專利名稱：一種利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法。
技術(shù)背景
金針菇又名金菇、樸菇、冬菇等，是世界著名的食藥兩用菌及觀賞菌。金針菇肉質(zhì)脆嫩，味道鮮美，干品氣味芳香，營養(yǎng)豐富。干金針菇中含多糖1<% 2%，蛋白質(zhì)8.39% 11. 80%，富含VBpVB2、尼克酸和VC等多種維生素，且富含鈣、磷、鐵等多種礦物質(zhì)。另外， 金針菇含有多種生物活性成分，能有效地增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力，促進(jìn)體內(nèi)新陳代謝，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)癌細(xì)胞的抗御能力，降地膽固醇，降血脂，防治肝臟、心腦血管疾病和腸胃道潰瘍的功能。 我國是最早進(jìn)行人工固體栽培金針菇子實(shí)體的國家，然而傳統(tǒng)的人工固體栽培周期長，受環(huán)境影響因素大，品質(zhì)不穩(wěn)定，產(chǎn)量低，無法滿足市場(chǎng)需求，且生產(chǎn)成本較高。而金針菇發(fā)酵獲得菌絲體具有較大的優(yōu)越性，其培養(yǎng)周期短，質(zhì)量穩(wěn)定，產(chǎn)量增加快，且營養(yǎng)價(jià)值高于子實(shí)體，能夠?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，滿足市場(chǎng)需求。利用菌絲體代替子實(shí)體來提取有效成分，在食品和醫(yī)藥方面的應(yīng)用已成為一個(gè)新的趨勢(shì)。目前在該領(lǐng)域的技術(shù)上存在培養(yǎng)基成本相對(duì)較高的問題。
我國加工廠眾多，加工剩余物往往被企業(yè)丟棄，這樣既造成了資源的大量浪費(fèi)，又嚴(yán)重地污染了環(huán)境。目前，尚未見以加工剩余物作為培養(yǎng)基發(fā)酵金針菇，并制成營養(yǎng)液的報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法。該方法以胡蘿卜渣、甘蔗渣等食品加工剩余物作為培養(yǎng)基，發(fā)酵并制備金針菇營養(yǎng)液。解決了加工剩余物作為下腳料直接排放的污染問題，同時(shí)合理利用資源，使金針菇發(fā)酵的成本更低。
本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下本發(fā)明的一種利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法，該方法包括以下步驟(1)液體培養(yǎng)以金針菇為出發(fā)菌株，經(jīng)斜面、一級(jí)搖瓶擴(kuò)大培養(yǎng)得到搖瓶一級(jí)種；(2)固態(tài)發(fā)酵以甘蔗渣為金針菇固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的主要原料，接種搖瓶一級(jí)種，然后取出已長滿菌絲體的固體培養(yǎng)基，粉粹，得到富含菌絲粉，即為金針菇發(fā)酵菌質(zhì)；(3)金針菇發(fā)酵菌質(zhì)用熱水浸提法獲得富含金針菇多糖和氨基酸的提取液，并制成濃縮液；最后將該濃縮液調(diào)配成營養(yǎng)液。
步驟(1)中所述一級(jí)搖瓶擴(kuò)大培養(yǎng)中一級(jí)搖瓶培養(yǎng)基的配制為胡蘿卜渣1_3%， 麩皮0. 5-1. 5%，KH2PO4 0. l%，MgS04 0. 05%，余量為水，上述百分比均表示重量比，起始pH為 6. 0-8. 0 ；培養(yǎng)條件為:110-180rpm 培養(yǎng) 5_10d，溫度 20-25 0C0
步驟(2)所述金針菇固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的配方按重量比為甘蔗渣60-90%，麩皮 10-40%, pH 5-8，原料混勻后加入水至60-80% ；培養(yǎng)條件為培養(yǎng)13-22天，溫度20_25°C。
步驟(3)所述熱水浸提法包括如下步驟a、在金針菇發(fā)酵菌質(zhì)中加入10-20倍重量的水，置55-60°C水浴中提取l_2h，抽濾；再將濾渣重復(fù)提取、抽濾1-2次，合并所有提取液；b、將提取液在55-60°C,0. 07-0. 095MPa低溫真空下濃縮，至測(cè)得可溶性固形物為 5-10%，得濃縮液；C、將所述濃縮液離心，去除其中的不溶物質(zhì)，即得金針菇營養(yǎng)液。
本發(fā)明是一種利用胡蘿卜渣、甘蔗渣等食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法，以金針菇為出發(fā)菌株，利用胡蘿卜渣和麩皮作培養(yǎng)基進(jìn)行液體發(fā)酵，獲得大量的金針菇液體菌種；然后將液體菌種接種到以甘蔗渣和麩皮為主的固體培養(yǎng)基上擴(kuò)大培養(yǎng)；用熱水浸提法獲得富含金針菇多糖、氨基酸的提取液，并制成濃縮液；最后將此濃縮液中的多糖、 氨基酸等功能成分進(jìn)行測(cè)定。
將本發(fā)明的金針菇營養(yǎng)液液，加入3倍體積95%乙醇，進(jìn)行醇析，將醇析液置于5°C 冰箱中，靜置12h，充分沉淀活性多糖。4000r/min離心20min，取沉淀，倒掉上清液，將沉淀用蒸餾水復(fù)溶。以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，按照張惟杰主編的《復(fù)合多糖生化研究技術(shù)》(1987年) 中的苯酚一硫酸法測(cè)定粗多糖含量。將本發(fā)明的金針菇營養(yǎng)液液，鹽酸水解后，利用氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定氨基酸含量。其結(jié)果如下1、金針菇營養(yǎng)液中多糖含量的測(cè)定結(jié)果根據(jù)上述方法測(cè)得的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示，其回歸方程為A49(i=15. 137C-0. 0024 ；相關(guān)系數(shù)r=0. 9973。其中，A為吸光度，C為葡萄糖濃度。實(shí)驗(yàn)表明，在葡萄糖質(zhì)量濃度為0. 01 0. 07mg/ml時(shí)，吸光度值與葡萄糖質(zhì)量濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算可得出，金針菇營養(yǎng)原液中粗多糖含量為2. 0%。金針菇多糖是金針菇的主要生物活性成分，具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和抗衰老等作用。金針菇營養(yǎng)原液中多糖含量較高，這為功能研究打下基石出。
2、金針菇營養(yǎng)液中氨基酸含量的測(cè)定結(jié)果表1營養(yǎng)液中氨基酸質(zhì)量濃度氛基酸氨基酸的質(zhì)量濃度 (mg/l00ml)天門冬氨酸(Asp) 蘇氨酸(Thr) 絲氨_er) 谷氨酸(Glu) 甘氨酸(Gly) 丙氨酸CAl a) 纈氨酸徹1) 脯氨酸(Pro)73.2 44. 37 36.8 35.62 37. 05 42.36 30.36 24.31氣基酸氨基酸的質(zhì)量濃度 (mg/l00ml)蛋氨酸(Met) 異亮氨酸(lie) 亮氨酸(Leu) 酪氨酸(Tyr) 苯丙氨酸(Kie) 賴氨酸(Lys) 組氨酸(His) 精氨酸(Arg)7. 68 22.12 39.89 27.83 23.12 23.78 9. 76 18.29 557. 07營養(yǎng)液中氨基酸的含量，特別是人體必需氨基酸的含量直接影響其營養(yǎng)價(jià)值。金針菇4營養(yǎng)液中氨基酸含量可達(dá)557. 07 mg/100ml，且氨基酸種類較齊全。由表1可看出，金針菇含有多種氨基酸，種類較齊全。其中含有8種人體必需氨基酸。測(cè)定的必需氨基酸中以蘇氨酸CThr)含量最高，為44. 37mg/100ml,占全部氨基酸含量的8. 0%。亮氨酸(Leu)含量位居第二，39.89mg/100ml，占全部氨基酸含量的7. 另外，非必需氨基酸中的谷氨酸(Glu) 和天門冬氨酸(Asp)在金針菇營養(yǎng)原液中含量也很高。谷氨酸含量為85. 6aiig/ml，占全部氨基酸含量的15. 4%;天門冬氨酸含量為73. 2mg/ 100ml，占全部氨基酸含量的13. 1%。谷氨酸和天冬氨酸均為鮮味類氨基酸，其相應(yīng)的鈉鹽具有強(qiáng)烈的鮮味，可作為清涼飲料及其它食品的調(diào)味劑。特別是谷氨酸，屬于抗體內(nèi)代謝的基本氨基酸，是連接糖代謝和氨基酸代謝的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。在氨代謝中可與酮發(fā)生氨基轉(zhuǎn)移作用，從而合成其它氨基酸。此外，谷氨酸是抗體中參與腦組織代謝的唯一氨基酸，人體的腦組織只能氧化谷氨酸。
本發(fā)明利用加工剩余物，獲得大量的所需產(chǎn)物，用熱水提取法能獲得富含金針菇多糖、氨基酸的濃縮液，解決了加工剩余物作為下腳料直接排放的污染問題，同時(shí)合理利用資源，部分代替金針菇子實(shí)體進(jìn)行應(yīng)用。本發(fā)明的一種金針菇營養(yǎng)液的制備方法，工藝穩(wěn)定可靠，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。


圖1為葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的一種利用胡蘿卜渣、甘蔗渣等食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法，包括以下步驟1金針菇的液體、固體發(fā)酵1. 1將金針菇保存種用馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)進(jìn)行活化、復(fù)壯，置2116°C恒溫箱靜止培養(yǎng)6-10天，直至菌絲長滿斜面，得到斜面菌種，置冰箱中冷藏備用；所述的PDA培養(yǎng)基的配方為去皮馬鈴薯20%，蔗糖2%，瓊脂2. 2%，KH2PO4 0. 1%，MgS04 0. 05%, pH自然；1. 2將PDA斜面種用搖瓶培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，得到液體發(fā)酵菌種；所述的搖瓶培養(yǎng)基的配方為胡蘿卜渣1_3%，麩皮0. 5-1. 5%，KH2PO4 0. 1%，MgS04 0. 05%，加水定容至所需體積， 起始pH為6. 0-8. O ；培養(yǎng)條件為以100-160mL/250mL裝液量，接入Icm2的斜面菌種，旋轉(zhuǎn)式搖床 110-180rpm 培養(yǎng) 5_10d，溫度 20-25 °C ；1.3將液體發(fā)酵菌種轉(zhuǎn)接入裝有固體發(fā)酵培養(yǎng)基的蘑菇瓶進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為甘蔗渣60-90%，麩皮10-40%，pH 5_8，混勻后加入水至60_80%，裝入蘑菇瓶。培養(yǎng)條件為以60-80%體積裝瓶量，接入2-10%的液體菌種，培養(yǎng)13-22天，溫度 20- °C。
2濃縮液的制備2.1取出已長滿菌絲體的固體培養(yǎng)基，用粉碎機(jī)充分粉粹，得到富含菌絲的粉A。
2. 2將粉A加入10-20倍重量的水，置55_60°C水浴中提取l_2h，經(jīng)抽濾機(jī)抽濾得提取液C和濾渣B ；將該濾渣B再重復(fù)提取、抽濾1-2次，得提取液D。
2. 3合并所述提取液C和提取液D，55-60°C，0. 07-0. 095MPa低溫真空濃縮至可溶性固形物為5-10%，得濃縮液。
2. 4將所述濃縮液3000-4500r/min離心10-25min，去除其中的不溶物質(zhì)，即得金針菇營養(yǎng)液。
為充分公開本發(fā)明的利用胡蘿卜渣等食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法， 下面結(jié)合實(shí)施例加以說明。
實(shí)施例1利用胡蘿卜渣等食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法，包括以下步驟 1.金針菇的液體、固體發(fā)酵1. 1將金針菇保存種用馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA培養(yǎng)基)進(jìn)行活化、復(fù)壯，置(M士 1) °C恒溫箱靜止培養(yǎng)7天，得到斜面菌種，置冰箱中冷藏備用；1. 2將PDA斜面種用搖瓶培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，得到生產(chǎn)搖瓶一級(jí)種；所述的搖瓶培養(yǎng)基的配方為胡蘿卜渣2. 4%，麩皮0. 6%，KH2PO4 0. 1%，MgS04 0. 05%，加水定容至所需體積， 起始PH為7.0 ；培養(yǎng)條件為以120mL/250mL裝液量。接入Icm2的斜面菌種，旋轉(zhuǎn)式搖床 120rpm 培養(yǎng) 7d，溫度(24 士 1)°C ；1.3將液體發(fā)酵菌種轉(zhuǎn)接入裝有固體發(fā)酵培養(yǎng)基的蘑菇瓶進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為甘蔗渣30g，麩皮10g，pH自然，混勻后加入水至培養(yǎng)基擠出微量水，裝入蘑菇瓶。培養(yǎng)條件為以75%體積裝瓶量，接入5%的液體菌種，培養(yǎng)18天，溫度 03 士 1)°C。
2.濃縮液的制備2.1取出已長滿菌絲體的固體培養(yǎng)基，用粉碎機(jī)充分粉粹，得到富含菌絲的粉E。
2. 2將粉E加入13倍重量的水，置(58士 1) °C水浴中提取1. 5h，經(jīng)抽濾機(jī)抽濾得提取液G和濾渣F ；將該濾渣F再重復(fù)提取、抽濾1次，得提取液H。
2. 3合并所述提取液G和提取液H，(58 士 1) °C，0. 09MPa低溫真空濃縮至可溶性固形物為10%，得濃縮液。
2. 4將所述濃縮液4000r/min離心20min，去除其中的不溶物質(zhì)，即得金針菇營養(yǎng)液。
所得產(chǎn)品呈黃色；含有豐富的多糖和必需、非必需氨基酸，多糖含量達(dá)ang/mL，氨基酸含量可達(dá)557. 07 mg/100ml。
以上所有培養(yǎng)基配方中的化學(xué)原料均為分析純。
權(quán)利要求
1.一種利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟(1)液體培養(yǎng)以金針菇為出發(fā)菌株，經(jīng)斜面、一級(jí)搖瓶擴(kuò)大培養(yǎng)得到搖瓶一級(jí)種；(2)固態(tài)發(fā)酵以甘蔗渣為金針菇固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的主要原料，接種搖瓶一級(jí)種，然后取出已長滿菌絲體的固體培養(yǎng)基，粉粹，得到菌絲粉，即為金針菇發(fā)酵菌質(zhì)；(3)金針菇發(fā)酵菌質(zhì)用熱水浸提法獲得富含金針菇多糖和氨基酸的提取液，并制成濃縮液；最后將該濃縮液調(diào)配成營養(yǎng)液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備金針菇營養(yǎng)液的方法，其特征在于步驟(1)中所述一級(jí)搖瓶擴(kuò)大培養(yǎng)中一級(jí)搖瓶培養(yǎng)基的配制為胡蘿卜渣1_3%，麩皮0. 5-1. 5%,KH2PO4 0. 1%， MgS04 0. 05%，余量為水，上述百分比均表示重量比，起始pH為6.0-8.0 ；培養(yǎng)條件為 110-180rpm 培養(yǎng) 5_10d，溫度 20-25 0C0
3.根據(jù)權(quán)利要求1所示的利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法，其特征在于步驟(2)所述金針菇固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的配方按重量比為甘蔗渣60-90%，麩皮10-40%， PH 5-8，原料混勻后加入水至60-80% ；培養(yǎng)條件為培養(yǎng)13-22天，溫度20_25°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所示的利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法，其特征在于步驟(3)所述熱水浸提法的步驟包括a、在金針菇發(fā)酵菌質(zhì)中加入10-20倍重量的水，置55-60°C水浴中提取l_2h，抽濾；再將濾渣重復(fù)提取、抽濾1-2次，合并所有提取液；b、將提取液在55-60°C,0. 07-0. 095MPa低溫真空下濃縮，至測(cè)得可溶性固形物為 5-10%，得濃縮液；C、將所述濃縮液離心，去除其中的不溶物質(zhì)，即得金針菇營養(yǎng)液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種利用食品加工剩余物制備金針菇營養(yǎng)液的方法。所述方法以金針菇為出發(fā)菌株，經(jīng)斜面、一級(jí)搖瓶擴(kuò)大培養(yǎng)得到搖瓶一級(jí)種；再以甘蔗渣為金針菇固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的主要原料，接種搖瓶一級(jí)種，然后取出已長滿菌絲體的固體培養(yǎng)基，粉粹，得到金針菇發(fā)酵菌質(zhì)；然后用熱水浸提法獲得富含金針菇多糖和氨基酸的提取液，并制成濃縮液；最后將該濃縮液調(diào)配成營養(yǎng)液。本發(fā)明利用加工剩余物，獲得大量的所需產(chǎn)物，用熱水提取法能獲得富含金針菇多糖、氨基酸的濃縮液，解決了加工剩余物作為下腳料直接排放的污染問題，同時(shí)合理利用資源，部分代替金針菇子實(shí)體進(jìn)行應(yīng)用。本發(fā)明的一種金針菇營養(yǎng)液的制備方法，工藝穩(wěn)定可靠，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A01G1/04GK102498935SQ20111031151
公開日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年10月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月14日
發(fā)明者劉斌, 趙坤, 陳穎, 黃一帆 申請(qǐng)人:福建農(nóng)林大學(xué)