專利名稱：一種創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，屬于花生遺傳育種方法技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
花生是我國重要的油料作物、經(jīng)濟(jì)作物和食用作物，我國是世界上最大的花生生產(chǎn)、消費和出口國，我國花生產(chǎn)業(yè)在調(diào)整農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，增加農(nóng)民收入、出口創(chuàng)匯、保障國家油脂供應(yīng)等方面做出了重要貢獻(xiàn)。但是，從上個世紀(jì)80年代以來，我國花生在產(chǎn)量品質(zhì)等方面沒有獲得根本的改變，花生品種的增產(chǎn)潛力沒有得到有效提升，我國多個花生高產(chǎn)紀(jì)錄都是有80年代的主推品種海花1號創(chuàng)造的。油脂含量還沒有超過2003年育成的徐花9 號的花生新品種。因此在傳統(tǒng)系統(tǒng)育種和雜交育種的基礎(chǔ)上，必須選擇新的育種方法以創(chuàng)造有益變異的新種質(zhì)，為花生產(chǎn)量和品質(zhì)的質(zhì)的提高提供材料基礎(chǔ)。輻射誘變是一種創(chuàng)造花生新種質(zhì)的有效方法，但是由于花生種子較大，輻射誘變效果不理想，有益變異率一般在0. 2%以下，誘變成本太高，誘變后田間選擇難度太大。難以在育種上獲得廣泛的應(yīng)用，因此必須提供一種新的誘變方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的問題就是提供一種通過輻射誘變創(chuàng)造新種質(zhì)的方法，以克服現(xiàn)有條件下，誘變有益變異率低，誘變成本高，選擇難度大的問題。本發(fā)明主要提供了一種創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，該方法包括如下步驟將誘變材料用Y射線輻射使其誘變，誘變結(jié)束后，將誘變后的胚進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得組培再生苗，以組培再生苗為接穗，在砧木上進(jìn)行嫁接處理，將嫁接苗移栽到田間，選取有益變異的新種質(zhì)。本發(fā)明還進(jìn)一步提供了上述創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法的優(yōu)選技術(shù)方案作為優(yōu)選，所述誘變材料為成熟花生種子的胚。作為優(yōu)選，所述成熟花生種子的胚由下述方法制得花生成熟后，挑選飽滿的種子，用0. 05% HgCl消毒30分鐘，進(jìn)行表面消毒，用無菌水漂洗3次，脫掉種皮，去掉兩片子葉，得到花生胚。作為優(yōu)選，所述、射線輻射是指60CO-Y射線。作為優(yōu)選，所述60Co- γ射線的輻射劑量為3000-5000倫琴。作為優(yōu)選，所述組織培養(yǎng)是指將誘變后的胚接種在添加1. 5mg/L NAA和5mg/L BAP 的MS&培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織，20天后轉(zhuǎn)移到添加:3mg/L BAP的MS&芽分化培養(yǎng)基上獲
得組培再生苗。 作為優(yōu)選，所述接穗是指胚誘變后的組培再生苗，從芽叢基部切下組培再生苗，在超凈臺上將接穗下端切成長約0.5-lcm的60° V形傷口，切口平整。砧木為未誘變的同一品種的實生苗，切除距子葉節(jié)約3cm以上的主莖部分，用手術(shù)刀將砧木上端垂直劈開，切口深約0. 5-lcm。將接穗插入砧木中，使砧木和接穗的形成層緊密接觸。然后用封口膜纏繞接口，松緊適度。
作為優(yōu)選，每個胚切組培再生苗5株。作為優(yōu)選，所述組培再生苗的苗高3-4厘米；所述實生苗的苗高5-7厘米。作為優(yōu)選，所述將嫁接苗移到田間是指在超凈臺無菌嫁接后，繼續(xù)無菌培養(yǎng)3-5 天，然后移栽到含有滅過菌的營養(yǎng)土的塑料杯中，將成活的嫁接苗置于戶外正常日照環(huán)境下煉苗3-5天，然后于傍晚移栽到田間，并搭建遮陰網(wǎng)，避免正午時陽光直射。移栽后3-5 天內(nèi)早、晚各澆1次水，3-4周后撤去遮陰網(wǎng)。利用本發(fā)明提供的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法獲得的新種質(zhì)有益變異率達(dá)到30%以上，大大提升了有益變異率，并有效降低了成本。解決了傳統(tǒng)方法難以創(chuàng)造有益花生新種質(zhì)的難題，社會效益和經(jīng)濟(jì)效益顯著。
具體實施例方式以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作詳細(xì)描述。實施例1?；?號花生成熟后，挑選100粒飽滿的種子，用0. 05% HgCl消毒30分鐘，進(jìn)行表面消毒，用無菌水漂洗3次，脫掉種皮，去掉兩片子葉，得到花生胚。將花生胚用60CO-Y射線，劑量3000倫琴輻招誘變。將誘變后的胚接種在添加1. 5mg/L NAA和5mg/L BAP的MSB5 培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織，20天后轉(zhuǎn)移到添加:3mg/L BAP的MS&芽分化培養(yǎng)基上獲得組培再生苗。再生苗長到苗高3-4厘米時，從芽叢基部切下組培再生苗，在超凈臺上將接穗(胚誘變后的組培再生苗))下端切成長約0.5-lcm的60° V形傷口，切口平整。砧木為未誘變的?；?號的實生苗，苗高5-7厘米，切除距子葉節(jié)約3cm以上的主莖部分，用手術(shù)刀將砧木上端垂直劈開，切口深約0. 5-lcm。將接穗插入砧木中，使砧木和接穗的形成層緊密接觸。 然后用封口膜纏繞接口，松緊適度，每個胚切組培再生苗5株，做5個嫁接。將嫁接苗在超凈臺無菌嫁接后，繼續(xù)無菌培養(yǎng)3天，然后移栽到含有滅過菌的營養(yǎng)土的塑料杯中，將成活的嫁接苗置于戶外正常日照環(huán)境下煉苗3天，然后于傍晚時分移栽到田間，并搭建遮陰網(wǎng)， 避免正午時陽光直射。移栽后3天內(nèi)早、晚各澆1次水，保持充足的水分，之后可適當(dāng)澆水。 3周后撤去遮陰網(wǎng)，在田間正常生長，秋天收獲花生種子，經(jīng)檢測，有益變異率達(dá)到32 %。實施例2花育20號花生成熟后，挑選200粒飽滿的種子，用0. 05% HgCl消毒30分鐘，進(jìn)行表面消毒，用無菌水漂洗3次，脫掉種皮，去掉兩片子葉，得到花生胚。將花生胚用60Co- γ 射線，劑量5000倫琴輻招誘變。將誘變后的胚接種在添加1. 5mg/L NAA和5mg/LBAP的MSB5 培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織，20天后轉(zhuǎn)移到添加:3mg/L BAP的MS&芽分化培養(yǎng)基上獲得組培再生苗。組培再生苗長到苗高3-4厘米時，從芽叢基部切下組培再生苗，在超凈臺上將接穗下端切成長約0.5-lcm的60° V形傷口，切口平整。砧木為未誘變的?；?號的實生苗，苗高 5-7厘米，切除距子葉節(jié)約3cm以上的主莖部分，用手術(shù)刀將砧木上端垂直劈開，切口深約 0.5-lcm。將接穗插入砧木中，使砧木和接穗的形成層緊密接觸。然后用封口膜纏繞接口， 松緊適度，每個胚切組培再生苗5株，做5個嫁接。將嫁接苗在超凈臺無菌嫁接后，繼續(xù)無菌培養(yǎng)5天，然后移栽到含有滅過菌的營養(yǎng)土的塑料杯中，將成活的嫁接苗置于戶外正常日照環(huán)境下煉苗5天，然后于傍晚時分移栽到田間，并搭建遮陰網(wǎng)，避免正午時陽光直射。 移栽后5天內(nèi)早、晚各澆1次水，保持充足的水分，之后可適當(dāng)澆水。4周后撤去遮陰網(wǎng)，在
4田間正常生長，秋天收獲花生種子，經(jīng)檢測，獲得高油酸花生新種質(zhì)5份，高油花生新種質(zhì)3 份，總有益變異率達(dá)到36%。 以上所列實施例僅為了說明本發(fā)明的某些具體實施方式
，本領(lǐng)域技術(shù)人員在本發(fā)明基礎(chǔ)上進(jìn)行的不脫離本發(fā)明實質(zhì)內(nèi)容的改變亦在本發(fā)明保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于將誘變材料用Y射線輻射使其誘變，誘變結(jié)束后，將誘變后的胚進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得組培再生苗，以組培再生苗為接穗，在砧木上進(jìn)行嫁接處理，將嫁接苗移栽到田間，選取有益變異的新種質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述誘變材料為成熟花生種子的胚。
3.如權(quán)利要求1所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述成熟花生種子的胚由下述方法制得花生成熟后，挑選飽滿的種子，用0. 05% HgCl消毒30分鐘，進(jìn)行表面消毒，用無菌水漂洗3次，脫掉種皮，去掉兩片子葉，得到花生胚。
4.如權(quán)利要求1所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述Y射線輻射是指 60Co- γ 射線。
5.如權(quán)利要求4所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述60Co-γ射線的輻射劑量為3000-5000倫琴。
6.如權(quán)利要求1所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述組織培養(yǎng)是指將誘變后的胚接種在添加1. 5mg/L NAA和5mg/L BAP的MSB5培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織，20天后轉(zhuǎn)移到添加:3mg/L BAP的MS&芽分化培養(yǎng)基上獲得組培再生苗。
7.如權(quán)利要求1所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述接穗是指胚誘變后的組培再生苗，從芽叢基部切下組培再生苗，在超凈臺上將接穗下端切成長約0. 5-lcm的 60° V形傷口，切口平整。砧木為未誘變的同一品種的實生苗，切除距子葉節(jié)約3cm以上的主莖部分，用手術(shù)刀將砧木上端垂直劈開，切口深約0. 5-lcm。將接穗插入砧木中，使砧木和接穗的形成層緊密接觸。然后用封口膜纏繞接口。
8.如權(quán)利要求7所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于每個胚切組培再生苗5株。
9.如權(quán)利要求7所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述組培再生苗的苗高 3-4厘米；所述實生苗的苗高5-7厘米。
10.如權(quán)利要求1所述的創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，其特征在于所述將嫁接苗移到田間是指在超凈臺無菌嫁接后，繼續(xù)無菌培養(yǎng)3-5天，然后移栽到含有滅過菌的營養(yǎng)土的塑料杯中，將成活的嫁接苗置于戶外正常日照環(huán)境下煉苗3-5天，然后于傍晚移栽到田間，并搭建遮陰網(wǎng)，避免正午時陽光直射。移栽后3-5天內(nèi)早、晚各澆1次水，3-4周后撤去遮陰網(wǎng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種創(chuàng)造花生新種質(zhì)的方法，屬于花生遺傳育種方法技術(shù)領(lǐng)域。該方法通過輻射誘變創(chuàng)造新種質(zhì)，輻射材料選擇成熟種子的胚，誘變結(jié)束后，將誘變過的胚進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得組培再生苗，組培再生苗以實生苗為砧木通過嫁接方式移栽到田問。利用本發(fā)明獲得的新種質(zhì)有益變異率達(dá)到30％以上。解決了傳統(tǒng)方法難以創(chuàng)造有益花生新種質(zhì)的難題，社會效益和經(jīng)濟(jì)效益顯著。
文檔編號A01G1/06GK102246692SQ20111010584
公開日2011年11月23日 申請日期2011年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月27日
發(fā)明者楊慶利, 王晶珊, 禹山林 申請人:山東省花生研究所