樹葡萄快速結果的培育方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了樹葡萄快速結果的培育方法，是采用海綿液體培養(yǎng)基先增殖培養(yǎng)樹葡萄繼代培養(yǎng)材料，再轉接培養(yǎng)至液體培養(yǎng)基，重復多次后轉接至添加有瓊脂粉的固體培養(yǎng)基中生根培養(yǎng)成眠，即得到樹葡萄組培苗。本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明提供的樹葡萄快速結果的培育方法，具有以下優(yōu)點：1、樹葡萄組培材料能充分吸收到營養(yǎng)成份，提高品質及產量，增殖率可達5-6倍；采用本發(fā)明方法培育的樹葡萄，將生長周期有6年降低至4年，且1年內結4次果實，大大提高了結果率；2、海綿可重復利用，且液體培養(yǎng)基分裝配制比較方便，瓶子等用具容易清洗干凈；3、省去購買瓊脂粉的費用，降低生產成本。
【專利說明】樹葡萄快速結果的培育方法
[0001]
【技術領域】
[0002]本發(fā)明涉及植物組培苗快繁領域，具體涉及樹葡萄快速結果的培育方法。
【背景技術】
[0003]嘉寶果(Plinia cauliflora (Mart.) Kausel)屬于桃金娘科常綠灌木，因果實形狀似葡萄，故又稱樹葡萄。其成長緩慢，樹皮淺灰色，呈薄片狀脫落，脫落后留下亮色斑紋。葉對生，葉柄短，有茸毛，葉片革質，深綠色有光澤，披針形或橢圓形。其花簇生于主干和主枝上，花小，白色，雄蕊多數。
[0004]目前，樹葡萄多為由巴西引進臺灣2季果，六年后結果，一年只結果2次，結果率極低。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了一種能夠使樹葡萄快速結果的培育方法。
[0006]為了實現上述目的，本發(fā)明提供的技術方案為:樹葡萄快速結果的培育方法，是采用海綿液體培養(yǎng)基先增殖培養(yǎng)樹葡萄繼代培養(yǎng)材料，再轉接培養(yǎng)至液體培養(yǎng)基，重復多次后轉接至添加有瓊脂粉的固體培養(yǎng)基中生根培養(yǎng)成眠，即得到樹葡萄組培苗。
[0007]進一步的，上述的樹葡萄快速結果的培育方法，包括以下步驟:
O制備海綿液體培養(yǎng)基:選擇 圓柱形的耐高溫過濾海綿，直徑與透氣蓋螺紋瓶底部大小一致，海綿厚度為1cm，在海綿上面均勻開有15個口徑為0.8cm，深度為0.5cm大小的V形孔，將海綿塊平放在培養(yǎng)瓶底部，開孔的一面朝上，直接用自來水配制藥品并經定容調好PH值即成液體培養(yǎng)基，適量分裝到放有海綿的培養(yǎng)瓶中，使營養(yǎng)液剛剛侵泡完海綿塊即可；所述液體培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基；
2)培養(yǎng)基的滅菌:將步驟I)得到的分裝好的海綿液體培養(yǎng)基經高壓滅菌，滅菌溫度為121-123°C，滅菌壓力為0.11-0.13MP，滅菌時間為22-25分鐘，得到滅菌后培養(yǎng)基；
3)培養(yǎng)材料的接種:無菌狀態(tài)下，將樹葡萄培養(yǎng)材料分切成單芽分別插種到滅菌后的海綿液體培養(yǎng)基的V形孔中，進行快速增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為30-35天，增殖率為5-6倍；
4)增殖材料的轉接:將步驟3)中增殖后的材料挾出分切再接種到新鮮的液體培養(yǎng)基中繼續(xù)進行增殖培養(yǎng)；此后當培養(yǎng)到30-35天時，再次將材料進行分切更換到新鮮的液體培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)；
5)生根培養(yǎng):將步驟4)得到的增殖培養(yǎng)后的樹葡萄增殖材料轉接到一定數量后，將其分切成單株轉接到添加有瓊脂粉的固體培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，經過2~3個月培養(yǎng)煉苗后即得到樹葡萄組培苗移植株。
[0008]本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明提供的樹葡萄快速結果的培育方法，具有以下優(yōu)占-
1、樹葡萄組培材料能充分吸收到營養(yǎng)成份,提高品質及產量,增殖率可達5-6倍；
2、采用本發(fā)明方法培育的樹葡萄，將生長周期有6年降低至4年，且I年內結4次果實，大大提聞了結果率；
2、海綿可重復利用，且液體培養(yǎng)基分裝配制比較方便，瓶子等用具容易清洗干凈；
3、省去購買瓊脂粉的費用，降低生產成本。
【具體實施方式】
[0009]實施例1:
(一)海綿液體培養(yǎng)基的制作:
選擇圓柱形的耐高溫過濾海綿，直徑與透氣蓋螺紋瓶底部大小一致，海綿厚度為Icm即可，在海綿上面均勻開有15個口徑為0.8cm，深度為0.5cm大小的V形孔，將海綿塊平放在培養(yǎng)瓶底部，開孔的一面朝上。因不加瓊脂粉，可直接用自來水配制藥品并經定容調好PH值即成液體培養(yǎng)基，最后適量分裝到放有海綿的培養(yǎng)瓶中，使營養(yǎng)液剛剛侵泡完海綿塊即可；
(二)培養(yǎng)基的滅菌:
由于選用的海綿為耐高溫材料，主要成分為聚氨酯，具有抗腐蝕、無毒副作用、耐高溫(可達200°C)、強度高(回彈性好)、吸水性極強，可回收利用等優(yōu)點，經過多次高壓滅菌后不變型仍可重復使用；分裝好的培養(yǎng)基經高壓滅菌(滅菌溫度為121-123度，壓力為
0.ll-ο.13MP，時間為22-25分鐘)，最后將滅菌好的液體培養(yǎng)基放到培養(yǎng)基儲藏室備用；
(三)培養(yǎng)材料的接種:
在無菌工作臺上將培養(yǎng)材料分切成單芽分別插種到海綿液體培養(yǎng)基的V形孔中，由于海綿有很好的回彈性和吸水性，對插在V形孔中的培養(yǎng)材料有一定的固定作用和保濕功能，利于培養(yǎng)物的生長和養(yǎng)分的吸收；
(四)培養(yǎng)材料的增殖培養(yǎng):
培養(yǎng)在海綿液體培養(yǎng)基上的材料，由于液體培養(yǎng)基中分子或離子運動較快，其基部能夠充分接觸到營養(yǎng)液并能較好的吸收養(yǎng)分，同時也將自身切口分泌出來的醌類有害物質稀釋到液體培養(yǎng)基中，減少褐化的產生，從而達到快速增殖的效果，一般培養(yǎng)30-35天后增殖率可達到5-6倍；
(五)增殖材料的轉接:
當增殖材料在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)30-35天后，培養(yǎng)材料不斷地增殖生長，已經吸收了大部分的營養(yǎng)成份和水分，同時液體培養(yǎng)基中也積累了一定的醌類等有害成分；此時應將增殖后的材料挾出分切再接種到新鮮的液體培養(yǎng)基中繼續(xù)進行增殖培養(yǎng)，此后當培養(yǎng)到30-35天時，不斷地將材料進行分切更換到新鮮的液體培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，即可使生產達到一定數量和規(guī)模的材料；
(六)生根培養(yǎng):
樹葡萄增殖材料轉接到生產所需的數量后，將其分切成單株轉接到添加有瓊脂粉的固體培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，經過2~3個月培養(yǎng)煉苗后即可出瓶移植。
[0010]最后應說明的是:以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之 內。
【權利要求】
1.樹葡萄快速結果的培育方法，其特征在于，是采用海綿液體培養(yǎng)基先增殖培養(yǎng)樹葡萄繼代培養(yǎng)材料，再轉接培養(yǎng)至液體培養(yǎng)基，重復多次后轉接至添加有瓊脂粉的固體培養(yǎng)基中生根培養(yǎng)成眠，即得到樹葡萄組培苗。
2.根據權利要求1所述的樹葡萄快速結果的培育方法，其特征在于，包括以下步驟: O制備海綿液體培養(yǎng)基:選擇圓柱形的耐高溫過濾海綿，直徑與透氣蓋螺紋瓶底部大小一致，海綿厚度為1cm，在海綿上面均勻開有15個口徑為0.8cm，深度為0.5cm大小的V形孔，將海綿塊平放在培養(yǎng)瓶底部，開孔的一面朝上，直接用自來水配制藥品并經定容調好PH值即成液體培養(yǎng)基，適量分裝到放有海綿的培養(yǎng)瓶中，使營養(yǎng)液剛剛侵泡完海綿塊即可；所述液體培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基； 2)培養(yǎng)基的滅菌:將步驟I)得到 的分裝好的海綿液體培養(yǎng)基經高壓滅菌，滅菌溫度為121-123°C，滅菌壓力為0.11-0.13MP，滅菌時間為22-25分鐘，得到滅菌后培養(yǎng)基； 3)培養(yǎng)材料的接種:無菌狀態(tài)下，將樹葡萄培養(yǎng)材料分切成單芽分別插種到滅菌后的海綿液體培養(yǎng)基的V形孔中，進行快速增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為30-35天，增殖率為5-6倍； 4)增殖材料的轉接:將步驟3)中增殖后的材料挾出分切再接種到新鮮的液體培養(yǎng)基中繼續(xù)進行增殖培養(yǎng)；此后當培養(yǎng)到30-35天時，再次將材料進行分切更換到新鮮的液體培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)； 5)生根培養(yǎng):將步驟4)得到的增殖培養(yǎng)后的樹葡萄增殖材料轉接到一定數量后，將其分切成單株轉接到添加有瓊脂粉的固體培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，經過2~3個月培養(yǎng)煉苗后即得到樹葡萄組培苗移植株。
【文檔編號】A01H4/00GK103718960SQ201310696936
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月18日 優(yōu)先權日:2013年12月18日
【發(fā)明者】陳財寶 申請人:柳州市天姿園藝有限公司