度； 2) 活力高，活細胞數(shù)可達400億個/g ; 3) 耐機械損傷，細胞經(jīng)多層包埋，可耐受包埋、造粒、包裝、儲運等加工和儲運過程中的 機械損傷。損傷后活細胞數(shù)可保留509Γ80%以上。
[0014] 4)儲存時間長，室溫下能存儲12個月，室溫下存儲1年活細胞數(shù)能保留初始的90% 以上。

【具體實施方式】
[0015]

【具體實施方式】一：本實施方式中飼用酵母的菌種名稱為： 釀酒酵母菌株 300，自編號 DQFC2117-1 中科院微生物研究所微生物菌種保藏中心菌株號AS 2. 300。
[0016] 特點：釀酒酵母；耐高溫，可提高酒的含脂量，生香味。
[0017] 鮮飼用酵母是通過下述步驟獲得的：將釀酒酵母菌株置于麥芽汁液體種子培養(yǎng)基 中28°C活化培養(yǎng)24h，按10%接種量接入液體馬鈴薯培養(yǎng)基中45°C培養(yǎng)24h，OD值> 1. 6， 得到發(fā)酵培養(yǎng)液；再將發(fā)酵培養(yǎng)液置于冷凍離心機中4000r/min離心20min，用無菌蒸餾水 洗滌2次后，得到鮮酵母，存于4°C冰箱備用。所述液體馬鈴薯培養(yǎng)基馬鈴薯汁100ml，葡萄 糖2%，無水CaC0 3l%，花生酸0.10%，pH自然。所述麥芽汁液體種子培養(yǎng)基：氯霉素0.01%， 麥芽膏粉12%，pH 6.2。
[0018] 本實施方式中耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法是按下述步驟進行的： 步驟一、按脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯質量是鮮飼用酵母質量5%的配比向上述方法 制得的鮮飼用酵母加入質量分數(shù)為10%的脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯（SMS)無菌水溶液， 攪拌均勻，得到溶液A ; 步驟二：按體積比為1:1向溶液A加入質量百分比濃度為2%海藻酸鈣無菌溶液，攪拌 均勻，得到溶液B ; 步驟三、按體積比為1:1向溶液B加入混合液充分攪拌2h，其中所述的混合液由殼聚 糖、無水CaCl2及水配制并經(jīng)121°C高溫滅菌20min處理的，混合液中殼聚糖的質量百分比 濃度為2%，無水CaCl 2質量百分比濃度2%，靜置包埋6h ; 步驟四、然后真空壓力〇. OlMpa下無菌抽濾后在40°C條件下鼓風干燥10h，得到耐高溫 耐損傷的飼用酵母。
[0019] 本實施方式的耐高溫耐損傷的飼用酵母的水分< 8%，白色顆粒，粒徑： 0· 5~L 5mm〇
[0020] 本實施方式的耐高溫耐損傷的飼用酵母的包埋率：90%。耐高溫，可耐受4(T60°C 的儲存及造粒溫度；活力高，活細胞數(shù)可達400億個/g ;耐機械損傷，細胞經(jīng)多層包埋，可耐 受包埋、造粒、包裝、儲運等加工和儲運過程中的機械損傷，損傷后活細胞數(shù)可保留509Γ80% 以上。
[0021] 表I :25°C下不同儲存時間活細胞數(shù)表

【權利要求】
1. 一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于耐高溫耐損傷的飼用酵母制備 方法是按下述步驟進行的： 步驟一、按脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯質量是鮮飼用酵母質量1%飛％的配比向鮮飼用 酵母加入質量分數(shù)為1%~15%的脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯無菌水溶液，攪拌均勻，得到溶 液A ; 步驟二：按體積比為1:1向溶液A加入質量百分比濃度為29T4%海藻酸鈣無菌溶液，攪 拌均勻，得到溶液B ; 步驟三、按體積比為1:1向溶液B加入混合液充分攪拌f3h，其中所述的混合液由殼聚 糖、無水CaCl2及水配制并經(jīng)121°C高溫滅菌20min處理的，混合液中殼聚糖的質量百分比 濃度為29T4%，無水CaCl 2質量百分比濃度29T4%，靜置包埋； 步驟四、然后無菌抽濾或者冷凍離心后干燥，得到耐高溫耐損傷的飼用酵母。
2. 根據(jù)權利要求1所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于鮮飼 用酵母是通過下述步驟獲得的：將飼用酵母置于麥芽汁液體種子培養(yǎng)基中28°C活化培養(yǎng) 24h，按19T10%接種量接入液體馬鈴薯培養(yǎng)基中45°C培養(yǎng)24h，OD值> 1. 6,得到發(fā)酵培養(yǎng) 液；再將發(fā)酵培養(yǎng)液置于冷凍離心機中300(T5000r/min離心15?30min，用無菌蒸餾水洗滌 2次后，得到鮮酵母。
3. 根據(jù)權利要求2所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于所述液 體馬鈴薯培養(yǎng)基：馬鈴薯汁IOOmL,葡萄糖f 3%，無水CaCO3O. 59T1%，花生酸0. 059T0. 24%， pH自然；所述麥芽汁液體種子培養(yǎng)基：氯霉素0.019T0.02%，麥芽膏粉109Tl3%，pH 6. 0?6. 4。
4. 根據(jù)權利要求1、2或3所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于 步驟一所述的鮮酵母為鮮斜面菌種釀酒酵母或者鮮產(chǎn)朊假絲酵母。
5. 根據(jù)權利要求4所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于步驟一 脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯水溶液配制方法：稱取1~15克的脫水山梨醇單硬脂酸甘油酯， 加入l(T20mL的蒸餾水中，加熱溶解，定容至IOOmL,配成質量分數(shù)為19T15%的溶液，121°C 高溫滅菌20min，冷卻至室溫備用。
6. 根據(jù)權利要求4所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于步驟三 靜置包埋時間為6~12h。
7. 根據(jù)權利要求4所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于步驟四 所述的無菌抽濾的真空壓力〇? 〇l~〇. 〇2Mpa。
8. 根據(jù)權利要求4所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于步驟四 所述冷凍離心的轉速為300(T5000r/min，時間為15?30min，溫度為(TlO°C。
9. 根據(jù)權利要求4所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于步驟四 所述干燥是2(T50°C鼓風干燥機2?24h。
10. 根據(jù)權利要求4所述的一種耐高溫耐損傷的飼用酵母制備方法，其特征在于步驟 四干燥采用流化床干燥機干燥，進風溫度7(Tl4(TC，出風溫度4(T70°C，干燥時間3CT130S。
【文檔編號】C12N11/10GK104313007SQ201410615442
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年11月5日 優(yōu)先權日:2014年11月5日
【發(fā)明者】劉宇峰, 孫宇峰, 楊慶麗, 王玥明, 姬妍茹, 董艷, 石杰 申請人:黑龍江省科學院大慶分院