一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法，屬于生物培養(yǎng)基培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]鳳梨是臺(tái)灣三大名果之一，最常見(jiàn)的鳳梨有金鉆鳳梨和果肉如牛奶般的牛奶鳳梨；金鉆鳳梨全年都有，牛奶鳳梨產(chǎn)量很少，只有在夏季少量生產(chǎn)；目前在生物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，生物培養(yǎng)基技術(shù)已初步成熟，若果在牛奶鳳梨方面探究一種快速繁殖的方法，進(jìn)而改變現(xiàn)有的牛奶鳳梨在生產(chǎn)量較小的情形，從而達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益提高的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明為解決現(xiàn)有技術(shù)導(dǎo)致牛奶鳳梨外植體繁殖培育效率較低的問(wèn)題，本發(fā)明旨在提供一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法，其包括以下步驟:步驟一:培養(yǎng)基選擇；步驟二:外植體誘導(dǎo)；步驟三:繼代培養(yǎng)；步驟四:幼苗轉(zhuǎn)入；步驟五:幼苗培養(yǎng)；
[0004]在步驟一中:MS基本培養(yǎng)基中含有3800mg硝酸鉀、3300mg硫酸銨、170mg磷酸二氫鉀、185mg硫酸鎂、440mg氯化|丐、0.83mg碘化鉀、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸猛、8.6mg硫酸鋅、0.25mg鑰酸鈉、0.025mg硫酸銅、0.025mg氯化鈷、10mg肌醇、0.1mg鹽酸硫胺素、0.5mg鹽酸卩比卩多醇、0.5mg煙酸、37.3mg乙二胺四乙酸二鈉和27.8mg硫酸亞鐵。
[0005]在步驟二中:1/2MS基本培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.5?1.5mg/l+糖30g/l+萘乙酸 0.5 ?1.5mg/l+ 瓊脂 6.5g/l, pH5.6 ?5.8。
[0006]在步驟三中:在改良MS培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤2mg/l+糖30g/l+萘乙酸0.5?1.5mg/l+瓊脂6.5g ;不定芽的大量形成，增值7倍以上；
[0007]在步驟四:當(dāng)芽生長(zhǎng)2_3cm長(zhǎng)的苗轉(zhuǎn)入壯苗生根培養(yǎng)基為改良1/2MS培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.5mg/l+吲哚丁酸0.5mg/l+0.1 %天然附加物；
[0008]在步驟五中:選擇苗壯效果好，植株矮壯，葉色濃綠，根多且粗壯的外植體作為幼苗移植的對(duì)象，進(jìn)行移植。
[0009]與現(xiàn)有技術(shù)相比，該牛奶鳳梨培育方法，通過(guò)合理選擇培養(yǎng)基及控制外植體誘導(dǎo)移植中各項(xiàng)因素，得到到牛奶鳳梨再生植株且平均根數(shù)7，株移栽成活率近100%且無(wú)表型變異。
【具體實(shí)施方式】
[0010]為了讓牛奶鳳梨外植體可以迅速繁殖培育進(jìn)而獲得更高的經(jīng)濟(jì)效益，本發(fā)明旨在提供一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法。
[0011]一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法，包括以下步驟，步驟一:培養(yǎng)基選擇；步驟二:外植體誘導(dǎo)；步驟三:繼代培養(yǎng)；步驟四:幼苗轉(zhuǎn)入；步驟五:幼苗培養(yǎng)；
[0012]在步驟一中:MS基本培養(yǎng)基中含有3800mg硝酸鉀、3300mg硫酸銨、170mg磷酸二氫鉀、185mg硫酸鎂、440mg氯化|丐、0.83mg碘化鉀、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸猛、8.6mg硫酸鋅、0.25mg鑰酸鈉、0.025mg硫酸銅、0.025mg氯化鈷、10mg肌醇、0.1mg鹽酸硫胺素、0.5mg鹽酸卩比卩多醇、0.5mg煙酸、37.3mg乙二胺四乙酸二鈉和27.8mg硫酸亞鐵。
[0013]在步驟二中:1/2MS基本培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.5?1.5mg/l+糖30g/l+萘乙酸 0.5 ?1.5mg/l+ 瓊脂 6.5g/l, pH5.6 ?5.8。
[0014]在步驟三中:在改良MS培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤2mg/l+糖30g/l+萘乙酸0.5?1.5mg/l+瓊脂6.5g ;不定芽的大量形成，增值7倍以上；
[0015]在步驟四:當(dāng)芽生長(zhǎng)2_3cm長(zhǎng)的苗轉(zhuǎn)入壯苗生根培養(yǎng)基為改良1/2MS培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.5mg/l+吲哚丁酸0.5mg/l+0.1 %天然附加物；
[0016]在步驟五中:選擇苗壯效果好，植株矮壯，葉色濃綠，根多且粗壯的外植體作為幼苗移植的對(duì)象，進(jìn)行移植；將滅菌的牛奶鳳梨幼嫩莖端切割后做為外植體，在無(wú)菌條件下將外植體接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)20天時(shí)誘導(dǎo)出不定芽，繼續(xù)培養(yǎng)10天；然后在無(wú)菌條件下將不定芽切割后接種于增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天；再在無(wú)菌條件下將增殖培養(yǎng)后的不定芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)20天，獲得牛奶鳳梨組培苗；以上培養(yǎng)條件均為:溫度25±2°C，12h光照與12h黑暗交替培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為35μπι01.m-2s-l?40 μ mo I *m-2s-l ;待所述組培苗長(zhǎng)至2cm?3cm高，開(kāi)瓶練苗3天?5天，再移栽到素沙與草炭的質(zhì)量比為2: I的栽培介質(zhì)中，得到牛奶鳳梨再生植株且平均根數(shù)7，株移栽成活率近100%且無(wú)表型變異；研究發(fā)現(xiàn)，繼代近30代未發(fā)現(xiàn)有變異苗出現(xiàn)，說(shuō)明只要激素濃度使用恰當(dāng)，可以高代培養(yǎng)。
[0017]對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實(shí)施例的細(xì)節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。因此，無(wú)論從哪一點(diǎn)來(lái)看，均應(yīng)將發(fā)明例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說(shuō)明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法，包括以下步驟，步驟一:培養(yǎng)基選擇；步驟二:外植體誘導(dǎo)；步驟三:繼代培養(yǎng)；步驟四:幼苗轉(zhuǎn)入；步驟五:幼苗培養(yǎng)；其特征在于: 在步驟一中:MS基本培養(yǎng)基中含有3800mg硝酸鉀、3300mg硫酸銨、170mg磷酸二氫鉀、.185mg硫酸鎂、440mg氯化|丐、0.83mg碘化鉀、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸猛、8.6mg硫酸鋅、.0.25mg鑰酸鈉、0.025mg硫酸銅、0.025mg氯化鈷、10mg肌醇、0.1mg鹽酸硫胺素、0.5mg鹽酸批卩多醇、0.5mg煙酸、37.3mg乙二胺四乙酸二鈉和27.8mg硫酸亞鐵； 在步驟二中:外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:1/2MS基本培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.5-1.5mg/l +糖 30g/l+ 萘乙酸 0.5-1.5mg/l + 瓊脂 6.5g/l, pH5.6-5.8 ； 在步驟三中:在改良MS培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤2mg/l +糖30g/l+萘乙酸0.5-1.5mg/I +瓊脂6.5g;不定芽的大量形成，增值7倍以上； 在步驟四:當(dāng)芽生長(zhǎng)2-3cm長(zhǎng)的苗轉(zhuǎn)入壯苗生根培養(yǎng)基為改良1/2MS培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.5 mg/1+ H引哚丁酸0.5 mg/1 +0.1%天然附加物； 在步驟五中:選擇苗壯效果好，植株矮壯，葉色濃綠，根多且粗壯的外植體作為幼苗移植的對(duì)象，進(jìn)行移植；將滅菌的牛奶鳳梨幼嫩莖端切割后做為外植體，在無(wú)菌條件下將外植體接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)20天時(shí)誘導(dǎo)出不定芽，繼續(xù)培養(yǎng)10天；然后在無(wú)菌條件下將不定芽切割后接種于增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天；再在無(wú)菌條件下將增殖培養(yǎng)后的不定芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)20天，獲得牛奶鳳梨組培苗；以上培養(yǎng)條件均為:溫度25±2°C，12h光照與12h黑暗交替培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為35μπι01.πι-28-1?.40 μ mo I.m-2s-l ;待所述組培苗長(zhǎng)至2cm?3cm高，開(kāi)瓶練苗3天?5天，再移栽到素沙與草炭的質(zhì)量比為2: I的栽培介質(zhì)中，得到牛奶鳳梨再生植株且平均根數(shù)7，株移栽成活率近100%且無(wú)表型變異；研究發(fā)現(xiàn)，繼代近30代未發(fā)現(xiàn)有變異苗出現(xiàn)，說(shuō)明只要激素濃度使用恰當(dāng)，可以高代培養(yǎng)。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種牛奶鳳梨快速繁殖培養(yǎng)方法，包括以下步驟，步驟一：培養(yǎng)基選擇；步驟二：外植體誘導(dǎo)；步驟三：繼代培養(yǎng)；步驟四：幼苗轉(zhuǎn)入；步驟五：幼苗培養(yǎng)；培養(yǎng)基選擇MS基本培養(yǎng)基，其中含有3800mg硝酸鉀、3300mg硫酸銨、170mg磷酸二氫鉀、185mg硫酸鎂、440mg氯化鈣、0.83mg碘化鉀、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸錳、8.6mg硫酸鋅、0.25mg鉬酸鈉、0.025mg硫酸銅、0.025mg氯化鈷、100mg肌醇、0.1mg鹽酸硫胺素、0.5mg鹽酸吡哆醇、0.5mg煙酸、37.3mg乙二胺四乙酸二鈉和27.8mg硫酸亞鐵；該方法得到牛奶鳳梨再生植株且平均根數(shù)7,株移栽成活率近100％且無(wú)表型變異；研究發(fā)現(xiàn),繼代近30代未發(fā)現(xiàn)有變異苗出現(xiàn),說(shuō)明只要激素濃度使用恰當(dāng),可以高代培養(yǎng)。
【IPC分類(lèi)】A01H4-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104542275
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410572708
【發(fā)明人】邵高良
【申請(qǐng)人】重慶翰鋒元浩食品有限公司
【公開(kāi)日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2014年10月23日