一種耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是指一種浮萍的養(yǎng)殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 硒是人體和其他哺乳動物必需微量元素之一。研宄證明硒具有保護(hù)生物膜、清除 自由基、抗癌、抗衰老、增進(jìn)免疫力等重要的生理功能。硒（主要是亞硒酸鈉）能防治多種 疾病，如克山病、大骨節(jié)病、腫瘤、心血管疾病等。目前世界上有許多個國家缺硒。我國有22 個省、市、自治區(qū)的部分或大部分地區(qū)缺硒，因此人工補硒具有重要的現(xiàn)實意義。硒鹽的毒 理分析表明，無機硒均為劇毒，使用范圍和劑量受到限制。許多研宄表明，有機硒化合物 毒性低于無機硒化合物，且吸收效率更高。另外，有機硒在激發(fā)免疫反應(yīng)、抑制肺癌方面 也較無機硒化合物效果顯著。目前國內(nèi)尚不能人工合成有機硒，因而利用生物技術(shù)來獲取 有機硒有食用和保健價值。市場上多種含硒、富硒的產(chǎn)品相繼問世，如富硒酵母、富硒蘑菇、 富硒多糖、富硒茶等，但是這些產(chǎn)品存在硒含量低或成本高等問題。
[0003] 浮萍的生物質(zhì)主要包含蛋白質(zhì)、糖類、脂類、粗纖維和礦物質(zhì)。浮萍具有非常廣泛 的應(yīng)用前景，設(shè)計領(lǐng)域包括動物飼料、生物制品、生物燃料、富營養(yǎng)化廢水處理等。浮萍生長 速度快，易于大規(guī)模培養(yǎng)，若能使浮萍富集一定濃度的硒，并制作成含硒產(chǎn)品，將具有優(yōu)異 的應(yīng)用價值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為解決現(xiàn)有技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，包括如下步驟：
[0005] 將浮萍（Landoltiapunctata)母株置入含硒培養(yǎng)基中，20?25°C下在光生物反應(yīng) 器中光照12?16小時/天進(jìn)行培養(yǎng)；其中，所述含硒培養(yǎng)基中硒的物質(zhì)的量濃度不高于 160ymol/L〇
[0006] 進(jìn)一步地，所述含硒培養(yǎng)基中還包括：水、2. 46g/L的MgSO4 ? 7H20、54. 28g/ L的Ca(NO3)2 ? 4H20、0. 68g/L的KH2P04、2. 525g/L的KN03、2. 86g/L的H3BO3U. 82g/L的 MnCl2 ? 4H20、0. 22g/L的ZnSO4 ? 7H20、0. 09g/L的Na2MoO4 ? 2H20、0. 09g/L的CuSO4 ? 5H20、 20.OmL/L的Fe-EDTA;其中，所述Fe-EDTA是由 0? 121g/250mL的FeCl3 ? 6H20 和 0? 375g/250mL的EDTA配制獲得。
[0007] 進(jìn)一步地，所述光照強度為3000?5000Lux。
[0008] 進(jìn)一步地，所述浮萍母株來自經(jīng)過預(yù)處理后的野生浮萍；所述浮萍母株的種植密 度為10株。
[0009] 進(jìn)一步地，所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖期為4?8天。
[0010] 進(jìn)一步地，控制所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖期內(nèi)含硒培養(yǎng)基的pH在5. 8?6之間。
[0011] 進(jìn)一步地，所述硒來自水溶性亞硒酸鹽或硒酸鹽。
[0012] 有益效果：本發(fā)明選用浮萍作為富硒的載體，并配合合適的培養(yǎng)基，使得浮萍在培 養(yǎng)基增殖過程中吸收亞硒酸鈉鹽效率高，將無機硒轉(zhuǎn)化為有機硒的能力強，對低濃度硒具 有十分顯著的富集效應(yīng)，避免了增加高硒所造成的浪費，降低了富硒浮萍的成本，而且對環(huán) 境綠色友好，這種優(yōu)越性是十分顯著的。同時，在本發(fā)明培養(yǎng)基中生長，各種元素能完全滿 足浮萍生長需要，簡化了養(yǎng)殖配方，節(jié)省大量營養(yǎng)鹽，降低了成本。富硒后的耐硒浮萍提高 了浮萍的經(jīng)濟(jì)價值及應(yīng)用范圍
【具體實施方式】
[0013] 本發(fā)明提供一種浮萍富硒培養(yǎng)方法，包括如下步驟：選擇野外采集的浮萍 (Landoltiapunctata)作為母株；然后以人工淡水為基礎(chǔ)，然后加入硒元素，硒元素的物質(zhì) 的量濃度不高于160ymol/L，以此作為含硒培養(yǎng)基將所述母株接種至含有所述培養(yǎng)基的光 生物反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng)，最后對培養(yǎng)好的浮萍進(jìn)行收集得到耐硒浮萍。其中，所述野外采 集的浮萍優(yōu)先進(jìn)過實驗室的篩選和預(yù)培養(yǎng)，使由野外生長環(huán)境向室內(nèi)生長環(huán)境的適應(yīng)性轉(zhuǎn) 變。
[0014] 所述含硒培養(yǎng)基的配制分兩步進(jìn)行：
[0015]首先，配制人工淡水培養(yǎng)基，即采用：MgSO4 .7H20 2. 46g/L、Ca(NO3)2 .44054. 28g/ L、KH2PO4O. 68g/L、KN032. 525g/L、H3B032. 86g/L、MnCl2 ? 4H20I. 82g/L、ZnSO4 ? 7H20 0? 22g/ L、Na2MoO4 ? 2H20 0? 09g/L、CuSO4 ? 5H20 0? 09g/L、20.OmL/LFe-EDTA(其中，所述Fe-EDTA 來自0. 121g/250mLFeCl3 ? 6H20, 0. 375g/250mLEDTA加水后配制獲得），將上述組分混合 均勻溶解在水中，配成溶液，即為人工淡水培養(yǎng)基。
[0016] 然后，以硒化合物的形式加入硒元素。所述的含硒化合物優(yōu)選為亞硒酸鹽或硒酸 鹽，所述的亞硒酸鹽進(jìn)一步優(yōu)選為亞硒酸鈉或亞硒酸鉀。本實施例中，具體是在300ml的 培養(yǎng)盆中加入80ml的人工淡水培養(yǎng)基，再加入不同體積濃度為luM/L的亞硒酸鈉水溶液， 獲得不同濃度的含硒培養(yǎng)基（參見表1所示），最后補加人工淡水培養(yǎng)基使其總體積達(dá)到 100ml，即為養(yǎng)殖浮萍用的含硒培養(yǎng)基。
[0017] 將經(jīng)過實驗室篩選與預(yù)培養(yǎng)的浮萍，接種至含有培養(yǎng)基的光生物反應(yīng)器中進(jìn)行培 養(yǎng)，種植密度為10株。其培養(yǎng)條件優(yōu)選為溫度20?25°C，光照強度3000?5000LUX，光 照12?16h/天，4?8天養(yǎng)殖期。其中，在所述養(yǎng)殖期內(nèi)，控制含硒培養(yǎng)基的pH為5. 8? 6. 0〇
[0018] 下面，通過不同實施例獲得不同含硒量的浮萍產(chǎn)品（每個實施例做三次平行實 驗），具體參數(shù)參見表1所示：
[0019] 表1不同實施例獲得不同含硒量的浮萍產(chǎn)品
[0020]
【主權(quán)項】
1. 一種耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，包括如下步驟： 將浮萍母株置入含硒培養(yǎng)基中，20?25°C下在光生物反應(yīng)器中光照12?16小時/天 進(jìn)行培養(yǎng)；其中，所述含硒培養(yǎng)基中硒的物質(zhì)的量濃度不高于160ymol/L。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，所述含硒培養(yǎng)基中還包括： A、2.46g/lJ9MgS04.7H20、54.28g/lJ9Ca(N03)2.4H20、0.68g/lJ9KH2P04、2.525g/lJ9KN03、 2. 86g/L的H3B03、I. 82g/L的MnCl2 .4H20、0. 22g/L的ZnSO4.7H20、0. 09g/L的Na2MoO4.2H20、 0? 09g/L的CuSO4 ? 5H20、20.OmL/L的Fe-EDTA;其中，所述Fe-EDTA是由 0? 121g/250mL的 FeCl3 ? 6H20 和 0? 375g/250mL的EDTA配制獲得。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，所述含硒培養(yǎng)基中硒的 物質(zhì)的量濃度為20?40ym〇l/L〇
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，所述硒來自水溶性亞硒 酸鹽或硒酸鹽。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，所述光照強度為 3000 ?5000Lux〇
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，所述浮萍母株來自經(jīng)過 預(yù)處理后的野生浮萍。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖期 為4?8天。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，其特征在于，控制所述耐硒浮萍的養(yǎng)殖 期內(nèi)含硒培養(yǎng)基的pH在5. 8?6之間。
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是提供一種耐硒浮萍的養(yǎng)殖方法，包括如下步驟：以野外采集經(jīng)過實驗室預(yù)培養(yǎng)的浮萍(Landoltia？punctata)為母株，置入含硒培養(yǎng)基中，20～25℃下在光生物反應(yīng)器中光照12～16h/天進(jìn)行培養(yǎng)；其中，所述含硒培養(yǎng)基中硒的物質(zhì)的量濃度不高于160μmol/L。本發(fā)明選用經(jīng)過實驗室預(yù)培養(yǎng)與篩選的浮萍作為富硒的載體，具有更好的適應(yīng)強光、高溫和高硒等優(yōu)良特性；浮萍在增殖過程中吸收亞硒酸鈉鹽效率高，轉(zhuǎn)化能力強，對低濃度硒具有十分顯著的富集效應(yīng)。
【IPC分類】A01G31-00, A01G1-00, C05G1-00
【公開號】CN104541897
【申請?zhí)枴緾N201510027050
【發(fā)明人】鐘鈺, 張善發(fā), 成家楊
【申請人】北京大學(xué)深圳研究生院
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月20日