專利名稱：一種組培條件下的棗樹微嫁接方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組織培養(yǎng)條件下的棗樹微嫁接方法。
技術(shù)背景通常微嫁接是指在組培條件下將砧木與接穗進(jìn)行嫁接的技術(shù)。自1972年Murashige創(chuàng)立 了微芽嫁接技術(shù)以來，微嫁接技術(shù)在蘋果、梨、葡萄及柑桔等果樹的研究與生產(chǎn)中得到廣泛 應(yīng)用，主要包括病毒的快速檢測(cè)、果樹復(fù)壯、脫毒快繁及對(duì)嫁接親和性進(jìn)行早期鑒定等方面。棗瘋病(Jujube witches' broom disease)是棗樹生產(chǎn)上發(fā)生最普遍、危害最嚴(yán)重的傳染性病 害，選育優(yōu)良抗病品種是解決棗瘋病問題的根本途徑。河北農(nóng)業(yè)大學(xué)中國(guó)棗研究中心棗瘋病 課題組在田間條件下，經(jīng)過多年田間嫁接篩選，已選出兩份高抗種質(zhì)。我國(guó)有700多個(gè)棗品 種，進(jìn)一步篩選和發(fā)掘新的更有價(jià)值的抗病種質(zhì)潛力巨大。但是田間嫁接篩選受環(huán)境、季節(jié) 氣候等自然因素的限制，而且條件難以控制、工作量大，大大影響了篩選效率和進(jìn)程。如果能在組培條件下建立微嫁接體系，利用待檢測(cè)品種作為接穗，帶病組培苗為砧木， 可一年四季進(jìn)行抗病種質(zhì)和品種的篩選工作，可大大提高工作效率，縮短工作進(jìn)程。在組培 條件下建立一套高效的微嫁接體系，不僅可以加快抗棗瘋病品種的篩選進(jìn)程，而且可用于許 多的相關(guān)研究。通過文獻(xiàn)査閱，在棗的組培微嫁接方面還未見報(bào)道。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明建立了一套成熟的棗樹微嫁接技術(shù)體系，為抗棗瘋病品種篩選等相關(guān)研究提供了 技術(shù)支撐。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是以組培苗中部的帶葉莖段為砧木，以待檢 測(cè)品種組培苗中部的不帶葉莖段為接穗，在無菌條件下，采用劈接法進(jìn)行微嫁接，接后在培 養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)成苗。本發(fā)明的具體內(nèi)容，即棗樹微嫁接的具體方法如下(1) 砧木與接穗的準(zhǔn)備和預(yù)處理。選接穗品種(品系)的健壯組培苗，切掉頂端和基部 后，剪成2 3cm長(zhǎng)的不帶葉片莖段為接穗；選砧木品種(品系)的健壯組培苗，切掉頂端和 基部后，剪成2 3cm長(zhǎng)的帶葉片莖段為砧木；將獲得的砧木和接穗，用濃度為0.5-1.0 mg/L 的GA3溶液浸泡預(yù)處理10min。(2) 微嫁接方法。將處理好的砧木和接穗，采用劈接法進(jìn)行微嫁接，用錫箔捆綁嫁接口， 獲得微嫁接苗，然后將微嫁接苗砧木端朝下，直立插入瓶中的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，瓶口用棉塞封上并罩上單層塑料封口膜，綁縛結(jié)實(shí)。(3)培養(yǎng)條件。微嫁接苗的適宜基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基、其中蔗糖濃度為50g/L，培 養(yǎng)基滅菌前pH值6.0，培養(yǎng)室溫度為28°C 。本發(fā)明專利的有益效果是，通過對(duì)砧木和接穗的選擇和預(yù)處理、嫁接及綁縛方法、嫁接 口處理、適宜培養(yǎng)條件等進(jìn)行研究，建立了一套較完善的棗樹微嫁接技術(shù)體系，以接穗萌發(fā) 出新芽為成活標(biāo)準(zhǔn)，嫁接成活率可達(dá)83%。利用該技術(shù)，可在人工控制條件下，實(shí)現(xiàn)抗病品 種和種質(zhì)的規(guī)模化快速篩選，大大提高篩選效率，并有利于開展相關(guān)的病原快速檢測(cè)和脫除 病毒等研究。


圖1是接穗和砧木處理后嫁接前的狀態(tài)。 圖2是微嫁接后在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況。
具體實(shí)施方式
以婆棗健壯的未生根帶棗瘋病組培苗為砧木，以待檢測(cè)品種南京大木棗和鈴棗的健壯組 培苗為接穗進(jìn)行微嫁接；接穗和砧木均選擇中部莖段，保留砧木莖段的葉片，而去除接穗莖 段的葉片；把砧木和接穗剪成2 3cm莖段后，經(jīng)0.5-1.0mg/L的GA3溶液浸泡10min，用劈 接法進(jìn)行嫁接，嫁接后用錫箔捆綁嫁接口，嫁接苗直立放置于培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)基中，用單層封 口膜和棉塞綁縛瓶口；培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，其中蔗糖濃度為50g/L，培養(yǎng)基滅菌前pH值為 6.0，在培養(yǎng)室溫度為28"的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；以接穗萌發(fā)出新芽為成活標(biāo)準(zhǔn)，嫁接成活率可 達(dá)83%。
權(quán)利要求
1.一種組培條件下的棗樹微嫁接方法，其特征在于通過砧木和接穗的選擇及預(yù)處理、離體微嫁接、培養(yǎng)，獲得微嫁接組培苗。
2. 按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于包括以下步驟(1) 砧木和接穗的選擇及預(yù)處理選接穗品種(品系)的健壯組培苗，切掉頂端和基部后， 剪成2 3cm長(zhǎng)的不帶葉片莖段為接穗；選砧木品種(品系)的健壯組培苗，切掉頂端和基部 后，剪成2 3cm長(zhǎng)的帶葉片莖段為砧木；將獲得的砧木和接穗，用濃度為0.5-1.0 mg/L的 GA3溶液浸泡預(yù)處理10min。(2) 離體微嫁接和培養(yǎng)將經(jīng)歩驟(l)獲得的砧木和接穗，在無菌條件下，用劈接法進(jìn)行 微嫁接，用錫箔捆綁嫁接口，獲得微嫁接苗，然后將微嫁接苗砧木端朝下，直立插入瓶中的 培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，瓶口用棉塞封上并罩上單層塑料封口膜，綁縛結(jié)實(shí)。
3. 按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于微嫁接苗的基本培養(yǎng)基為MS、蔗糖濃度為 50g/L，培養(yǎng)基滅菌前pH值6.0，培養(yǎng)室溫度為28'C。
全文摘要
將接穗品種(品系)的健壯組培苗剪成2～3cm長(zhǎng)的不帶葉片莖段為接穗，將砧木品種(品系)的健壯組培苗剪成2～3cm長(zhǎng)的帶葉片莖段為砧木，用濃度為0.5～1.0mg/L的GA₃溶液浸泡預(yù)處理10min；在無菌條件下，用劈接法進(jìn)行微嫁接，并用錫箔捆綁嫁接口，將微嫁接苗直立插入培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，用棉塞封住培養(yǎng)瓶瓶口并罩上單層塑料封口膜，綁縛結(jié)實(shí)；微嫁接苗的基本培養(yǎng)基為MS、蔗糖濃度為50g/l，培養(yǎng)基滅菌前pH值6.0，培養(yǎng)室溫度為28℃。利用此微嫁接方法，嫁接成活率可達(dá)83％，可實(shí)現(xiàn)抗病品種和種質(zhì)的規(guī)?；焖俸Y選，并有利于開展相關(guān)的病原快速檢測(cè)和脫除病毒等研究。
文檔編號(hào)A01H4/00GK101248733SQ200810089509
公開日2008年8月27日 申請(qǐng)日期2008年4月3日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月3日
發(fā)明者麗 代, 劉孟軍, 劉曉光, 秦子禹, 錦 趙 申請(qǐng)人:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)